Reactivos soportados, métodos y dispositivos.

Un método de suministro de al menos un reactivo a un dispositivo para procesamiento de material de muestras, comprendiendo el método:

proporcionar un film de soporte

(320) con una capa de reactivo seca (310) que incluye el al menos un reactivo; proporcionar un dispositivo microfluídico con al menos una cámara (55):

disponer la porción de la capa de reactivo del film de soporte (320) recubierta con la capa de reactivo (310) en el interior de la al menos una cámara (55) del dispositivo para procesamiento de material de muestras, en donde la al menos una cámara (55) puede contener o canalizar un fluido; en donde la capa de reactivo (310) está dimensionada para adaptarla en el interior de la al menos una cámara (55) del dispositivo para procesamiento del material de muestra; y

en donde el al menos un reactivo se adapta en el interior de una abertura de la cámara (55), de tal modo que la capa de reactivo (310) está en el interior de la cámara (55) mientras que el film de soporte (320), aunque no se encuentra en el interior de la cámara (55), está dimensionado para solapar la abertura y forma una superficie interior de la cámara (55) en la abertura.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2008/061484.

Solicitante: 3M INNOVATIVE PROPERTIES COMPANY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 3M CENTER POST OFFICE BOX 33427 SAINT PAUL, MN 55133-3427 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: BEDINGHAM,WILLIAM, DANIELSON,MICHAEL E, PARTHASARATHY,RANJANI, FALETTI,JOHN C.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION B — TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES > PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL > APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA,... > B01L3/00 (Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F))
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > G01N35/00 (Análisis automático no limitado a procedimientos o a materiales tratados en uno sólo de los grupos G01N 1/00 - G01N 33/00; Manipulación de materiales a este efecto)

PDF original: ES-2453379_T3.pdf

 

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Reactivos soportados, métodos y dispositivos.

Fragmento de la descripción:

Reactivos soportados, métodos y dispositivos Los reactivos biológicos asociados con las técnicas de manipulación del ácido nucleico pueden ser caros y estar sujetos a degradación durante la preparación, la conservación y/o la utilización. Las técnicas de manipulación del 5 ácido nucleico incluyen, por ejemplo, métodos de amplificación tales como la reacción en cadena de polimerasa (PCR) ; métodos de amplificación de polinucleótidos diana tales como la replicación de secuencias auto-sostenidas (3SR) y la amplificación por desplazamiento de cadena (SDA) ; métodos basados en amplificación de una señal unida al polinucleótido diana, tales como la amplificación de DNA "de cadena ramificada"; métodos basados en la amplificación de DNA sonda, tales como la reacción en cadena de ligasa (LCR) y la amplificación de la replicasa QB

(QBR) ; métodos basados en transcripción, tales como transcripción activada por ligación (LAT) , amplificación basada en secuencias de ácido nucleico (NASBA) , amplificación bajo el nombre comercial INVADER, y amplificación mediada transcripcionalmente (TMA) ; y diversos otros métodos de amplificación, tales como la reacción en cadena de reparación (RCR) y la reacción de la sonda de ciclación (CPR) . Reactivos biológicos tales como enzimas, cebadores, y sondas se utilizan en la amplificación y detección de ácido nucleico.

Típicamente, los reactivos biológicos, tales como enzimas, se guardan en una solución de glicerol a -20ºC o en forma seca para aumentar la estabilidad de almacenamiento. Ejemplos de formas secas incluyen polvos, esferas, tabletas, y films vítreos delgados. Sin embargo, los polvos pueden ser difíciles de medir, las estructuras liofilizadas tales como esferas son frágiles y tienden a desintegrarse cuando se manipulan, y las tabletas y films vítreos delgados pueden ser de disolución lenta.

US-A-4.363.874 da a conocer un elemento analítico multicapa para detección de un ligando, y que tiene una capa de reactivo sensible al ligando, una capa reflectante de radiaciones, y una capa de soporte.

US-A-5.415.838 se refiere a un portador que proporciona una zona de reacción para detección colorimétrica de una sustancia gaseosa tóxica. Una lámina compuesta que contiene una lámina portadora de reactivo que tiene una matriz puntual se mantiene entre una parte superior y una parte inferior.

Aun cuando se han considerado varios formatos para conservar y suministrar reactivos biológicos, existe una necesidad continuada de formatos de reactivos biológicos que puedan fabricarse, conservarse y utilizarse fácilmente.

La presente invención está definida por las características de las reivindicaciones y proporciona generalmente métodos que implican el suministro y la utilización de un film de soporte recubierto con una capa de reactivo. El film 30 de soporte imparte estabilidad dimensional y tenacidad a la capa de reactivo sin interferir sustancialmente con la función del o de los reactivos en la capa de reactivo. De este modo, el reactivo puede estar provisto de una cantidad mínima de materiales asociados, tales como polímeros, cargas, plastificantes, etc., que podrían utilizarse en caso contrario en la capa de reactivo para estabilidad y tenacidad en ausencia del film de soporte. El film de soporte recubierto con la capa de reactivo puede utilizarse ventajosamente para proporcionar reactivos biológicos en una forma dimensionalmente estable, que es suficientemente tenaz para permitir la manipulación, con inclusión de la fabricación, empaquetado, transporte, conservación, y/o colocación en un dispositivo en el cual se utilizan los reactivos. Además, el film de soporte recubierto con la capa de reactivo puede prepararse por separado y con independencia de cualquier dispositivo o porción de un dispositivo en el o la cual puede utilizarse la capa de reactivo.

El término "que comprende" y variaciones del mismo (v.g., comprende, incluye, etc.) no tienen un significado limitante donde estos términos aparecen en la descripción y las reivindicaciones.

Como se utiliza en esta memoria, "un", "uno/a", "el/la", "al menos uno/una" y "uno/una o más" se utilizan intercambiablemente, a no ser que el contexto dicte claramente otra cosa.

Asimismo en esta memoria, las citas de intervalos numéricos por puntos finales incluyen todos los números 45 subsumidos en el interior de dicho intervalo (v.g., 5 μ a 20 μ incluye 5, 5, 5, 6, 0, 6, 75, 7, 38, 8, 72, 10, etc.) .

El sumario anterior de la presente invención no pretende describir cada realización expuesta o cada implementación de la presente invención. La descripción que sigue ejemplifica más particularmente realizaciones ilustrativas.

DESCRIPCIONES BREVES DE LAS FIGURAS

FIG. 1 es una vista desde arriba de varias cámaras exteriores de amplificación de un disco microfluídico con un film 50 de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo en cada cámara.

FIG. 2 es la vista desde arriba de un dispositivo microfluídico con un film de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo en cada una de las cámaras exteriores del dispositivo.

FIG. 3 es una vista en planta desde arriba de una cámara en el interior de un dispositivo microfluídico con un film de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo situada en la cámara.

FIG. 4 es una vista en sección transversal de una cámara en el interior de un dispositivo microfluídico con un film de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo situada en la cámara.

FIG. 5 es una vista desde arriba de una pluralidad de films de soporte dimensionados recubiertos con una capa de reactivo adherida a una pluralidad de posiciones en una hoja.

FIG. 6 es una vista en sección transversal de un film de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo adherida a una hoja.

FIG. 7 es una vista en perspectiva de un film de soporte recubierto con una capa de reactivo.

FIG. 8 es una vista en perspectiva de un film de soporte alternativo recubierto con una capa de reactivo, en donde la capa de reactivo cubre una porción del film de soporte.

FIG. 9 es una vista en sección transversal de un film de soporte dimensionado recubierto con una capa de reactivo adherida a una hoja, en donde la capa de reactivo cubre una porción del film de soporte.

FIG. 10 es una vista en sección transversal de una cámara en el interior de un dispositivo microfluídico con un film de soporte recubierto con una capa de reactivo, en donde la capa de reactivo está dimensionada para adaptarse en el interior de la cámara, y en donde el film de soporte cierra herméticamente una abertura de la cámara, y la capa de reactivo está posicionada en el interior de la cámara.

Pueden proporcionarse ahora reactivos biológicos en una capa de reactivo sobre de soporte que proporciona la estabilidad dimensional y tenacidad necesarias durante la manipulación, por ejemplo, durante la fabricación, el empaquetado, la conservación, y/o la colocación en un dispositivo en el que se utilizan los reactivos biológicos. La tenacidad se refiere a la resistencia a la rotura o fragmentación, de tal modo que la capa de reactivo y el film de soporte se mantengan intactos.

En algunas realizaciones, en las que la capa de reactivo seca o la capa de reactivo seca y el film de soporte están dimensionados para adaptarse en el interior de una cámara, la capa de reactivo seca o la capa de reactivo seca y el film de soporte comprende un área de al menos aproximadamente 0, 1 mm2, 1 mm2, 2 mm2, 5 mm2, o 10 mm2. Para algunas de estas realizaciones, la capa de reactivo seca o la capa de reactivo seca y el film de soporte comprende 25 un área de al menos aproximadamente... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un método de suministro de al menos un reactivo a un dispositivo para procesamiento de material de muestras, comprendiendo el método:

proporcionar un film de soporte (320) con una capa de reactivo seca (310) que incluye el al menos un reactivo;

proporcionar un dispositivo microfluídico con al menos una cámara (55) :

disponer la porción de la capa de reactivo del film de soporte (320) recubierta con la capa de reactivo (310) en el interior de la al menos una cámara (55) del dispositivo para procesamiento de material de muestras, en donde la al menos una cámara (55) puede contener o canalizar un fluido; en donde la capa de reactivo (310) está dimensionada para adaptarla en el interior de la al menos una cámara (55) del dispositivo para procesamiento del material de muestra; y

en donde el al menos un reactivo se adapta en el interior de una abertura de la cámara (55) , de tal modo que la capa de reactivo (310) está en el interior de la cámara (55) mientras que el film de soporte (320) , aunque no se encuentra en el interior de la cámara (55) , está dimensionado para solapar la abertura y forma una superficie interior de la cámara (55) en la abertura.

2. Un dispositivo para procesamiento de material de muestra, siendo el dispositivo un dispositivo microfluídico que tiene una pluralidad de cámaras (55) que pueden contener o canalizar un fluido, en donde una porción de capa de reactivo seca de un film de soporte (320) recubierto con la capa de reactivo seco (310) está dimensionada para adaptarse en el interior de y está contenida en el interior de al menos una cámara (55) del dispositivo, y caracterizado porque la capa de reactivo (310) está adaptada en el interior de una abertura en la al menos una cámara (55) , de tal modo que la capa de reactivo (310) está en el interior de la cámara (55) mientras que el film de soporte (320) , aunque no en el interior de la cámara (55) está dimensionado para solapar la abertura y forma una superficie interior de la cámara (55) en la abertura.

3. El método de la reivindicación 1 o el dispositivo de la reivindicación 2, en donde la capa de reactivo seca (310) incluye al menos un reactivo que puede utilizarse en al menos uno de un paso de preparación de la muestra, un paso de amplificación de ácido nucleico, y un paso de detección en un proceso para detección o ensayo de un ácido nucleico.

4. El método de la reivindicación 3 o el dispositivo de la reivindicación 3, en donde el al menos un reactivo se selecciona del grupo constituido por un reactivo de lisis, un reactivo de digestión de proteínas, una enzima de amplificación de ácido nucleico, un oligonucleótido, una sonda, nucleótido-trifosfatos, un tampón, una sal, un agente tensioactivo, un tinte, un control de ácido nucleico, un agente reductor, dimetil-sulfóxido (DMSO) , glicerol, ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA) , ácido etilenglicol-bis (2-aminoetileter) -N, N, N', N'-tetraacético (EGTA) , microesferas capaces de fijar un ácido nucleico, y una combinación de los mismos.

5. El método de la reivindicación 3 o el dispositivo de la reivindicación 3, en donde el al menos un reactivo se selecciona del grupo constituido por una enzima de amplificación de ácido nucleico, un cebador, una sonda, y microesferas capaces de fijar un ácido nucleico.

6. El método de la reivindicación 3 o el dispositivo de la reivindicación 3, en donde el al menos un reactivo es una enzima de amplificación de ácido nucleico.

7. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 6, o el dispositivo de una cualquiera de las

reivindicaciones 2 a 6, en donde la capa de reactivo (310) incluye adicionalmente un material matriz seleccionado del grupo constituido por un polímero soluble en agua, un carbohidrato, y una combinación de los mismos.

8. El método de la reivindicación 7 o el dispositivo de la reivindicación 7, en donde el material matriz es un polímero soluble en agua.

9. El método de la reivindicación 7 o el dispositivo de la reivindicación 7, en donde el material matriz es un 45 carbohidrato.

10. El método de la reivindicación 7 o el dispositivo de la reivindicación 7, en donde el material matriz es una combinación de un polímero soluble en agua y un carbohidrato.

11. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 7, 8, y 10 o el dispositivo de una cualquiera de las

reivindicaciones 7, 8 y 10, en donde el polímero soluble en agua se selecciona del grupo constituido por poli (alcohol 50 vinílico) , poli (acetato de alcohol vinílico) polivinilpirrolidona, y una combinación de los mismos.

12. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 7, 9, 10, y 11 como dependiente de la reivindicación 10

o el dispositivo de una cualquiera de las reivindicaciones 7, 9, 10, y 11 como dependiente de la reivindicación 10, en donde el carbohidrato se selecciona del grupo constituido por sacarosa, dextrano, trehalosa, pululano, αciclodextrina, manitol, sorbitol, y una combinación de los mismos.

13. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 12, o el dispositivo de una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 12, en donde el film de soporte (320) recubierto con la capa de reactivo seca (310) está 5 dimensionado adicionalmente para proporcionar una cantidad predeterminada del al menos un reactivo.

14. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 13, o el dispositivo de una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 13, en donde el film de soporte (320) es sustancialmente insoluble en agua.

15. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 13, o el dispositivo de una cualquiera de las

reivindicaciones 2 a 13, en donde el fluido puede disolver, dispersar, o suspender los reactivos en la capa de 10 reactivo (310) .