USO DE UNA COMPOSICIÓN QUE COMPRENDE MOLÉCULAS DE ADN PARA PREPARAR UN MEDICAMENTO DESTINADO AL TRATAMIENTO DEL CÁNCER.

Uso de al menos una molécula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO:

1-15 para preparar un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad, donde dicha enfermedad es cáncer y más concretamente carcinoma renal, carcinoma hepático o carcinoma de pulmón.

USO DE UNA COMPOSICION QUE COMPRENDE MOLECULAS DE ADN PARA

PREPARAR UN MEDICAMENTO DESTINADO AL TRATAMIENTO DEL CANCER CAMPO DE LA INVENCION El campo de la presente invención esta relacionado con preparaciones medicinales que contienen ADN para el tratamiento del cancer, en particular, para el tratamiento de carcinomas renales, hepatocarcinomas y carcinoma de pulmón. ANTECEDENTES DE LA INVENCION Se ha descrito que el transportador de aminoacidos SLC7A5 tiene una expresión elevada en varios tipos de tumores y se ha sugerido que un bloqueo de este transportador disminuiria la toma de aminoacidos por las celulas tumorales y comprometeria por tanto la progresión del tumor (Fuchs, B.C. et al. (2005) . Amino acid transporters ASCT2 and LAT1 in cancer: partners in crime? Seminars in cancer biology 15, 254-266) . Sin embargo, la inhibición especifica de SLC7A5 en algunas lineas celulares no comprometen su proliferación (Storey, B.T. et al. (2005) . Adenoviral modulation of the tumor-associated system L amino acid transporter, LAT1, alters amino acid transport, cell growth and 4F2/CD98 expression with celltype specific effects in cultured hepatic cells. International Journal of Cancer 117, 387-397) . Este transportador SLC7A5 puede bloquearse mediante la utilización de acido 2amino-biciclo[2, 2, 1]heptano-2-carboxilico (BCH) , un inhibidor de los transportadores que pertenecen al sistema L que incluye al menos a SLC7A5 y SLC7A8 (Segawa et al. (1999) . Identification and functional characterization of a Na+-independent neutral amino acid transporter with broad substrate selectivity. J. Biol. Chem 274: 1974519751; Shennan et al. (2003) . Functional and molecular characteristics of system L in human breast cancer cells. Biochim Biophys Acta. 2003 Apr 1;1611 (1-2) :81-90.) . Por lo tanto este inhibidor no inhibe especificamente SLC7A5 ya que tambien afecta al menos al transportador SLC7A8 mencionado anteriormente. Estudios previos han demostrado que la expresión de SLC7A5 se encuentra especialmente enriquecida en celulas tumorales mientras que SLC7A8 no muestra este enriquecimiento preferente en tumores, lo que implica que se encuentra expresado de manera ubicua (no solo en celulas tumorales) (Fuchs et al., 2005) .

DESCRIPCION DE LA INVENCION

La presente invención es el uso, en adelante uso de la invención, de al menos una molecula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO: 1-15 para preparar un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad.

Otra realización es el uso de la invención, donde se usan las moleculas identificadas por las secuencias SEQ ID NO: 1-3. De forma preferible, dichas moleculas de ADN estan insertadas en plasmidos o estan incluidas en el genoma de lentivirus o adenovirus.

La presente invención inhibe SLC7A5 especificamente en celulas tumorales con el fin de inhibir su capacidad de formar tumores.

La ventaja del uso de la invención es que reduce los posibles efectos secundarios a la inhibición de al menos SLC7A8 por parte del inhibidor BCH. La presente invención disminuye el desarrollo tumoral en celulas mediante la inhibición especifica de SLC7A5, que constituye una linea terapeutica que compromete la toma de aminoacidos por la celula tumoral para detener la progresión del tumor.

Por tanto, una realización particular es el uso de la invención, donde dicha enfermedad es cancer. Y de forma preferible, dicha enfermedad esta seleccionada del grupo compuesto por carcinoma renal, carcinoma hepatico y carcinoma de pulmón.

Otra realización de la invención es una composición farmaceutica que comprende al menos una molecula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO: 1-15, junto con excipientes farmaceuticamente aceptables, para el tratamiento del cancer.

Otra realización es la composición farmaceutica de la invención, donde la via por la que se administra dicha composición farmaceutica se selecciona del grupo compuesto por via parenteral, via digestiva, via respiratoria y via t6pica.

Una realización de la invención es al menos una molecula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO: 1-15, en adelante una molecula de ADN de la invención, para su uso en el tratamiento de una enfermedad.

Otra realización es una molecula de ADN de la invención, donde se usan las moleculas identificadas por las secuencias SEQ ID NO: 1-3. De forma preferible, dichas moleculas de ADN estan insertadas en plasmidos o estan incluidas en el genoma de lentivirus o adenovirus.

Otra realización es una molecula de ADN de la invención para su uso en el tratamiento del cancer. Y de forma preferible, para su uso en el tratamiento del carcinoma renal, carcinoma hepatico y carcinoma de pulmón.

Una realización de la invención es un metodo de tratamiento del cancer, en adelante metodo de tratamiento de la invención, que comprende administrar a un sujeto humano una cantidad efectiva de al menos una molecula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO: 1-15.

Otra realización es un metodo de tratamiento de la invención, donde se administran las moleculas identificadas por las secuencias SEQ ID NO: 1-3. De forma preferible, dichas moleculas de ADN estan insertadas en plasmidos o estan incluidas en el genoma de lentivirus o adenovirus.

De forma preferible, dicho cancer esta seleccionado del grupo compuesto por carcinoma renal, carcinoma hepatico y carcinoma de pulmón.

La realización mas preferible de la invención es una composición farmaceutica que comprende que comprende al menos una molecula de ADN identificada por las secuencias seleccionadas del grupo compuesto por SEQ ID NO: 1-15, junto con excipientes farmaceuticamente aceptables, para el tratamiento del cancer.

TEXTO LIBRE DE LA LISTA DE SECUENCIAS

A continuación se aporta una traducción al espanol del texto libre que aparece en la lista de secuencias.

SEQ ID NO: 1. Horquilla pequena A. (6) .. (24) Secuencia sentido de la horquilla (34) .. (52) Secuencia antisentido de la horquilla SEQ ID NO: 2. Horquilla pequena B. (6) .. (24) Secuencia sentido de la horquilla (34) .. (52) Secuencia antisentido de la horquilla SEQ ID NO: 3. Horquilla pequena C. (6) .. (24) Secuencia sentido de la horquilla (34) .. (52) Secuencia antisentido de la horquilla SEQ ID NO: 4. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla A SEQ ID NO: 5. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla A incluyendo TT en el extremo 3' SEQ ID NO: 6. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla A SEQ ID NO: 7. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla A incluyendo TT en el extremo 3' SEQ ID NO: 8. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla B SEQ ID NO: 9. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla B incluyendo TT en el extremo 3' SEQ ID NO: 10. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla B SEQ ID NO: 11. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla B incluyendo TT en el extremo 3' SEQ ID NO: 12. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla C SEQ ID NO: 13. Secuencia sentido correspondiente a la horquilla C incluyendo TT en el extremo 3' SEQ ID NO: 14. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla C SEQ ID NO: 15. Secuencia antisentido correspondiente a la horquilla C incluyendo TT en el extremo 3'

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS

Figura 1. Expresión de SLC7A5 en celulas 786-0-siRNA Scramble y 786-0-siRNA HIF2a Figura 2. Expresión de SLC7A5 en celulas 786-0-shScramble y 786-shSLC7A5 Figura 3. Crecimiento de tumores producidos con celulas786-shScramble (rombos) y 786-shSLC7A5 (cuadrados) .

MODOS DE REALIZACION PREFERENTE

Ejemplo 1 La inhibición de SLC7A5 se realizó en la linea de carcinoma renal deficiente en Vhl, 786-O. Esta linea celular muestra una expresión constitutiva HIF2a que cuando se silencia desencadena una disminución en la expresión de SLC7A5 (Figura 1) . Ademas esta linea es ampliamente utilizada para evaluar las propiedades protumorales de HIF2a. Estas celulas fueron infectadas con particulas lentivirales que expresan ARN de interferencia con secuencias especificas para SLC7A5 (Santa Cruz (sc-62555-V) ) o con una secuencia irrelevante (Santa Cruz (SC-108080) ) y posteriormente se seleccionaron con puromicina. Las particulas lentivirales contienen 3 plasmidos diferentes que expresan 3 secuencias de ARN de interferencia (secuencias pequenas de ARN horquilla) . Dichas secuencias estan identificadas por SEQ ID NO: 1-3.

Despues de la selección, se obtuvo la linea celular 786-O-shSLC7A5 en la que la expresión de SLC7A5 estaba claramente silenciada cuando se comparaba con sus celulas control 786-S sh control (Figura 2) . Estas celulas se...

1. Uso de una composición que comprende las moleculas de ADN identificadas por las secuencias SEQ ID NO: 1-3 para preparar un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad.

2. Uso segºn la reivindicación 1, caracterizado por que dichas moleculas de ADN estan insertadas en plasmidos.

3. Uso segºn la reivindicación 1, caracterizado por que dichas moleculas de ADN estan incluidas en el genoma de lentivirus o adenovirus.

4. Uso segºn cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que dicha 10 enfermedad es cancer.

5. Uso segºn la reivindicación 4, caracterizado por que dicha enfermedad esta seleccionada del grupo compuesto por carcinoma renal, carcinoma hepatico y carcinoma de pulmón.

6. Una composición farmaceutica que comprende las moleculas de ADN

identificadas por las secuencias SEQ ID NO: 1-3, junto con excipientes farmaceuticamente aceptables, para el tratamiento del cancer.

7. Una composición farmaceutica segºn la reivindicación 6, caracterizada por que la via por la que se administra dicha composición farmaceutica se selecciona del grupo compuesto por via parenteral, via digestiva, via respiratoria y via t6pica.

FIº. 1

FIº. 2

FIº. 3