Procedimiento para la producción de gránulos o microgránulos que contienen hongos filamentosos que comprende las etapas de:

- seleccionar y hacer crecer hongos filamentosos en un medio de cultivo adecuado durante un periodo de tiempo predeterminado,

- mezclar dicho medio de cultivo, tras dicho tiempo predeterminado, con un agente gelificante y al menos un vehículo, de modo que se obtiene una mezcla,

- someter dicha mezcla a gelificación, a través de contacto gota a gota, con una disolución que contiene una sal de calcio obteniendo así gránulos o microgránulos gelificados que contienen dichos hongos filamentosos,

- secar dichos gránulos o microgránulos gelificados hasta un contenido en humedad del 13-18%

Procedimiento para la producción de gránulos o microgránulos que contienen hongos filamentosos.

Campo de aplicación

La presente invención se refiere al campo técnico de los agentes fitosanitarios.

En particular, la invención se refiere a un procedimiento para la producción a escala industrial de gránulos o microgránulos que contienen hongos filamentosos, más específicamente hongos nematófagos.

Técnica anterior

El uso de microorganismos y en particular hongos como agentes fitosanitarios constituye una práctica cada vez más común.

Ya se comercializan productos a base de hongos para luchar contra insectos, hongos fitopatógenos y otros parásitos de cultivos.

Por ejemplo, en la patente estadounidense US 5 811 092, se describen agentes nematófagos para combatir nematodos de los géneros Meloidogyne, Heterodera y Ditylenchus que consisten en cepas particulares de Arthrobotrys conoides Dreschsler, un hongo filamentoso.

Los nematodos mencionados anteriormente son responsables de graves enfermedades de vegetales y hongos y pueden provocar enormes pérdidas económicas, ya que pueden conducir a que se ponga en peligro un 50-70% de la cosecha.

El uso de hongos nematófagos, como alternativa a los productos químicos antiparasitarios habituales (por ejemplo bromuro de metilo, tricloronitrometano, dicloropropeno, etc.), para su aplicación sobre el suelo antes del cultivo, o a los carbamatos, aplicados a los cultivos, permite que se eviten graves inconvenientes, tales como la esterilización del suelo, la destrucción del equilibrio ecológico y la posible toxicidad para el hombre y los animales.

Por tanto, los hongos nematófagos son particularmente adecuados para su uso en la agricultura ecológica, pero en la actualidad existe una dificultad sustancial para producirlos industrialmente con altos rendimientos y en formas adecuadas para garantizar un estado de conservación satisfactorio antes de su uso.

De hecho, en la técnica anterior, los hongos nematófagos se producen en un medio de cultivo adecuado. Entonces, los hongos nematófagos, junto con su medio de cultivo, o bien se dispersan directamente sobre el suelo que va a tratarse o bien se mantienen en el medio de cultivo antes de su uso. Sin embargo, en estas condiciones de conservación, los hongos nematófagos siguen reproduciéndose bastante rápidamente y experimentan un declive tras un corto periodo de tiempo (1-2 semanas) a medida que se agotan las fuentes de nutrientes.

El problema que subyace a la presente invención era el de proporcionar un procedimiento para la producción a escala industrial de hongos filamentosos, con alto rendimiento, bajo coste y en una forma adecuada para garantizar su estabilidad y viabilidad durante un largo tiempo de almacenamiento antes de su uso sobre el suelo que va a tratarse.

Sumario de la invención

La idea para solucionar un problema técnico de este tipo fue la de incorporar los hongos filamentosos en fórmulas sólidas adecuadas que garantizarían su estabilidad y viabilidad durante largos periodos de tiempo. En este sentido, se ha demostrado que fórmulas granulares o microgránulos que contienen hongos filamentosos son adecuados para los fines de la presente invención.

En vista de la idea mencionada anteriormente, el problema técnico que subyace a la presente invención se soluciona mediante un procedimiento para la producción de gránulos o microgránulos que contienen hongos filamentosos que comprende las etapas de:

Descripción detallada de la invención

La presente invención se describirá adicionalmente con referencia a varias realizaciones de ejemplo proporcionadas con fines ilustrativos y no limitativos.

Antes de proceder con la ilustración de los ejemplos, puede ser útil definir los materiales usados para llevar a cabo las diversas etapas del procedimiento de producción según la invención.

Los hongos filamentosos usados en el procedimiento según la invención pertenecen a la familia Moniliales, preferiblemente hongos filamentosos de Arthrobotrys conoides Dreschsler.

El medio de cultivo para hongos filamentosos comprende al menos una fuente de carbono elegida entre el grupo que consiste en melaza, extracto de malta y sacarosa y al menos una fuente de nitrógeno orgánico elegida entre extracto de levadura y "macerado de maíz".

Preferiblemente, la al menos una fuente de carbono mencionada anteriormente constituye entre el 70 y el 85% en peso del peso seco del medio de cultivo y la al menos una fuente de nitrógeno orgánico mencionada anteriormente constituye entre el 15 y el 30% en peso del peso seco del medio de cultivo.

El medio de cultivo también puede incluir una fuente de nitrógeno mineral, que consiste en sales o nitratos de amonio. La fuente de nitrógeno mineral mencionada anteriormente se añade habitualmente de manera gradual al medio de cultivo durante el crecimiento de los hongos en una cantidad no superior al 10% en peso del peso seco del medio de cultivo y habitualmente de entre el 5 y el 8% en peso.

Una composición preferida del medio de cultivo consiste en un 75-85% de extracto de malta y un 15-25% de extracto de levadura, siendo los porcentajes en peso del peso seco del medio de cultivo.

Otro medio de cultivo preferido comprende un 60-65% de melaza, un 10-15% de sacarosa, un 10-15% de macerado de maíz y un 10-15% de extracto de levadura. Ventajosamente, un medio de cultivo de este tipo contiene, además, entre un 5 y un 8% de una fuente de nitrógeno mineral, en particular hidrogenofosfato de diamonio.

Un medio de cultivo preferido adicional contiene dos fuentes de carbono, es decir, extracto de malta, en una can-tidad del 25-30%, y melaza, en una cantidad del 40-45%, así como macerado de maíz, en una cantidad del 25-30%.

El extracto de malta se obtiene mediante la germinación de los granos de cereales (habitualmente cebada). En el momento de la germinación, se producen enzimas específicas (amilasas), que permiten la conversión del almidón en azúcares. El extracto de malta contiene aproximadamente un 60% de maltosa, vitaminas y varios micronutrientes.

La melaza constituye un subproducto de la industria azucarera y viene en forma de un líquido viscoso marrón negruzco, que contiene un 10% de agua, un 35% de sacarosa, un 20% de otros azúcares y 15% de cenizas.

El extracto de levadura se obtiene mediante autolisis de Saccharomyces cerevisiae y viene en forma de polvo amarillo pálido fino, fácilmente soluble en agua. El extracto de levadura contiene péptidos, aminoácidos libres, bases púricas y pirimidínicas, así como vitaminas solubles en agua del grupo B. El extracto de levadura tiene un contenido en nitrógeno total del 10% y un contenido en nitrógeno a-amínico del 5%.

El macerado de maíz se obtiene a través de la maceración de los granos de maíz a 50ºC durante 24-48 horas en agua que contiene dióxido de azufre. Este reactivo permite la desnaturalización de la red proteica que rodea a los granos de almidón y ofrece la ventaja de evitar el crecimiento de microorganismos no deseados durante la maceración. El macerado de maíz tiene un contenido en nitrógeno total del 7% y un contenido en nitrógeno a-amínico del 1,7% y también contiene un 5% de azúcares, un 4% de potasio, un 3% de fósforo y un 17% de otros minerales.

En el procedimiento de producción según la invención, el crecimiento del hongo filamentoso en los medios de cultivo mencionados anteriormente se lleva a cabo preferiblemente durante 5-10 días a una temperatura constante de 23-30ºC.

El agente gelificante consiste preferiblemente en una disolución que contiene alginato de sodio a una concentración...

1. Procedimiento para la producción de gránulos o microgránulos que contienen hongos filamentosos que comprende las etapas de:

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha etapa de gelificación se lleva a cabo añadiendo dicha mezcla, gota a gota, a dicha disolución que contiene una sal de calcio.

3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho medio de cultivo para hongos filamentosos comprende al menos una fuente de carbono elegida entre el grupo que consiste en melaza, extracto de malta y sacarosa y al menos una fuente de nitrógeno orgánico elegida entre extracto de levadura y "macerado de maíz".

4. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que dicha al menos una fuente de carbono constituye entre el 70 y el 85% en peso del peso seco del medio de cultivo y dicha al menos una fuente de nitrógeno orgánico constituye entre el 15 y el 30% en peso del peso seco del medio de cultivo.

5. Procedimiento según la reivindicación 3 ó 4, en el que dicho medio de cultivo comprende además una fuente de nitrógeno mineral.

6. Procedimiento según la reivindicación 4, en el que dicha fuente de nitrógeno mineral está contenida en una cantidad no superior al 10% en peso del peso seco del medio de cultivo y preferiblemente de entre el 5 y el 8% en peso.

7. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el agente gelificante consiste en una disolución que contiene entre el 1 y el 2% en peso de alginato de sodio.

8. Procedimiento según la reivindicación 7, en el que dicha disolución de alginato de sodio se añade al medio de cultivo del hongo filamentoso preferiblemente según una razón en volumen de medio de cultivo/disolución de alginato de entre 40:60 y 60:40.

9. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que dichos vehículos se eligen del grupo que comprende tierra de diatomeas, preferiblemente Celatom FPM 0.08, harinas, preferiblemente harina de maíz, y azúcares.

10. Procedimiento según la reivindicación 9, en el que dichos hongos filamentosos son de Arthrobotrys conoides Dreschsler y dichos vehículos comprenden al menos harina de maíz.

11. Procedimiento según la reivindicación 9 ó 10, en el que los vehículos se añaden a la disolución de alginato de sodio en porcentajes que oscilan entre el 6% y el 22% en peso del peso de la disolución.

12. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la disolución que contiene una sal de calcio es preferiblemente una disolución acuosa de cloruro de calcio o gluconato de calcio que tiene una concentración de 0,2-0,3 M.

13. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que los gránulos o microgránulos secados tienen un diámetro promedio de entre 1 y 3 mm.