TRATAMIENTO DE SEMILLAS Y PLANTAS CON BACTERIAS UTILES.
Cepa de Pseudomonas con el nombre Proradix que se depositó el 03/11/1999 con el número de entrada PRORADIX - DSM 13134 en la DSMZ,
38124 Braunschweig, conforme al Tratado de Budapest
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP00/10903.
Solicitante: ARNDT, WOLFGANG.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: LINDENSTRASSE 29,72657 ALTENRIET.
Inventor/es: ARNDT,WOLFGANG.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 19 de Mayo de 2010.
Clasificación Internacional de Patentes:
- A01N63/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA. › A01N CONSERVACION DE CUERPOS HUMANOS O ANIMALES O DE VEGETALES O DE PARTES DE ELLOS (conservación de alimentos o productos alimenticios A23 ); BIOCIDAS, p. ej. EN TANTO QUE SEAN DESINFECTANTES, PESTICIDAS O HERBICIDAS (preparaciones de uso médico, dental o para el aseo que eliminan o previenen el crecimiento o la proliferación de organismos no deseados A61K ); PRODUCTOS QUE ATRAEN O REPELEN A LOS ANIMALES; REGULADORES DEL CRECIMIENTO DE LOS VEGETALES. › Biocidas, productos que repelen o atraen a los animales perjudiciales, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos, virus, hongos microscópicos, animales, o sustancias producidas por, u obtenidas a partir de microorganismos, virus, hongos microscópicos o animales, p. ej. encimas o productos de fermentación (que contienen compuestos de constitución determinada A01N 27/00 - A01N 59/00; algas unicelulares A01N 65/03).
- C12N1/20 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12P19/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polisacáridos, es decir, compuestos que contienen más de cinco radicales sacárido unidos entre ellos por enlaces glucosídicos.
- C12R1/38 C12 […] › C12R SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C - C12Q, RELATIVO A LOS MICROORGANISMOS. › C12R 1/00 Microorganismos. › Pseudomonas.
Clasificación PCT:
- A01C1/06 A01 […] › A01C PLANTACION; SIEMBRA; FERTILIZACION (en combinación con el trabajo de la tierra propiamente dicho A01B 49/04; partes constitutivas o accesorios de máquinas o instrumentos agrícolas, en general A01B 51/00 - A01B 75/00). › A01C 1/00 Aparatos o formas de empleo de los aparatos destinados a probar o tratar los granos, las raíces o análogos antes de la siembra o la plantación (productos químicos utilizados A01N 25/00 - A01N 65/00). › Envoltura o preparación de las semillas.
- A01N63/00 A01N […] › Biocidas, productos que repelen o atraen a los animales perjudiciales, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos, virus, hongos microscópicos, animales, o sustancias producidas por, u obtenidas a partir de microorganismos, virus, hongos microscópicos o animales, p. ej. encimas o productos de fermentación (que contienen compuestos de constitución determinada A01N 27/00 - A01N 59/00; algas unicelulares A01N 65/03).
- C12N1/20 C12N 1/00 […] › Bacterias; Sus medios de cultivo.
Clasificación antigua:
- C12N1/00 C12N […] › Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo.
Fragmento de la descripción:
Tratamiento de semillas y plantas con bacterias útiles.
La presente invención se refiere al tratamiento de semilla y plantas con bacterias del género Pseudomonas, así como a una nueva especie del género Pseudomonas especialmente adecuada para esto.
Por el documento DE 197 39 364 A1 ya se conoce un procedimiento para reforzar y para proteger plantas en el que se usan microorganismos del género Pseudomonas.
En el procedimiento conocido se introduce al menos un inductor de resistencia junto con un microorganismo útil en el suelo nutriente de las plantas o en las semillas de la planta, presentando el inductor de resistencia y el microorganismo un efecto positivo complementario sobre la planta.
Como ejemplo de un microorganismo útil se menciona la cepa Pseudomonae sp. Ps1 de la especie Pseudomonas fluorescens que está depositada en la DSMZ.
En este documento se describe además un procedimiento sobre cómo puede aislarse un microorganismo útil de este tipo de la tierra y las raíces. En este procedimiento, una serie de dilución de tierra y raíces se siembra en placa, se incuba y se prueba para las colonias fluorescentes con las que luego se realiza un cribado contra hongos nocivos. Una cepa encontrada según el procedimiento conocido se investiga a continuación para ver en qué medida puede combinarse con inductores de resistencia. De esta manera se encontró la cepa Pseudomonae sp. PS1.
Sin embargo, los experimentos del solicitante de la presente solicitud ha dado como resultado que el tratamiento descrito en el documento mencionado al principio todavía no es satisfactorio, lo que se atribuye entre otras cosas a que deben usarse costosos inductores de resistencia junto con el microorganismo descrito, resultando además que frecuentemente la acción protectora no es satisfactoria.
Por el documento US 2.932.128 se conoce un procedimiento para el tratamiento de semilla en el que la semilla se humedece con una solución de bacterias y luego se expone a una presión negativa para impregnar la semilla.
En vista de lo anterior, el objetivo de la presente invención se basa en proporcionar nuevas soluciones y procedimientos, así como un nuevo microorganismo para el tratamiento de semilla y/o plantas.
Según la invención, este objetivo se alcanza especialmente, por una parte, mediante una cepa de Pseudomonas con el nombre Proradix que se depositó el 03/11/1999 con el número de entrada Pseudomonas sp. PRORADIX - DSM 13134 en la DSMZ, 38124 Braunschweig, según el Tratado de Budapest.
El inventor de la presente solicitud ha aislado la cepa de Pseudomonas proradix que después de ser investigada por la DSMZ probablemente representa una nueva especie dentro del grupo I de ARN de las Pseudomonadaceae. Sin embargo, no pudo realizarse una clasificación definitiva de Proradix ya que sólo existe una similitud de secuencias relativamente baja con especies válidamente descritas del género Pseudomonas.
Los ensayos de campo con la especie Proradix han mostrado que a este respecto se trata de una bacteria útil que coloniza las raíces de plantas útiles y desde allí puede desarrollar su acción sobre las plantas. A este respecto se ha mostrado que es suficiente una aplicación por periodo de vegetación y que puede renunciarse a inductores de resistencia adicionales.
Proradix puede usarse en una formulación como desinfectante líquido o como polvo y es adecuado para el tratamiento de semillas de hortalizas, especialmente de lechuga y zanahorias, de semillas de césped y semillas de plantas leñosas. Además, puede usarse en semillas de abono verde para la mejora biológica del suelo y la descontaminación, así como para desinfectar y para el tratamiento por inmersión de patatas. En todas estas aplicaciones Proradix ha mostrado una mejora de la calidad en comparación con grupos de control sin tratar, así como parcialmente también en comparación con fungicidas químicos.
La invención se consigue además esencialmente mediante un procedimiento para la preparación de una solución para el tratamiento de plantas y/o semilla con las etapas de:
El inventor ha observado que una solución preparada de esta forma conduce a un acondicionamiento de las bacterias útiles que contribuye a una acción protectora mejorada en las plantas tratas con ella/la semilla tratada con ella. Este acondicionamiento consiste según la estimación provisional del inventor en la inducción de la formación de exopolisacáridos debido a los productos de degradación de ácido succínico. Los exopolisacáridos son una sustancia protectora que forman una mucosa por la que las bacterias pueden almacenarse especialmente bien sobre la semilla/las plantas.
A este respecto se prefiere especialmente que el medio de cultivo de las bacterias contenga K2HPO4, KH2PO4, (NH4)2SO4, MgSO4 y ácido succínico estando contenidos preferiblemente 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,0 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4 y 4,0 g de ácido succínico en 1000 ml de H2O desionizada.
El inventor ha observado que en este medio se forman de manera especialmente rápida exopolisacáridos, no siendo la densidad celular para el tratamiento de semilla en una solución preparada según este procedimiento tan decisiva como el acondicionamiento previamente mencionado.
Por otra parte, se prefiere que el medio de cultivo contenga glucosa, estando contenidos preferiblemente 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,5 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4, 2,0 g de glucosa y 4 g de ácido succínico en 1000 ml de agua desionizada.
En esta composición del medio de cultivo puede alcanzarse una mayor densidad celular porque está presente una fuente de C en mayor concentración. Sin embargo, el inventor ha observado que sólo debido a la glucosa en el medio de cultivo se formó rápidamente un valor de pH ácido que no hizo posible otro cultivo.
Por esto se elige una mezcla de glucosa y ácido succínico como fuente de C de manera que primero reacciona la glucosa, por lo que se forma una alta densidad celular, pero un valor de pH más bajo. Después del consumo de la glucosa, el ácido succínico reacciona, por lo que sube el valor de pH de manera que resulta una supervivencia, pero un crecimiento más lento, de bacterias. Esto conduce a la formación de exopolisacáridos ya mencionada con la acción mejorada asociada de los microorganismos cultivados en una solución de este tipo.
A este respecto se usa una cepa aislada de la especie Proradix.
La invención se refiere además a una solución preparada según el procedimiento descrito a este respecto que presenta bacterias del género Pseudomonas en un medio de cultivo en el que están contenidos compuestos de fósforo y de nitrógeno, así como ácido succínico. Según una configuración preferida, el medio de cultivo contiene K2HPO4, KH2PO4, (NH4)2SO4, MgSO4 y ácido succínico. Según otra configuración preferida, el medio de cultivo contiene glucosa. Según otra configuración preferida, el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,0 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4 y 4,0 g de ácido succínico en 1000 ml de agua desionizada. Según otra configuración preferida, el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,5 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4, 2,0 g de glucosa y 4,0 g de ácido succínico en 1000 ml de agua desionizada. A este respecto, en el caso de la bacteria del género Pseudomonas se trata de la cepa Pseudomonas con el nombre Proradix...
Reivindicaciones:
1. Cepa de Pseudomonas con el nombre Proradix que se depositó el 03/11/1999 con el número de entrada PRORADIX - DSM 13134 en la DSMZ, 38124 Braunschweig, conforme al Tratado de Budapest.
2. Procedimiento para la preparación de una solución para el tratamiento de plantas y/o semilla con las etapas de:
caracterizado porque las bacterias presentan la cepa de Pseudomonas según la reivindicación 1.
3. Procedimiento según la reivindicación 2, caracterizado porque el medio de cultivo contiene K2HPO4, KH2PO4, (NH4)2SO4, MgSO4 y ácido succínico.
4. Procedimiento según la reivindicación 2 ó 3, caracterizado porque el medio de cultivo contiene glucosa.
5. Procedimiento según la reivindicación 3, caracterizado porque el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,0 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4 y 4,0 g de ácido succínico en 1.000 ml de agua desionizada.
6. Procedimiento según la reivindicación 4, caracterizado porque el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,5 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4, 2,0 g de glucosa y 4,0 g de ácido succínico en 1000 ml de agua desionizada.
7. Procedimiento según la reivindicación 6, caracterizado porque la solución se seca al vacío después de la incubación para preparar un polvo.
8. Solución para el tratamiento de plantas y/o semilla que presenta bacterias del género Pseudomonas en un medio de cultivo que contiene compuestos de fósforo y de nitrógeno, así como ácido succínico, caracterizada porque las bacterias presentan la cepa de Pseudomonas según la reivindicación 1.
9. Solución según la reivindicación 8, caracterizada porque el medio de cultivo contiene K2HPO4, KH2PO4, (NH4)2SO4, MgSO4 y ácido succínico.
10. Solución según la reivindicación 8 ó 9, caracterizada porque el medio de cultivo contiene glucosa.
11. Solución según la reivindicación 10, caracterizada porque el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,0 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4 y 4,0 g de ácido succínico en 1.000 ml de agua desionizada.
12. Solución según la reivindicación 11, caracterizada porque el medio de cultivo contiene 6,0 g de K2HPO4, 3,0 g de KH2PO4, 1,5 g de (NH4)2SO4, 0,2 g de MgSO4, 2,0 g de glucosa y 4,0 g de ácido succínico en 1.000 ml de agua desionizada.
13. Polvo para el tratamiento de plantas y/o semilla que presenta la cepa de Pseudomonas según la reivindicación 1.
14. Polvo según la reivindicación 13, caracterizado porque el polvo presenta coadyuvantes de formulación.
15. Polvo según la reivindicación 14, caracterizado porque los coadyuvantes de formulación presentan leche desnatada en polvo y goma arábiga.
16. Procedimiento para el tratamiento de semilla/plantas con las etapas de:
17. Procedimiento para el tratamiento de semilla/plantas con las etapas de:
18. Uso de la cepa de Pseudomonas proradix de la reivindicación 1 para el tratamiento de plantas y/o semilla.
19. Semilla tratada según el procedimiento de la reivindicación 16 o la reivindicación 17 o según el uso de la reivindicación 18 que contiene la cepa de Pseudomonas de la reivindicación 1.
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