Método para predecir y monitorizar la respuesta clínica a terapia inmunomoduladora.
Método para medir cuantitativamente la respuesta de un paciente a un fármaco inmunomodulador,
comprendiendo el método las siguientes etapas:
a. activar células mononucleares de sangre periférica (PBMC), leucocitos totales o subpoblaciones específicas de PBMC tales como linfocitos T, células T reguladoras (Treg), NK (linfocitos citolíticos naturales), macrófagos o linfocitos B, obtenidos de una muestra biológica seleccionada de la lista que consiste en derivados celulares de la sangre o en la sangre del paciente, a través de la incubación con un compuesto de activación de linfocitos seleccionado de la lista que consiste en: anticuerpos agonistas anti-CD3 (TCR) y anti-CD28, ionomicina y PMA (miristato-acetato de forbol), lectinas, superantígenos, lipopolisacáridos (LPS), determinantes antigénicos o epítopos o a través de una reacción linfocítica mixta;
b. obtener un hidrogel que comprende a su vez las PBMC activadas, leucocitos totales o subpoblaciones específicas de PBMC, incrustados dentro del hidrogel, en el que el hidrogel está ubicado en un soporte caracterizado por tener unas proporciones dimensionales en las que uno de los tres ejes espaciales (eje longitudinal) es al menos 4 veces más largo que el promedio de longitud de los otros dos ejes, de modo que el hidrogel es capaz de proporcionar un flujo en gradiente de fármaco medible y estable en el eje mayor de los pocillos canalizados descritos, en el que los pocillos canalizados contienen un volumen de hidrogel por canal de al menos 40 μl y en el que el pocillo canalizado debe estar completamente cubierto por el hidrogel en su eje longitudinal y debe cubrir al menos el 30% de la altura del pocillo canalizado;
c. poner en contacto el hidrogel de la etapa b) con uno o más fármacos inmunomoduladores;
d. añadir una disolución de un compuesto capaz de revelar una zona inhibidora alrededor del sitio de contacto del fármaco inmunosupresor con el hidrogel;
e. obtener la cuantificación del gradiente de fármaco inmunomodulador formado, preferiblemente mediante la adquisición de imágenes o la cuantificación de señales (absorbancia, fluorescencia o luminiscencia);
en el que el hidrogel se forma a través de la reticulación no covalente (hidrogeles físicos) de cadenas poliméricas, en el que la fracción polimérica total representa menos del 5% (5 g/100 ml de hidrogel), y en el que la fracción polimérica total consiste en metilcelulosa y colágeno, en el que el contenido de metilcelulosa es igual o inferior al 4% (g/100 ml de hidrogel), preferiblemente inferior o igual al 2% (g/100 ml de hidrogel), y el contenido de colágeno es inferior o igual al 0,3% (g/100 ml de hidrogel).
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E17382399.
Solicitante: Biohope Scientific Solutions for Human Health S.L.
Nacionalidad solicitante: España.
Provincia: MADRID.
Inventor/es: DOTOR DE LAS HERRERIAS,JAVIER, DI SCALA,MARIANNA, SÁNCHEZ,VERÓNICA, PORTERO SÁNCHEZ,ISABEL.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N5/078 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células de la sangre o del sistema inmune.
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
PDF original: ES-2740949_T3.pdf
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