Aislamiento de secuencias nucleotídicas dirigido por probabilidad (PINS).
Un método in vitro para enriquecer una molécula de ADN diana a partir de una muestra polinucleotídica mixta que comprende las etapas de:
a) proporcionar una muestra polinucleotídica mixta que contiene dicha molécula de ADN diana, en la que dicha molécula de ADN diana comprende una o más secuencias consecutivas únicas de al menos 10 nucleótidos,
b) diluir en serie dicha muestra polinucleotídica mixta hasta que la probabilidad de detectar dicha molécula de ADN diana en una muestra diluida de polinucleótidos mixtos sea menor de 0,75, preferiblemente menor de 0,50 o incluso más preferiblemente menor de 0,25, y
c) producir un número suficiente de duplicaciones de la muestra diluida de polinucleótidos mixtos hasta que la probabilidad de detectar dicha molécula de ADN diana en al menos una de las muestras de dilución duplicadas sea de al menos 0,75, preferiblemente de 0,80 a 0,95;
d) amplificar el ADN en dichas muestras diluidas duplicadas para aumentar la abundancia de ADN en cada muestra;
e) detectar la presencia o ausencia de dicha molécula de ADN diana en dichas muestras de dilución duplicadas en la etapa (d), en la que la frecuencia de dicha molécula de ADN diana en dicha muestra de dilución duplicada aumenta en comparación con la muestra polinucleotídica mixta en la etapa (a);
f) diluir en serie al menos una muestra de dilución duplicada detectada en la etapa e) que contiene dicha molécula de ADN hasta que la probabilidad de detectar dicha molécula de ADN en una muestra diluida sea menor de 0,75, y repetir las etapas (c) a (e) o (f) al menos una vez.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2013/077844.
Solicitante: Samplix S.a.r.l.
Nacionalidad solicitante: Luxemburgo.
Dirección: 58 Rue Charles Martel 2134 Luxembourg LUXEMBURGO.
Inventor/es: MIKKELSEN,MARIE JUST, KVIST,THOMAS.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2630377_T3.pdf
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