Composiciones y métodos para la inhibición de la angiogénesis por sirna.

Un siRNA que comprende una cadena de RNA sentido de SEC ID NO:

77 y una cadena de RNA antsentido de SEC ID NO: 78, para su uso en el tratamiento del edema macular diabético en un sujeto humano.

Composiciones y métodos para la inhibición de la angiogénesis por siRNA

FUNDAMENTO DE LA INVENCION.

El documento WO 2004/009769 discute el uso de un siRNA (small interference RNA: RNA pequeño de interferencia) contra el factor VEGF para inhibir la angiogénesis y para métodos de inhibir y tratar enfermedades tales como la neovascularización coroidea. La publicación de Adamis et al. (Opthalmology, enero 2006; 113 (1) : 23 - 8) discute cambios en la neovascularización retiniana después de la terapia con pegaptanib en personas diabéticas.

SUMARIO DE LA INVENCION.

Las realizaciones de la presente invención proporcionan un siRNA que comprende una cadena de RNA sentido de la SEC ID NO: 77 y una cadena de RNA antisentido de la SEC ID NO: 78 para su uso en el tratamiento del edema macular diabético (DME: diabetic macular edema) en un sujeto humano.

Realizaciones adicionales de la presente invención proporcionan el uso de siRNA que comprende una cadena sentido de RNA de SEC ID NO: 77 y una cadena antisentido de RNA de la SEC ID NO: 78 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del edema macular diabético en una persona.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS.

Para obtener una idea más completa de la naturaleza y las ventajas de la presente invención, debe hacerse una referencia a la descripción detallada que sigue, tomada en relación con los dibujos anexos, en los que:

La Fig. 1 es un gráfico de los niveles de proteína hVEGF en células 293 transfectadas con siRNAs de VEGF humano, siRNA no específico (siRNA EGFP) o transfecciones simuladas (transfecciones mock) sin siRNA.

La Fig. 2 es un gráfico de los estudios de respuesta a la dosis con Cand5, hVEGF nº 1, hVEGF nº 2, hVEGF nº 3, hVEGF nº 4, hVEGF nº 6 y hVEGF nº 7.

La Fig. 3 es un gráfico del cambio medio de la agudeza visual a distancia mejor corregida en sujetos humanos, medida mediante la metodología del estudio de la retinopatía diabética con tratamiento temprano (ETDRS: early treatment diabetic retinopathy study) en cada uno de los tres grupos de estudio que reciben dosis distintas de Cand5.

La Fig. 4 es un par de histogramas que muestran el porcentaje de personas en cada uno de los grupos de estudio que mostraron estabilización de la agudeza visual a distancia, como se determina por la pérdida de menos de 15 letras en la prueba de ETDRS a las 12 semanas, en comparación con la línea de base, o a las 15 semanas en comparación con 3 semanas.

La Fig. 5 es un gráfico del cambio medio en la agudeza visual próxima mejor corregida en sujetos humanos, medida mediante la metodología del ETDRS en cada uno de los tres grupos de estudio que reciben diferentes dosis de Cand5.

La Fig. 6 es un par de histogramas que muestran el porcentaje de sujetos humanos en cada uno de los grupos de estudio que mostraron estabilización de la agudeza visual próxima determinada por la pérdida de menos de 15 letras en la prueba del ETDRS a las 12 semanas en comparación con la línea base, o a las 15 semanas en comparación con 3 semanas.

Las Figs. 7A y 7B son un par de gráficos del cambio medio de la agudeza visual a distancia mejor corregida en cada uno de los tres grupos de estudio Cand5 en comparación con el grupo testigo de placebo del estudio TAP relacionado. La Fig. 7B aplica el análisis de la última observación considerada (Last Observed Carried Forward: "LOCF") a los conjuntos de datos.

Las Figs. 8A y 8B son un par de gráficos del cambio a partir de la línea de base del tamaño medio de las lesiones de neovascularización coroidea (Choroidal NeoVascularization: CNV) en cada uno de los tres grupos de estudio de Cand5. La Fig. 8B aplica el análisis de LOCF a los juegos de datos.

La Fig. 9 es un gráfico del cambio del espesor foveal, medido mediante tomografía de coherencia ocular (ocular coherence tomography: "OCT") en tres grupos de personas con DME tratadas con diferentes dosis de Cand5.

La Fig. 10 es un gráfico del cambio en la agudeza visual medido mediante ETDRS en tres grupos de personas con DME tratadas con diferentes dosis de Cand5.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION.

Antes de describir las presentes composiciones y métodos, se ha de entender que esta invención no está limitada a los procedimientos, las composiciones o las metodologías particulares que se han descrito, ya que estas pueden variar. Se ha de entender también que la terminología usada en la descripción tiene el propósito de describir las versiones o realizaciones en particular solamente, y no se pretende que limiten el alcance de la presente invención, se verá limitado solamente por las reivindicaciones anexas. A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente texto tienen el mismo significado que se entiende de un modo general por un profesional experto en la técnica. Aun cuando puede usarse cualquiera de los métodos y materiales similares

o equivalentes a los descritos en el presente texto en la práctica o la prueba de realizaciones de la presente invención, se describen ahora los métodos, dispositivos y materiales preferidos.

También debe observarse que, como se usa en el presente texto y en las reivindicaciones anexas, las formas singulares “un” o “una” y “el” o “la” incluyen la referencia plural a menos que el contexto dictamine claramente lo contrario. Así, por ejemplo, la referencia a una “molécula” es una referencia a una o más moléculas y equivalentes de las mismas conocidas por los expertos en la técnica, y así siempre.

Como se usa en el presente texto, el término “aproximadamente” significa más o menos el 10% del valor numérico del número con el cual se está usando. Por consiguiente, aproximadamente el 50% significa que está en el intervalo de 45% a 55%.

Como se usa en el presente texto, un “sujeto” incluye un ser humano o un animal no humano. Preferentemente el sujeto es un ser humano.

Como se usa en el presente texto, una "cantidad efectiva " del siRNA es una cantidad suficiente para causar una degradación mediada por RNAi del mRNA diana, o una cantidad suficiente para inhibir el progreso de la angiogénesis en un sujeto.

Como se usa en el presente texto, "aislado" significa alterado o retirado del estado natural por la intervenciópn humana. Por ejemplo, un siRNA presente naturalmente en un animal vivo no está “aislado”, pero un siRNA sintético,

o un siRNA parcial o totalmente separado de los materiales coexistentes de su estado natural, está “aislado”. Un siRNA aislado puede existir en forma sustancialmente purificada, o puede existir en un entorno no nativo o natural, tal como, por ejemplo, una célula a la cual ha sido suministrado el siRNA.

Como se usa en el presente texto, "mRNA diana" significa mRNA de VEGF humano.

A menos que se indique otra cosa, todas las secuencias de ácido nucleico en el presente texto se dan en la dirección 5’ a 3’. También, todos los desoxirribonucleótidos de una secuencia de ácido nucleico están representados por letras mayúsculas (p. ej. desoxitimidina es "T") , y los ribonucleótidos de una secuencia de ácido nucleico están representados por letras minúsculas (p. ej. uridina es "u") .

La angiogénesis, definida como el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos capilares o "neovascularización", juega un papel fundamental en el crecimiento y desarrollo. En los seres humanos maduros, la capacidad para iniciar la angiogénesis está presente en todos los tejidos, pero se mantiene bajo un riguroso control. Un regulador clave de la angiogénesis es el factor de crecimiento endotelial vascular (vascular endothelial growth factor: "VEGF") , llamado también factor de permeabilidad vascular (vascular permeability faCTOR: "VPF") . El VEGF existe en al menos cuatro formas de ayuste alternativas diferentes en los seres humanos (VEGF121, VEGF165, VEGF189 y VEGF206) , todas las cuales ejercen actividades biológicas similares.

La angiogénesis se inicia cuando el VEGF segregado se une a los receptores Flt-1 y Flk-1/KDR (llamados también receptor 1 de VEGF y receptor 2 de VEGF) , que se expresan en la superficie de las células endoteliales.... [Seguir leyendo]

1ª. Un siRNA que comprende una cadena de RNA sentido de SEC ID NO: 77 y una cadena de RNA antsentido de SEC ID NO: 78, para su uso en el tratamiento del edema macular diabético en un sujeto humano.

2ª. El siRNA para ser usado según la reivindicación 1ª, en el que las cadenas de RNA sentido y antisentido están estabilizadas contra la degradación por nucleasa.

3ª. El siRNA para ser usado según la reivindicación 2ª, en el que el siRNA es adecuado para la administración por una vía de administración intraocular, preferentemente en el que la vía de administración intraocular se elige entre la administración intravítrea, intrarretinal, sub-retinal, subtenon, peri- y retro-orbital, transcorneal, y transescleral.

4ª. El siRNA para ser usado según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 3ª, en el que también se administra un antagonista del VEGF.

5ª. El siRNA para ser usado según la reivindicación 4ª, en el que el antagonista del VEGF es un anticuerpo monoclonal dirigido a VEGF humano elegido entre bevacizumab y ranibizumab, preferentemente en el que es antagonista del VEGF es ranibizumab.

6ª. El siRNA para ser usado según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 5ª, en el que el siRNA es administrado en una cantidad efectiva de aproximadamente 0, 5 mg a aproximadamente 5 mg, preferentemente en el que la cantidad efectiva es aproximadamente 2, 5 mg.

7ª. El siRNA para ser usado según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 6ª, en el que el siRNA es para administración una vez cada cuatro semanas.

8ª. El siRNA para ser usado según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 6ª, en el que el siRNA es para administración una vez cada ocho semanas.

9ª. El siRNA para ser usado según una cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 6ª, en el que el siRNA es para administración una vez cada doce semanas.

10ª. El uso de un siRNA que comprende una cadena de RNA sentido de SEC ID NO: 77 y una cadena de RNA antisentido de SEC ID NO: 78 en la elaboración de un medicamento para tratar el edema macular diabético en un sujeto humano.

11ª. Una combinación de una cantidad efectiva de (i) un antagonista del VEGF y (ii) un siRNA que comprende una cadena de RNA sentido de SEC ID NO: 77 y una cadena antisentido de SEC ID NO: 78, en el que las cadenas de RNA sentido y antisentido forman un RNA dúplex, para ser usada en el tratamiento del edema macular diabético en un sujeto humano.

12ª. La combinación para ser usada según la reivindicación 11ª, en la que dicho antagonista del VEGF es para su administración antes o después de la administración del siRNA.

13ª. La combinación para ser usada según la reivindicación 11ª, en la que dicho antagonista del VEGF es para su administración simultáneamente con dicho siRNA.

14ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 13ª, en la que el siRNA es adecuado para administración por una vía de administración intraocular, preferentemente en la que la vía de administración intraocular se elige entre la administración intravítrea, intrarretinal, sub-retinal, subtenon, peri- y retroorbital, transcorneal y transescleral.

15ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 14ª, en la que el siRNA es administrado en una cantidad efectiva de aproximadamente 0, 5 mg a aproximadamente 5 mg, preferentemente en la que la cantidad efectiva es aproximadamente 2, 5 mg.

16ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 15ª, en la que el antagonista del VEGF es un anticuerpo monoclonal dirigido a VEGF humano elegido entre bevacizumab y ranibizumab, preferentemente en la que el antagonista del VEGF es ranibizumab.

17ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 16ª, en la que el siRNA es para administración una vez cada cuatro semanas.

18ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 16ª, en la que el siRNA es para administración una vez cada ocho semanas.

19ª. La combinación para ser usada según una cualquiera de las reivindicaciones 11ª a 16ª, en la que el siRNA es para administración una vez cada doce semanas.