El uso de

(i) un fragmento de anticuerpo que se une a CD1 y que inhibe la presentación del antígeno a las células NK-T,

o

(ii) una sustancia que inhibe la actividad IL-13 que es un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13, un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13R o un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13R2 para preparar un medicamento para el tratamiento o prevención de la colitis ulcerosa en un sujeto

Procedimientos de tratamiento y prevención de colitis que se implican IL-13 y células NK-T.

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

La presente invención se refiere al uso de determinados fragmentos de anticuerpos que modulan los efectos inductores de colitis de las células NK-T, para la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la colitis ulcerosa. .

Técnica anterior

Se cree que las enfermedades inflamatorias intestinales (EII) humanas, la enfermedad de Crohn (EC) y la colitis ulcerosa (CU) , se deben a una sensibilidad anómala de los linfocitos T en la mucosa contra antígenos bacterianos en el lumen intestinal (Sartor, 1995) . En la EC, los linfocitos T respondedores muestran un fenotipo Th1 y, por tanto, producen grandes cantidades de interferón- (IFN-) y de factor de necrosis tumoral (TNF-) . La secreción de IL-12, la fuerza conductora de la diferenciación de Th1 también aumenta (Parronchi y col., 1997) . En la CU, los linfocitos T respondedores están menos bien definidos. En este caso, mientras que la producción de citocina Th1 es normal o está disminuida y alguna producción de citocina Th2 (IL-5 e IL-10) está aumentada, la producción de IL-4, la citocina “representativa” de la respuesta Th2, no está aumentada (Fuss y col., 1996) .

Además, en la técnica se sabe que los anticuerpos anti-CD4 son adecuados para tratar la colitis ulcerosa en seres humanos (Sandbom y col., 2002 y Okamoto y col., 1999) .

Sumario de la invención

La presente invención proporciona el uso de un fragmento de anticuerpo que inhibe la presentación de las células NK-T y que se une específicamente a CD1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento o prevención de la colitis ulcerosa en un sujeto.

La invención también proporciona el uso de una sustancia que inhibe la actividad IL-13 para preparar un medicamento para el tratamiento o prevención de la colitis ulcerosa en un sujeto, en el que la sustancia es un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13, un anticuerpo que se une a IL-13R o a IL13R 2-Fc.

Breve descripción de los dibujos Los dibujos adjuntos, que se incorporan y constituyen una parte de la presente memoria descriptiva, ilustran diversas realizaciones de la presente invención y, junto con la descripción, sirven para explicar los principios de la invención.

Las Figuras 1A-F muestran que la pre-sensibilización antes de la exposición intrarrectal con oxazolona conduce a una colitis progresiva crónica. Pérdida de peso (A) y mortalidad (B) de ratones después de presensibilización con vehículo (etanol) u oxazolona y exposición intrarrectal con vehículo o con diferentes dosis de oxazolona aumento 5x (C) y 10x (E) de cortes transversales teñidos con H.E. de colon de ratón 7 días después de pre-sensibilización y exposición con etanol. D+F muestran los efectos después de la presensibilización con oxazolona y re-exposición con oxazolona al 1% por vía intrarrectal.

Las Figuras 2A-B muestran la producción de citocinas de linfocitos de ratones con colitis inducida con oxazolona. Cinco días después de la inducción de la colitis con oxazolona (en color gris) o con TNBS (en color negro) se aislaron (A) células mononucleares de la lámina propia (CMLP) , células mononucleares hepáticas (CMNH) , células de nódulos linfáticos mesentéricos (CNLM) y esplenocitos (SPC) y se estimularon in vitro durante 48 horas con anti-CD3 y anti-CD28 unido a placas. Las concentraciones de citocina se midieron en sobrenadantes por ELISA. (B) Las CMLP se aislaron el día 2, 5 u 8 después de la inducción de la colitis con oxazalona. Las CMLP se estimularon como se ha indicado anteriormente y en los sobrenadantes se midieron las concentraciones de IL-4 (en blanco) e IL-13 (con rayas) .

Las Figuras 3A-B muestran que la neutralización de IL-13 previene la colitis inducida con oxazolona. (A) pérdida de peso y (B) mortalidad de ratones con colitis inducida con oxazalona tratados con IL13R 2-Fc (diamantes) o proteína de control (cuadrados) . Las Figuras 4A-D muestran que la reducción de linfocitos NK1.1 protege a los ratones de la colitis inducida con oxazolona pero no de la colitis inducida con TNBS. Pérdida de peso (A+C) y mortalidad (B+D) después de la inducción de colitis con oxazalona (A+B) o colitis con TNBS (C+D) o inyección de vehículo (etanol; círculos) . A los ratones se les inyectó anticuerpo de control (cuadrados) o se redujeron células NK1.1 con PK136 (rombos) .

Las Figuras 5A-B muestran la presentación a antígeno a CD1 y que los células NK-T para J 281 son esenciales para la inducción de la colitis con oxazalona. (A) Pérdida de peso de ratones después de la inyección intrarrectal de vehículo (círculos) u oxazalona después de inyección i.v. de anticuerpos CD1 bloqueantes (20H2; diamantes) o anticuerpo de control (cuadrados) . (B) Pérdida de peso de ratones CD1KO después de la inducción de colitis con oxazalona de ratones CD1KO (rombos) , ratones J 281KO (círculos) y ratones de tipo silvestre (cuadrados) .

La Figura 6 muestra la producción de citocinas en respuesta a GalCer. CMLP (panel superior) , esplenocitos o células CD4 esplénicas (panel inferior) no estimuladas (no estim.) o estimuladas con anti-CD3 y anti-CD28 soluble (aCD3/28) unido a placas, células L no transfectadas y vehículo (LC+Veh.) o células L transfectadas con CD1 y GalCer (LCD1+aGC) 100ng/ml.

Descripción detallada de la invención La presente invención puede comprenderse más fácilmente en relación con la siguiente descripción detallada de realizaciones preferidas de la invención y los Ejemplos incluidos en la misma y con las Figuras y su descripción previa y siguiente.

Antes de divulgar y describir los presentes procedimientos y composiciones, debe entenderse que la presente invención no se limita a procedimientos específicos o a sustancias específicas a menos que se especifique de otra manera o a reactivos particulares a menos que se especifique de otra manera, de tal modo que, por supuesto, varía. También debe entenderse que la terminología usada en el presente documento es solo con fines descriptivos de realizaciones particulares y no pretende ser limitante.

Como se usa en la presente memoria y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el” y “la”

incluyen referentes plurales a menos que el contexto dictamine claramente otra cosa. Por tanto, por ejemplo, la referencia a “una sustancia” incluye una o más sustancias, y similares.

En el presente documento los intervalos pueden expresarse como desde “aproximadamente” un valor particular y/o a “aproximadamente” otro valor particular. Cuando dicho intervalo se expresa, otra realización incluye desde el valor particular y/o el otro valor particular. De manera similar, cuando los valores se expresan como aproximaciones, mediante el uso de la palabra precedente “aproximadamente”, se entenderá que el valor particular forma otra realización. Adicionalmente se entenderá que los extremos de cada uno de los intervalos son significativos tanto en relación con el otro extremo e independientemente del otro extremo.

Procedimientos de tratamiento y prevención La presente divulgación proporciona un procedimiento de tratamiento o prevención de la respuesta inflamatoria de colitis en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de una sustancia que modula la actividad de IL-13.

Cualquier animal que padezca colitis (por ejemplo, colitis ulcerosa) puede tratarse mediante este procedimiento. Por lo tanto, el sujeto puede ser cualquier mamífero, preferentemente un ser humano, y puede incluir, pero sin limitación, ratones, rata, vaca, cobaya, hámster, conejo, gato, perro, cabra, oveja, mono, caballo y chimpancé.

Como se usa en el presente documento, una sustancia de la presente invención es un fragmento de anticuerpo.

La IL-13R de la presente invención puede ser la IL-13R de rata o fragmentos de este receptor y puede accederse a la secuencia para este receptor en la base de datos de GenBank mediante el Nº de Acceso AY044251. Esta secuencia se incorpora en el presente documento en su totalidad por referencia, La IL-13R de la presente invención también puede ser la IL-13R de ratón o fragmentos de este receptor y puede accederse a la secuencia para este receptor en la base de datos de GenBank mediante... [Seguir leyendo]

1. El uso de (i) un fragmento de anticuerpo que se une a CD1 y que inhibe la presentación del antígeno a las células NK-T, o (ii) una sustancia que inhibe la actividad IL-13 que es un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13, un 5 fragmento de anticuerpo que se une a IL-13R o un fragmento de anticuerpo que se une a IL-13R 2

para preparar un medicamento para el tratamiento o prevención de la colitis ulcerosa en un sujeto.

2. El uso de la reivindicación 1, en el que el medicamento comprende un fragmento de anticuerpo que inhibe la presentación del antígeno a las células NK-T y que se une específicamente a CD1.

3. El uso de la reivindicación 2, en el que el sujeto es un ratón o un ser humano.

4. El uso de la reivindicación 1, en el que el medicamento comprende una sustancia que inhibe la actividad de IL-13.

5. El uso de la reivindicación 4, en el que el sujeto es un ratón o un ser humano.

6. El uso de la reivindicación 4, en el que la colitis está causada por un trastorno de intestino inflamatorio.

7. El uso de la reivindicación 6, en el que la sustancia que inhibe la actividad de IL-13 es un fragmento de anticuerpo que se une específicamente a la IL13.