UN PROCEDIMIENTO PARA EL RESCATE DE DNA Y PARA DETECTAR MUTACIONES EN GENES MARCADORES.

LA INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO PARA EL RESCATE Y CLONADO DE UNA SECUENCIA DE DNA,

DONDE UN VECTOR QUE CONTIENE DICHA SECUENCIA DE DNA SE MULTIPLICA EN UN HUESPED BACTERIANO ADECUADO. COMO HUESPED BACTERIANO SE USA UNA CEPA BACTERIANA QUE ES INCAPAZ DE RESTRICCION DEL HUESPED, TAL COMO CEPA DE ESCHERICHIA COLI C. PREFERIBLEMENTE SE USA COMO VECTOR UNO BACTERIOFAGO, QUE ES UN VEHICULO DE CLONACION ADECUADO PARA EL HUESPED BACTERIANO DE INTERES, LLEVANDOSE A CABO LA ETAPA DE EMPAQUETADO IN VITRO EN FAGORECUBRIMIENTOS POR MEDIO DE UN FAGOEMBALAJE, OBTENIDO DE PARTIR DE UNA CEPA BACTERIANA QUE ES INCAPAZ DE RESTRICCION DE HUESPED. LA INVENCION SE PUEDE USAR PARA DETECTAR MUTACIONES EN UNO O MAS GENES MARCADORES INTRODUCIDOS EN UN GENOMA DE MAMIFERO POR MEDIO DE UN VECTOR, PROCEDIMIENTO QUE CONSISTE EN AISLAR DNA DE CELULAS DE MAMIFERO TRANSGENICO O DE LAS CELULAS DE MAMIFERO, RECUPERAR EL VECTOR DE DICHO DNA, MULTIPLICAR EL VECTOR EN UN HUESPED BACTERIANO ADECUADO, QUE ES DEFICIENTE RESPECTO A POR LO MENOS UNO DE LOS GENES MARCADORES, Y ENSAYAR LA EXPRESION DEL GEN MARCADOR. PREFERIBLEMENTE, EL DNA AISLADO DE LAS CELULAS DEL MAMIFERO TRANSGENICO O DE LAS CELULAS DEL MAMIFERO, SE PURIFICA FRAGMENTANDO EL DNA POR MEDIO DE UN ENZIMA DE RESTICCION QUE NO TIENE UN SITIO DE CORTE EN EL VECTOR, SEPARAR LOS FRAGMENTOS RESULTANTES EN BASE A UN CRITERIO ADECUADO, TAL COMO DIFERENCIAS DE TAMAÑO, Y RECOGER LOS FRAGMENTOS QE CONTIENEN EL VECTOR, DESPUES DE LO CUAL SE RECUPERA EL VECTOR A PARTIR DE DICHO DNA PREPURIFICADO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: NEDERLANDSE ORGANISATIE VOOR TOEGEPAST-NATUURWETENSCHAPPELIJK ONDERZOEK TNO.

Nacionalidad solicitante: Países Bajos.

Dirección: JULIANA VAN STOLBERGLAAN 148, NL-2595 CL THE HAGUE.

Inventor/es: VIJG, JAN, GOSSEN, JAN ALBERT.

Fecha de Publicación: 16 de Diciembre de 1994.

Fecha Concesión Europea: 12 de Enero de 1994.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K).
C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).

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