COMPOSICIONES INMUNOESTIMULADORAS Y MÉTODOS PARA ESTIMULAR UNA RESPUESTA INMUNE.

Una composición inmunoestimuladora que comprende: una porción de modificador de la respuesta inmunitaria emparejada con una porción antigénica,

de forma que se limita la difusión independiente de la porción de modificador de la respuesta inmunitaria con respecto a la porción antigénica, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria es un compuesto de fórmula: en la que:R1 es un grupo conector; R2 se selecciona del grupo que consiste en: -hidrógeno; -alquilo; -alquenilo; -arilo; -arilo sustituido; -heteroarilo; -heteroarilo sustituido; -alquil-O-alquilo; -alquil-S-alquilo; -alquil-O-arilo; -alquil-S-arilo; -alquil-O-alquenilo; -alquil-S-alquenilo; y -alquilo o alquenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en: -OH; -halógeno; -N(R5)2; -CO-N(R5)2; -CS-N(R5)2; -SO2-N(R5)2; -NR5-CO-alquilo C1-10; -NR5-CS-alquilo C1-10; -NR5-SO2-alquilo C1-10; -CO-alquilo C1-10; -CO-O-alquilo C1-10; -N3; -arilo; -arilo sustituido; -heteroarilo; -heteroarilo sustituido; -heterociclilo; -heterociclilo sustituido; -CO-arilo; -CO-(arilo sustituido); -CO-heteroarilo; y -CO-(heteroarilo sustituido); R3 y R4 son cada uno independientemente: -hidrógeno; -halógeno; -alquilo; -alquenilo; -O-alquilo; -S-alquilo; y -N(R5)2; o cuando se consideran en conjunto, R3 y R4 forman un grupo arilo o heteroarilo fusionado que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en: -halógeno; -alquilo; -alquenilo; -O-alquilo; -S-alquilo; y -N(R5)2; o cuando se consideran en conjunto, R3 y R4 forman un anillo saturado de 5 a 7 miembros fusionado que contiene opcionalmente uno o más heteroátomos, y que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en: -halógeno; -alquilo; -alquenilo; -O-alquilo; -S-alquilo; y -N(R5)2; y cada R5 es independientemente hidrógeno o alquilo C1-10

Composiciones inmunoestimuladoras y métodos para estimular una respuesta inmune.

Esta solicitud reivindica prioridad de la solicitud de patente provisional de EE.UU. nº 60/403.846, presentada el 15 de agosto de 2002.

Los modificadores de la respuesta inmunitaria ("IRMs") incluyen compuestos que poseen una actividad inmunomoduladora potente que incluye, pero sin limitación, la actividad antiviral y antitumoral. Ciertos IRMs modulan la producción y la secreción de citocinas. Por ejemplo, ciertos compuestos IRM inducen la producción y la secreción de citocinas tales como, p.ej., interferones de tipo I, TNF-α, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, MIP-1, y/o MCP-1. Como un ejemplo adicional, ciertos compuestos IRM pueden inhibir la producción y la secreción de ciertas citocinas TH-2, tales como IL-4 e IL-5. Además, se cree que ciertos compuestos IRM inhiben IL-1 y TNF (pat. de EE.UU. nº 6.518.265).

Ciertos IRMs son moléculas orgánicas pequeñas (p.ej., con un peso molecular menor de alrededor de 1000 Daltons, en ciertos casos menor de alrededor de 500 Daltons, a diferencia de las proteínas o péptidos biológicos grandes) tales como los descritos, por ejemplo, en las patentes de EE.UU. nºs 4.689.338; 4.929.624; 4.988.815; 5.037.986; 5.175.296; 5.238.944; 5.266.575; 5.268.376; 5.346.905; 5.352.784; 5.367.076; 5.389.640; 5.395.937; 5.446.153; 5.482.936; 5.693.811; 5.741.908; 5.756.747; 5.939.090; 6.039.969; 6.083.505; 6.110.929; 6.194.425; 6.245.776; 6.331.539; 6.376.669; 6.451.810; 6.525.064; 6.545.016; 6.545.017; 6.558.951; y 6.573.273; la patente europea 0 394 026; la publicación de patente nº 2002/0055517; y las publicaciones de patentes internacionales nºs WO 01/74343; WO 02/46188; WO 02/46189; WO 02/46190; WO 02/46191; WO 02/46192; WO 02/46193; WO 02/46749; WO 02/102377; WO 03/020889; WO 03/043572 y WO 03/045391.

Los ejemplos adicionales de IRMs de moléculas pequeñas incluyen ciertos derivados de purina (tales como los descritos en las patentes de EE.UU. nºs 6.376.501, y 6.028.076), ciertos derivados de amida de imidazoquinolina (tales como los descritos en la patente de EE.UU. nº 6.069.149), ciertos derivados de bencimidazol (tales como los descritos en la patente de EE.UU. nº 6.387.938), y ciertos derivados de una 4-aminopirimidina fusionada a un anillo heterocíclico de cinco miembros que contiene nitrógeno (tales como los derivados de adenina descritos en las patentes de EE.UU. nºs 6.376.501; 6.028.076 y 6.329.381; y en el documento WO 02/08595).

Otros IRMs incluyen moléculas biológicas grandes tales como las secuencias oligonucleotídicas. Ciertas secuencias oligonucleotídicas de IRM contienen dinucleótidos de citosina-guanina (CpG) y se describen, por ejemplo, en las patentes de EE.UU. nºs 6.194.388; 6.207.646; 6.239.116; 6.339.068; y 6.406.705. Ciertos oligonucleótidos que contienen CpG pueden incluir motivos estructurales inmunomoduladores sintéticos tales como los descritos, por ejemplo, en las pat. de EE.UU. nºs 6.426.334 y 6.476.000. Otras secuencias nucleotídicas de IRM carecen de CpG y se describen, por ejemplo, en la Publicación de Patente Internacional nº WO 00/75304.

Ciertos IRMs pueden funcionar como agonistas de receptores similares a Toll (TLR). Ciertos IRMs de moléculas pequeñas pueden actuar a través de uno o más de los TLRs 2, 4, 6, 7, y 8. CpG puede actuar a través de TLR 9.

Mediante la estimulación de ciertos aspectos del sistema inmunitario, así como mediante la inhibición de otros aspectos (véanse, p.ej., las patentes de EE.UU. nºs 6.039.969 y 6.200.592), se pueden usar los IRMs para tratar muchas enfermedades. Por ejemplo, el IRM de molécula pequeña imiquimod es útil para el tratamiento de las verrugas perianales y genitales externas provocadas por el papilomavirus humano [véase, p.ej., Tomai et al, Antiviral Research 28(3): 253-64 (1995)]. Los ejemplos de otras enfermedades que se pueden tratar mediante el uso de IRMs incluyen, pero sin limitación, carcinoma de células basales, eccema, trombocitemia esencial, hepatitis B, esclerosis múltiple, enfermedades neoplásicas, psoriasis, artritis reumatoide, herpes simple tipo I, y herpes simple tipo II.

Los compuestos IRM pueden modular también la inmunidad humoral estimulando la producción de anticuerpos por las células B. Además, se ha demostrado que diversos IRMs son útiles como adyuvantes en vacunas (véanse, p.ej., las pat. de EE.UU. nºs 6.083.505 y 6.406.705).

El documento WO 00/40228 describe ciertos compuestos de IRM para el tratamiento de afecciones en y por debajo de las superficies mucosas.

Se ha descubierto que los IRMs, en especial los IRMs de moléculas pequeñas y los agonistas de TLR 2, 4, 6, 7, y 8, son sorprendentemente eficaces en la estimulación de una respuesta inmunitaria cuando se emparejan químicamente o físicamente con un antígeno para formar una composición inmunoestimuladora. El efecto inmunoestimulador de una composición particular puede ser mayor que el efecto inmunoestimulador del mismo antígeno y el mismo IRM o un IRM comparable al de la composición, pero administrados en una forma sin empare- jar.

La presente invención proporciona una composición inmunoestimuladora que incluye una porción de modificador de la respuesta inmunitaria (IRM) emparejada con una porción antigénica, de forma que se limita la difusión independiente de la porción de modificador de la respuesta inmunitaria con respecto a la porción antigénica, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria es un compuesto de fórmula:

en la que:

R₁ es un grupo conector;

R₂ se selecciona del grupo que consiste en:

-hidrógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-arilo;

-arilo sustituido;

-heteroarilo;

-heteroarilo sustituido;

-alquil-O-alquilo;

-alquil-S-alquilo;

-alquil-O-arilo;

-alquil-S-arilo;

-alquil-O-alquenilo;

-alquil-S-alquenilo; y

-alquilo o alquenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

1. Una composición inmunoestimuladora que comprende:

una porción de modificador de la respuesta inmunitaria emparejada con una porción antigénica, de forma que se limita la difusión independiente de la porción de modificador de la respuesta inmunitaria con respecto a la porción antigénica, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria es un compuesto de fórmula:

en la que:

R₁ es un grupo conector;

R₂ se selecciona del grupo que consiste en:

-hidrógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-arilo;

-arilo sustituido;

-heteroarilo;

-heteroarilo sustituido;

-alquil-O-alquilo;

-alquil-S-alquilo;

-alquil-O-arilo;

-alquil-S-arilo;

-alquil-O-alquenilo;

-alquil-S-alquenilo; y

-alquilo o alquenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-OH;

-halógeno;

-N(R₅)₂;

-CO-N(R₅)₂;

-CS-N(R₅)₂;

-SO₂-N(R₅)₂;

-NR₅-CO-alquilo C_1-10;

-NR₅-CS-alquilo C_1-10;

-NR₅-SO₂-alquilo C_1-10;

-CO-alquilo C_1-10;

-CO-O-alquilo C_1-10;

-N₃;

-arilo;

-arilo sustituido;

-heteroarilo;

-heteroarilo sustituido;

-heterociclilo;

-heterociclilo sustituido;

-CO-arilo;

-CO-(arilo sustituido);

-CO-heteroarilo; y

-CO-(heteroarilo sustituido);

R₃ y R₄ son cada uno independientemente:

-hidrógeno;

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂;

o cuando se consideran en conjunto, R₃ y R₄ forman un grupo arilo o heteroarilo fusionado que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂;

o cuando se consideran en conjunto, R₃ y R₄ forman un anillo saturado de 5 a 7 miembros fusionado que contiene opcionalmente uno o más heteroátomos, y que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂; y

cada R₅ es independientemente hidrógeno o alquilo C_1-10.

2. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria es un agonista del receptor 2 similar a Toll, receptor 4 similar a Toll, receptor 6 similar a Toll, receptor 7 similar a Toll, o receptor 8 similar a Toll.

3. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria comprende una amina de imidazoquinolina; una amina de tetrahidroimidazoquinolina; una amina de imidazopiridina; una amina de imidazopiridina sustituida con aril-éter; una amina de imidazoquinolina con puente 1,2; una amina de cicloalquilimidazopiridina fusionada en 6,7; una amina de imidazonaftiridina; una amina de tetrahidroimidazonaftiridina; una amina de oxazoloquinolina; una amina de tiazoloquinolina; una amina de oxazolopiridina; una amina de tiazolopiridina; una amina de oxazolonaftiridina; o una amina de tiazolonaftiridina.

4. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria y la porción antigénica están acopladas covalentemente.

5. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la porción de modificador de la respuesta inmunitaria y la porción antigénica están emparejadas mediante una asociación física o química distinta del acoplamiento covalente.

6. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la composición comprende una suspensión coloidal.

7. La composición inmunoestimuladora de la reivindicación 1, en la que la porción antigénica comprende una secuencia de aminoácidos, una secuencia de nucleótidos, un lipopolisacárido, un prión, una bacteria, un virus, o un hongo.

8. Un conjugado inmunoestimulador de fórmula:

en la que:

R₁ es un grupo conector;

R₂ se selecciona del grupo que consiste en:

-hidrógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-arilo;

-arilo sustituido;

-heteroarilo;

-heteroarilo sustituido;

-alquil-O-alquilo;

-alquil-S-alquilo;

-alquil-O-arilo;

-alquil-S-arilo;

-alquil-O-alquenilo;

-alquil-S-alquenilo; y

-alquilo o alquenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-OH;

-halógeno;

-N(R₅)₂;

-CO-N(R₅)₂;

-CS-N(R₅)₂;

-SO₂-N(R₅)₂;

-NR₅-CO-alquilo C_1-10;

-NR₅-CS-alquilo C_1-10;

-NR₅-SO₂-alquilo C_1-10;

-CO-alquilo C_1-10;

-CO-O-alquilo C_1-10;

-N₃;

-arilo;

-arilo sustituido;

-heteroarilo;

-heteroarilo sustituido;

-heterociclilo;

-heterociclilo sustituido;

-CO-arilo;

-CO-(arilo sustituido);

-CO-heteroarilo; y

-CO-(heteroarilo sustituido);

R₃ y R₄ son cada uno independientemente:

-hidrógeno;

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂;

o cuando se consideran en conjunto, R₃ y R₄ forman un grupo arilo o heteroarilo fusionado que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂;

o cuando se consideran en conjunto, R₃ y R₄ forman un anillo saturado de 5 a 7 miembros fusionado que contiene opcionalmente uno o más heteroátomos, y que está sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:

-halógeno;

-alquilo;

-alquenilo;

-O-alquilo;

-S-alquilo; y

-N(R₅)₂;

cada R₅ es independientemente hidrógeno o alquilo C_1-10; y

n es 1 a 10; o

una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

9. Un método para la estimulación de células productoras de anticuerpos in vitro, y el método comprende:

a) proporcionar una composición inmunoestimuladora según la reivindicación 1; y

b) permitir que la composición inmunoestimuladora se una a las células productoras de anticuerpos.

10. Una composición inmunoestimuladora según la reivindicación 1 para el uso en la inducción de una respuesta inmunitaria en un organismo hacia la porción antigénica.