Uso de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre en la preparación de un medicamento para promover la epitelización y la formación de neodermis en un sitio de herida,

en el que dicha población concentrada de células se ha de administrar a un paciente que necesita la misma sin cultivar las células antes de que las células se administren

1. Campo de la Invención

La presente invención se refiere en general al uso de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprenden células madre en la preparación de un medicamento para promover la epitelización y formación de neodermis en un sitio de herida, por ejemplo, heridas producidas como resultado de diabetes, enfermedad vascular periférica crónica y obesidad.

2. Descripción de Técnica Relacionada

Aproximadamente cinco millones de estadounidenses sufren de úlceras abiertas crónicas debido al flujo sanguíneo limitado que ralentiza el proceso de curación propio del organismo. Normalmente, las lesiones a la piel ponen en movimiento una cascada compleja de acontecimientos que da como resultado en última instancia la cicatrización de heridas, concretamente la formación de la neodermis y reepitelización. Esta secuencia de acontecimientos compleja incluye una sinfonía de interacción entre factores del crecimiento locales, regionales y sistémicos, citoquinas, así como participantes celulares, incluyendo células madre mesenquimales. Sin embargo, la cicatrización de heridas inadecuada y/o incompleta, puede conducir a morbilidad individual significativa incluyendo una reducción profunda de la calidad de vida. Las úlceras se pueden infectar gravemente, se pueden volver gangrenosas y en algunos casos necesitar la amputación. Por ejemplo, la causa principal de amputación no traumática debido a cicatrización de heridas inadecuada es la diabetes. Existen casi 16 millones de diabéticos en los Estados Unidos. Más de 67.000 pacientes con diabetes necesitan amputación quirúrgica cada año, necesitando una rehabilitación larga y costosa. Para muchos, la movilidad y la independencia se afectan gravemente, alterando permanentemente su calidad de vida. En su extremo, la cicatrización de heridas pobre puede servir como la causa principal de muerte.

Para pacientes que tienen heridas crónicas que son difíciles de curar, el cuidado médico y quirúrgico básico es esencial, pero no siempre suficiente. Las terapias actuales para cicatrización de heridas incluyen la eliminación de tejido enfermo, el uso de factores del crecimiento, tratamiento con oxígeno hiperbárico (alta presión), apósitos para heridas avanzados, terapia de antibióticos, apósitos de heridas convencionales, asesoramiento nutricional, educación/prevención, cirugía y terapia física. Por ejemplo, la manipulación de moléculas únicas o una combinación de moléculas participantes, incluyendo pero sin limitación PDGF-BB y bFGF, se puede usar para aumentar la cicatrización de heridas natural. Adicionalmente, también se puede usar la aplicación de productos celulares “elaborados mediante ingeniería” (Apligraf® y Dermagraft®) como una manera de generar un patrón más fisiológico de expresión del factor de crecimiento. La implementación de terapias como Regranex, un factor del crecimiento obtenido de plaquetas que estimula la curación, también ha demostrado ser beneficioso para el cuidado de heridas en pacientes apropiados.

El enfoque celular regenerativo también ha disfrutado de éxito relativo en comparación con terapias moleculares únicas o de combinación descritas anteriormente. La medicina regenerativa aprovecha, de una manera clínicamente dirigida, la capacidad de las células madre (es decir, las células maestras no especializadas del organismo) de renovarse así mismas indefinidamente y desarrollarse en células especializadas maduras. Sin embargo, la aplicación amplia de la terapia celular regenerativa se ha visto obstaculizada por cuestiones de retención celular y los altos costes asociados con la manipulación exhaustiva ex vivo. Sin embargo, aunque las poblaciones de células madre han demostrado estar presentes en uno o más de médula ósea, piel, músculo, hígado y cerebro (Jiang y col., 2002b; Alison, 1998; Crosby y Strain, 2001), su frecuencia en estos tejidos es baja. Por ejemplo, la frecuencia de células madre mesenquimales en médula ósea se estima en entre 1 y 100.000 y 1 en 1.000.000 de células nucleadas (D'Ippolito y col., 1999; Banfi y col., 2001; Falla y col., 1993). De forma similar, la extracción de ASC a partir de la piel implica una serie complicada de etapas de cultivo celular a lo largo de varias semanas (Toma y col., 2001) y la aplicación clínica de células madre obtenidas a partir de músculo esquelético requiere una fase de cultivo de dos a tres semanas (Hagege y col., 2003). Por tanto, cualquier aplicación clínica propuesta de células madre a partir de tales tejidos requiere aumentar el número, la pureza y la madurez de las células mediante procedimientos de purificación celular y cultivo celular.

Aunque las etapas de cultivo celular pueden proporcionar número de células, pureza y madurez aumentada, lo hacen a un coste. Este coste puede incluir una o más de las siguientes dificultades técnicas: pérdida de función celular debido a envejecimiento celular, pérdida de poblaciones de células no madre potencialmente útiles, retrasos en la aplicación potencial de células a pacientes, coste monetario aumentado y riesgo aumentado de contaminación de células con microorganismos ambientales durante el cultivo. Estudios recientes que examinan los efectos terapéuticos de ASC obtenidos de médula ósea han usado básicamente médula completa para eludir los problemas asociados con el cultivo celular (Horwitz y col., 2001; Orlic y col., 2001; Stamm y col., 2003; Strauer y col., 2002). Sin embargo, los beneficios clínicos han sido subóptimos, un resultado casi seguramente relacionado con la dosis y la pureza de ASC limitada inherentemente disponible en la médula ósea.

Recientemente, el tejido adiposo ha demostrado ser una fuente de células madre (Zuk y col., 2001; Zuk y col., 2002). El tejido adiposo (a diferencia de la médula, piel, músculo, hígado y cerebro) es comparativamente fácil de recoger en cantidades relativamente grandes con baja morbilidad (Commons y col., 2001; Katz y col., 2001b). Sin embargo, existe una carencia de procedimientos adecuados para recoger células madre obtenidas de tejido adiposo. Los procedimientos existentes sufren de varias deficiencias. Por ejemplo, los procedimientos existentes carecen de automatización parcial o completa, un sistema parcial o completamente cerrado, desechabilidad de los componentes, etc.

Dado el potencial terapéutico de las células madre obtenidas del tejido adiposo para la cicatrización de heridas, existe una necesidad en la técnica de un procedimiento para recoger células a partir del tejido adiposo que produzca una población de células madre adultas con rendimiento, consistencia y/o pureza aumentados y que lo haga de forma rápida y fiable con una necesidad disminuida o no existente de manipulación después de la extracción.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere al uso de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo, por ejemplo, células madre y progenitoras adultas, en la preparación de un medicamento para promover la epitelización y formación de neodermis en un sitio de herida, en el que dicha población concentrada de células se tiene que administrar a un paciente que necesita de las mismas sin cultivar las células antes de administrarlas al paciente. Por consiguiente, en una realización general, la presente invención se refiere al uso de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre en la preparación de un medicamento para promover la epitelización y la formación de neodermis en un sitio de herida, en el que dicha población concentrada de células se tiene que administrar directamente a un receptor junto con tales aditivos necesarios para promover, generar o apoyar un beneficio de cicatrización de heridas terapéutico.

En realizaciones específicas, la presente invención se refiere a procedimientos para promover la cicatrización de heridas, administrando una concentración de células regenerativas. Las células regenerativas pueden comprender, por ejemplo, células madre, células progenitoras o una combinación de las mismas. En determinadas realizaciones, la administración de dosis múltiples de células regenerativas puede ser necesaria para obtener un beneficio terapéutico. Adicionalmente, se pueden administrar aditivos tales como uno o más factores del crecimiento con las células regenerativas. En una realización preferida, las células regenerativas se administran con factores del crecimiento angiogénicos solas o en combinación con otros aditivos. Las células regenerativas también se pueden administrar... [Seguir leyendo]

1. Uso de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre en la preparación de un medicamento para promover la epitelización y la formación de neodermis en un sitio de herida, en el que dicha población concentrada de células se ha de administrar a un paciente que necesita la misma sin cultivar las células antes de que las células se administren.

2. El uso de la reivindicación 1 en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprenden células madre secretan MIP-1 alfa, RANTES, MCP-1, MIG, TARC, MIC-1, KC y TIMP.

3. El uso de la reivindicación 1, en el que dicha población concentrada de células secreta IL-4, IL-6, Linfotactina, LIX, MIP-1 gamma, RANTES, MCP-1, MCP-5, SDF-1 alfa, KC y TIMP-1.

4. El uso de la reivindicación 1, en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo secreta colágeno en el sitio de la herida.

5. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre comprende además células endoteliales.

6. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre comprende además células progenitoras.

7. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo que comprende células madre comprende además una combinación de células endoteliales y células progenitoras.

8. El uso de la reivindicación 1 en el que dicha población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo secreta MIP-2 y KC.

9. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento promueve el crecimiento de pelo en dicho sitio de herida.

10. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento está formuladaopara una introducción por bolo.

11. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento está formulado para introducción en múltiples dosis.

12. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho medicamento comprende además uno o más factores angiogénicos.

13. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho medicamento comprende además uno o más fármacos inmunodepresores.

14. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento está formulado para administración subcutánea, dérmica o intramuscular.

15. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento se formula para administración a la vasculatura.

16. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dichas células regenerativas obtenidas de tejido adiposo están modificadas mediante transferencia génica de forma que la expresión de uno o más genes en las células modificadas se altera.

17. El uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la modificación da como resultado la alteración del nivel de angiogénesis.

18. El uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la modificación da como resultado la alteración del nivel de epitelización.

19. El uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la modificación da como resultado la alteración del nivel de MIP-1alfa, RANTES, MCP-1, MIG, TARC, MIP-2, KC y TIMP o cualquier combinación de los mismos.

20. El uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la modificación altera las propiedades de reposición de las células regenerativas obtenidas de tejido adiposo.

21. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento está formulado a partir de una población concentrada de células regenerativas obtenidas de tejido adiposo a partir del mismo sujeto

al cual se tiene que administrar el medicamento.

22. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicho medicamento proporciona una concentración mínima entre 1 x 105 y 1 x 107 células regenerativas obtenidas de tejido adiposo por ml.

23. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicha herida es una herida de úlcera isquémica, una herida diabética o una herida traumática.

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