Proteínas PilC recombinantes, método para su producción y uso de las mismas.

Método para la producción de una proteína esencialmente pura que tiene la actividad biológica de laproteína PilC,

en el que la actividad significa que la proteína apoya el ensamblaje de los Pili de tipo 4, media la uniónde las bacterias que llevan pili de tipo 4 a los receptores en células epiteliales humanas o muestra adecuacióninmunológica para inducir anticuerpos contra bacterias que llevan pili de tipo 4 que compiten con la unión de lasbacterias a sus receptores en las células epiteliales humanas y preferiblemente bloquean la unión obtenible segúnun método en el que se cultiva una célula hospedadora bajo condiciones adecuadas con un vector recombinanteque contiene una secuencia génica recombinante para la síntesis de la proteína, como se muestra en la Figura 4,cuya porción de secuencia de fase variable que codifica el péptido señal y que contiene una secuencia denucleótidos homopolimérica se caracteriza por la siguiente modificación:

(a) sustitución de la porción de secuencia de fase variable que codifica el péptido señal por una secuencia denucleótidos heteropolímérica, no de fase variable, que comprende CATACCGGTGGAGGTGGTGGAGCG, quecodifica un péptido señal que es compatible con la secreción de la proteína PilC,

de forma que se hace posible la expresión de la secuencia genética recombinante en una célula hospedadora noafectada por variaciones de fase, y se purifica la proteína.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E04030675.

Solicitante: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FORDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V..

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: 14195 BERLIN ALEMANIA.

Inventor/es: MEYER, THOMAS, F., RUDEL, THOMAS, SCHEUERPFLUG, INA, RYLL, ROLAND RICHARD.

Fecha de Publicación: 3 de Mayo de 2013.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/22 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Neisseriaceae (F), p. ej. Acinetobacter.
C07K16/12 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra materiales bacterianos.
C12N15/63 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
C12N15/67 C12N 15/00 […] › Métodos generales para favorecer la expresión.
C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.

PDF original: ES-2402413_T3.pdf

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