Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.

Un aparato para desarrollar una suspensión celular de una muestra tisular cutánea durante el perioperatorio de un paciente y para la aplicación inmediata de la suspensión celular a una zona trasplantada del paciente,

que consta de una primera pieza(18), una segunda pieza (30), un grupo de herramientas requeridas para el cultivo celular y una boquilla de pulverización para aplicar la suspensión celular a la zona trasplantada, donde

(i) La primera pieza (18) del aparato incluye:

(a)Un medio de calentamiento adecuado para calentar una solución enzimática a una temperatura requerida y que es capaz de mantener esa solución a la temperatura deseada durante un cierto tiempo, donde la solución enzimática precalentada se utiliza para incubar una muestra de tejido cutáneo y contiene una cantidad de enzima suficiente para disociar el estrato celular en la muestra tisular cutánea;

(b) Una cavidad del filtro(28) que comprende un medio de filtración(29) de un tamaño de filtración entre 50μm y 200μm, para eliminar los congregados celulares de las células cultivadas de la muestra tisular cutánea, para formar la suspensión celular que sea capaz de una dispersión inmediata a la zona del injerto;

(c) Al menos un depósito de retención de fluidos (26) para el almacenamiento de una solución de nutriente adecuada para una aplicación directa a la zona del injerto, donde la solución de nutriente se utiliza para suspender las células tras la liberación de las células de la muestra de tejido cutáneo; y

(d) Un compartimento de almacenamiento (36) para almacenar el grupo de herramientas requeridas para el cultivo celular; y

(ii) La segunda pieza (30) consiste en un recipiente (34) para retener la muestra tisular cutánea y la solución de nutriente en una contención de fluidos, de manera que el recipiente sea de un tamaño suficiente para permitir la manipulación de la muestra tisular cutánea, permitiendo la separación de los estratos celulares y el cultivo de las células del estrato adecuado para el trasplante;

donde la primera pieza (18) dispone de un asiento (38) en el cual se puede colocar la segunda pieza (30) durante la manipulación de la muestra tisular cutánea.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E10184235.

Solicitante: Avita Medical Ltd.

Inventor/es: STONER,Marie, WOOD,Fiona.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61F2/10 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61F FILTROS IMPLANTABLES EN LOS VASOS SANGUINEOS; PROTESIS; DISPOSITIVOS QUE MANTIENEN LA LUZ O QUE EVITAN EL COLAPSO DE ESTRUCTURAS TUBULARES, p. ej. STENTS; DISPOSITIVOS DE ORTOPEDIA, CURA O PARA LA CONTRACEPCION; FOMENTACION; TRATAMIENTO O PROTECCION DE OJOS Y OIDOS; VENDAJES, APOSITOS O COMPRESAS ABSORBENTES; BOTIQUINES DE PRIMEROS AUXILIOS (prótesis dentales A61C). › A61F 2/00 Filtros implantables en los vasos sanguíneos; Prótesis, es decir, elementos de sustitución o de reemplazo para partes del cuerpo; Dispositivos para unirlas al cuerpo; Dispositivos para proporcionar permeabilidad o para evitar que colapsen las estructuras tubulares del cuerpo, p. ej. stents (como artículos cosméticos, ver las subclases apropiadas, p. ej. pelucas o postizos, A41G 3/00, A41G 5/00, uñas artificiales A45D 31/00; prótesis dentales A61C 13/00; materiales para prótesis A61L 27/00; riñones artificiales A61M 1/14; corazones artificiales A61M 60/00). › Implantes capilares o injertos de piel.
  • A61K35/12 A61 […] › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 35/00 Preparaciones medicinales que contienen sustancias de constitución indeterminada o sus productos de reacción. › Sustancias procedentes de mamíferos; Composiciones que comprenden tejidos o células indeterminadas; Composiciones que comprenden células madre no embrionarias; Células modificadas genéticamente (vacunas o preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00).
  • C12M3/06 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › C12M 3/00 Equipos para el cultivo de tejidos, de células humanas, animales o vegetales, o de virus. › con medios de filtración, de ultrafiltración, de ósmosis inversa o de diálisis.
  • C12N5/071 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células o tejidos de vertebrados, p.ej. células o tejidos humanos.

PDF original: ES-2534353_T3.pdf

 

Ilustración 1 de Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.
Ilustración 2 de Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.
Ilustración 3 de Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.
Ilustración 4 de Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.
Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares.

Fragmento de la descripción:

Dispositivo para la preparación de suspensiones celulares CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a una técnica simple, rápida y económica de injertar células, y en particular a un dispositivo para preparar una suspensión de células de una muestra tlsular obtenida de una zona donante y aplicar dicha suspensión de células a una zona receptora.

FUNDAMENTO DE LA INVENCIÓN

Existen muchos métodos de tratar las heridas que son bien conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, existen técnicas de Injertos de piel que pretenden reconstruir las zonas del cuerpo que recubren la piel donde existen daños o defectos. En general, estos tipos de injertos se han clasificado conforme a su relación huésped- donante y en función de su grosor. El injerto más aplicado clínicamente es el injerto autólogo, donde el tejido se extrae de una zona del cuerpo y se aplica en otra zona. El tejido injertado desarrolla entonces un nuevo aporte sanguíneo y se agarra a los tejidos subyacentes.

Existen varios tipos de injertos cutáneos entre los que mencionaremos los injertos cutáneos de espesor parcial, los injertos de espesor total y los microinjertos. Cada uno de estos Injertos se debe preparar usando ciertas técnicas y cada una de ellas tiene sus ventajas e inconvenientes. Los injertos de espesor parcial a menudo requieren una habilidad considerable, tiempo y un equipo caro. Además las zonas donantes son dolorosas, dan lugar a una deformidad cicatricial y limitan la zona capaz de ser recubierta. Aunque pueden ser más satisfactorios que los injertos de espesor total, suelen ser menos atractivos desde el punto de vista cosmético. Los injertos de espesor total requieren menos habilidad o equipo caro y su aspecto cosmético es mejor que el de los injertos de espesor parcial. Sin embargo, los injertos de espesor total no se "agarran" tan bien como los injertos de espesor parcial. Los microinjertos se llevan a cabo más fácilmente y no requieren instrumentos especiales. Sin embargo, su aspecto cosmético no es tan bueno como otras técnicas, ya que la deformidad cicatricial resultante es inaceptable.

Una variación de las técnicas de injerto mencionadas es el injerto de malla, que es un tipo de injerto parcial o injerto cutáneo total en el cual se cortan tiras paralelas de rajas del tejido a tratar. Algunas de las ventajas de los injertos de malla incluyen: una cobertura mayor del área afectada, drenaje de sangre o suero de debajo del injerto y elevada conformidad del Injerto a las zonas receptoras desiguales. Esta técnica ha tenido mucho éxito con un 90 hasta un 100% de agarre cuando los Injertos se han aplicado sobre lechos de granulación sanos.

Una alternativa al Injerto cutáneo parcial consiste en que se forme una ampolla bajo la succión en una zona donante y se trasplante a la zona receptora. La producción de ampollas para tratar las heridas se ha venido utilizando desde los años sesenta. Las ampollas son creadas por un dispositivo de succión como el Dervamac a una presión de succión de aproximadamente 250-300 mmHg durante 1-2 horas. Las ampollas se cortan luego y se colocan sobre la herida. El tiempo de cicatrización es de unos 10-14 días. Hay algunos inconvenientes en este método como la cantidad de tiempo requerida para preparar el injerto que es demasiado larga y eso hace que no se produzca una repigmentación de la zona; o bien una pigmentación desigual alrededor de los bordes de la zona de tratamiento.

El micro-injerto ha llegado a ser un método más frecuente para cubrir una zona grande e implica el recorte de una serie de secciones muy pequeñas de tejido de una zona donante y su aplicación luego a una gasa, que se colocará luego sobre la herida.

La tecnología más avanzada para la generación de un tejido in vitro consiste en cultivar la epidermis. Los autoinjertos epiteliales cultivados (CEA) son un apéndice importante en la cobertura de quemaduras y otras situaciones en las que zonas grandes de la superficie corporal experimentan pérdida de piel. Hay muchos centros en el mundo con instalaciones para el cultivo celular cuyo objetivo es producir injertos epiteliales autólogos que se utilizarán en una variedad amplia de aplicaciones. La utilidad y aplicación del CEA está relacionada con su habilidad para conseguir láminas de células confluentes capaces de ser injertadas. Esta técnica vence muchos de los inconvenientes de tratamientos anteriores ya descritos. Por ejemplo, los autoinjertos epiteliales autólogos reducen la demanda de zonas donantes. Sin embargo, estos autoinjertos son lentos en su crecimiento y requieren tiempo para cultivar los injertos, lo que a menudo excede al tiempo de preparación de las zonas receptoras.

Se estudia una suspensión celular junto con un método para preparar dicha suspensión y la presente invención proporciona un dispositivo para preparar esa suspensión con el objetivo de disminuir uno o más de los inconvenientes asociados a la tecnología sobre los injertos del modelo anterior.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

Se revela la posibilidad de una suspensión celular única y de un método para su preparación que deberá ser rápido, eficiente y simple de preparar y aplicar. También se revela la posibilidad de un método para tratar un paciente

usando la suspensión celular única y esta invención hace referencia a un aparato capaz de ser utilizado en la preparación del método. Aunque el uso del dispositivo descrito no es esencial para practicar el método revelado se ha observado que reduce de forma significativa la complejidad asociada al uso de la tecnología de injertos

convencional como la CEA.

Se revela un método para preparar una suspensión celular adecuada para su aplicación a un paciente, comprendiendo dicho método las etapas de:

a) Someter una muestra tisular que incluya células adecuadas para trasplantar a un paciente, a al menos un medio de disociación físico y/o químico capaz de disociar el estrato celular en la muestra tisular;

b) Retirar la muestra tisular de la presencia del medio disociante del tejido utilizado en la etapa (a) y cultivar en presencia de una solución de nutriente células de la muestra tisular, células adecuadas para trasplantar a un paciente, donde la solución nutriente (i) está libre de suero xenogénico, (ii) es capaz de mantener la viabilidad de las células hasta que se aplique a un paciente y (iii) es adecuada para la aplicación directa a una región en un paciente que está siendo sometido a un trasplante; y

c) Filtrar la suspensión celular creada de acuerdo con la etapa b) para eliminar grandes conglomerados celulares.

Preferiblemente el medio disociante es de naturaleza química como una enzima que es capaz de romper el enlace celular, por ejemplo, la tripsina. Además, preferiblemente, la suspensión celular filtrada se diluye a una densidad celular apropiada usando una solución de nutriente, que puede tratarse de una solución salina básica hasta incluso una solución de nutriente más compleja.

También se revela la posibilidad de una suspensión celular preparada conforme al método anterior. Preferiblemente las células de la suspensión son células autólogas (es decir, son aisladas del paciente por medio de un autoinjerto). Los inventores han observado que al retirar el suero xenogénico de la suspensión celular existe menos probabilidad de transmisión de una infección y se eliminan las reacciones xenogénicas entre un paciente y el suero. Otro rasgo de la suspensión celular producida conforme al método anterior es que la muestra tisular utilizada para aislar las células en la suspensión se retira de la solución enzimática antes de que se inicie el cultivo de las células. Cuando las células se exponen a enzimas capaces de dañar la adhesión intercelular, la viabilidad de la suspensión celular disminuye con el tiempo, reduciendo por tanto la eficacia del injerto cuando se aplica a un paciente. Se ha observado que la suspensión celular creada conforme al método anterior posee una viabilidad celular mayor si se compara con métodos comparativos que cultivan las células a intervalos regulares mientras el tejido está inmerso en presencia de enzimas como la tripsina.

También se ha divulgado un método para tratar un paciente que necesita cirugía para el injerto, comprendiendo dicho método las etapas de:

a) Preparación de una suspensión celular conforme al método anterior;

b) Administración de la suspensión directamente a una zona en el paciente que requiere un injerto celular de manera que se facilite la difusión de la suspensión celular en una distribución relativamente uniforme por la zona del Injerto.

De un modo alternativo se revelaba el uso de una suspensión celular... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un aparato para desarrollar una suspensión celular de una muestra tisular cutánea durante el perioperatorlo de un paciente y para la aplicación inmediata de la suspensión celular a una zona trasplantada del paciente, que consta de una primera pleza(18), una segunda pieza (30), un grupo de herramientas requeridas para el cultivo celular y una boquilla de pulverización para aplicar la suspensión celular a la zona trasplantada, donde

(I) La primera pieza (18) del aparato incluye:

(a) Un medio de calentamiento adecuado para calentar una solución enzimática a una temperatura requerida y que es capaz de mantener esa solución a la temperatura deseada durante un cierto tiempo, donde la solución enzimática precalentada se utiliza para incubar una muestra de tejido cutáneo y contiene una cantidad de enzima suficiente para disociar el estrato celular en la muestra tisular cutánea;

(b) Una cavidad del filtro(28) que comprende un medio de filtración(29) de un tamaño de filtración entre 50pm y 200pm, para eliminar los congregados celulares de las células cultivadas de la muestra tisular cutánea, para formar la suspensión celular que sea capaz de una dispersión inmediata a la zona del injerto;

(c) Al menos un depósito de retención de fluidos (26) para el almacenamiento de una solución de nutriente adecuada para una aplicación directa a la zona del injerto, donde la solución de nutriente se utiliza para suspender las células tras la liberación de las células de la muestra de tejido cutáneo; y

(d) Un compartimento de almacenamiento (36) para almacenar el grupo de herramientas requeridas para el cultivo celular; y

(ii) La segunda pieza (30) consiste en un recipiente (34) para retener la muestra tisular cutánea y la solución de nutriente en una contención de fluidos, de manera que el recipiente sea de un tamaño suficiente para permitir la manipulación de la muestra tisular cutánea, permitiendo la separación de los estratos celulares y el cultivo de las células del estrato adecuado para el trasplante;

donde la primera pieza (18) dispone de un asiento (38) en el cual se puede colocar la segunda pieza (30) durante la manipulación de la muestra tisular cutánea.

2. El aparato conforme a la reivindicación 1, donde el elemento de calentamiento está alojado en una cavidad en la primera pieza.

3. El aparato conforme a la reivindicación 2, en el que la cavidad contiene además un recipiente en el cual se puede colocar la muestra tisular cutánea para entrar en contacto con la solución enzimática.

4. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde el medio de calentamiento es controlado por un circuito que permite la activación del medio de calentamiento cuando se precise.

5. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-4, donde el medio de calentamiento está unido a un temporizador de forma operativa, para calentar la solución enzimática durante un periodo de tiempo predefinido.

6. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde el medio de calentamiento se dispone con un control de la temperatura ajustable.

7. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-6, que comprende además un medio de control que es capaz de indicar que la enzima ha alcanzado la temperatura requerida, y/o la cantidad de tiempo que la enzima ha estado en la solución enzimática.

8. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende además un medio para facilitar la

mezcla de la solución enzimática.

9. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-8, donde la cavidad del filtro se ha adaptado para recibir y sujetar al menos un tubo en el cual se puede filtrar la suspensión celular.

10. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-9, donde el depósito de retención de fluidos sirve de receptáculo para un recipiente que guarda la solución de nutriente.

11. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-10, donde la segunda pieza o elemento del aparato dispone de una tapa para el compartimento de almacenamiento.

12. El aparato conforme a la reivindicación 11, donde el lateral inferior de la tapa forma el recipiente, lo que permite que la segunda pieza tenga un doble objetivo.

13. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-12, donde el grupo de herramientas incluye un vaso de cristal de la enzima, una solución estéril para la suspensión de la enzima, una solución de nutriente estéril, escalpelo, fórceps, jeringa, gotero, filtro celular, apósitos y/o boquillas de pulverización.

14. El aparato conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1-13, donde el medio de calentamiento calienta la solución enzimática a una temperatura de trabajo entre 30 y 37°C, preferiblemente entre 33 y 37°C.

15. El aparato conforme a la reivindicación 14, donde el medio de calentamiento mantiene la temperatura de trabajo

durante al menos 45 minutos.


 

Patentes similares o relacionadas:

Composición para el tratamiento de enfermedades isquémicas o trastornos inflamatorios neurogénicos, que contienen el secretoma de células progenitoras neurales como ingrediente activo, del 22 de Julio de 2020, de S-BIOMEDICS: Una composición para uso en el tratamiento de enfermedad cerebrovascular isquémica, cardiopatía isquémica, infarto de miocardio, enfermedad de Alzheimer, enfermedad […]

Agente profiláctico y/o agente terapéutico para el linfoma difuso de células B grandes, del 17 de Junio de 2020, de ONO PHARMACEUTICAL CO., LTD.: 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona, una sal de la misma, un solvato de la misma o un N-óxido de la misma, […]

Métodos y dispositivos para trasplante celular, del 10 de Junio de 2020, de Sernova Corporation: Un dispositivo para implantar células en un cuerpo huésped, que comprende: un andamio poroso que comprende al menos una cámara que tiene un extremo proximal y un extremo […]

Método para activar células T auxiliares, del 10 de Junio de 2020, de OTSUKA PHARMACEUTICAL CO., LTD.: Una composición para su uso en el tratamiento o prevención del cáncer mediante la activación de células T auxiliares en un sujeto, en donde dicha composición […]

Método para preparar una célula dendrítica, célula dendrítica preparada mediante el mismo y uso del mismo, del 13 de Mayo de 2020, de JW Creagene Inc: Un método para preparar una célula dendrítica que comprende: cultivar una célula dendrítica inmadura hasta una célula dendrítica madura en presencia de […]

Transfección mediada por células apoptóticas de células de mamífero con ARN de interferencia, del 22 de Abril de 2020, de LOMA LINDA UNIVERSITY: Una célula de mamífero apoptótica o preapoptótica para su uso en la prevención del rechazo de trasplantes, en la que la célula de mamífero […]

Métodos mejorados para producir terapias celulares adoptivas, del 22 de Abril de 2020, de Bluebird Bio, Inc: Un método in vitro para producir un producto terapéutico de células T que comprende: a) proporcionar una población de células mononucleares […]

Solución de preservación del trasplante basada en polímeros, del 25 de Marzo de 2020, de Kizhakkedathu, Jayachandran: Una solución de preservación del trasplante que comprende un poliglicerol hiperramificado o dendrítico en el que el poliglicerol hiperramificado […]

Utilizamos cookies para mejorar nuestros servicios y mostrarle publicidad relevante. Si continua navegando, consideramos que acepta su uso. Puede obtener más información aquí. .