PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN DE PLEUROMUTILINAS.

Un procedimiento para la preparación de piperidinilsulfanilacetilmutilinas de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R),

y el grupo 2-amino-3-metil-butiril unido al anillo de piperidina está en la configuración (S) o en la configuración (R), que comprende las etapas de a) desproteger una piperidinilsulfanilacetilmutilina N-protegida de fórmula y aislar un compuesto de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R), en forma libre o en forma de una sal de adición de un ácido, en forma cristalina b) acilar dicho compuesto de fórmula III con (R)- o (S)-valina protegida como una enamina y activada como un anhídrido mezclado de ácido carbónico para formar un compuesto de fórmula en la que R1 y R2 son alquilo C1-4, y R3 es hidrógeno o alquilo C1-4, c) desproteger el compuesto de fórmula IV y aislar el compuesto de fórmula I

Procedimiento para la preparación de pleuromutilinas La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento para la preparación de 14-O-[ (N- (3-metil-2-amino-butirilpiperidinil) sulfanil) acetil]mutilinas. La pleuromutilina, un compuesto de la fórmula es un antibiótico de origen natural, por ejemplo, producido por los basidomicetos Pleurotus mutilus y P. passeckerianus, véase, por ejemplo, The Merck Index, 12a Edición, artículo 7694.

Se han desarrollado varias pleuromutilinas adicionales que tiene la estructura de anillos principal de pleuromutilina y que está sustituida en el grupo hidroxi, por ejemplo, como antimicrobianos. Debido a su remarcada actividad antimicrobiana, se ha descubierto que un grupo de derivados de pleuromutilina, piperidinilsulfanilacetilmutilinas valilsustituidas, como se describe en el documento WO 02/22580 es de particular interés. Para la producción de isómeros sustancialmente puros de este grupo de compuestos, se da la necesidad de desarrollar un procedimiento que sea conveniente para su uso a una escala industrial y evite la aplicación de costosos materiales de partida, reactivos peligrosos para el medio ambiente y disolvente, y también etapas que de gran duración y de difícil purificación.

En el documento EP 421 364, entre otros, se describen pleuromutilinas protegidas con sal de Dane de forma amorfa.

En un aspecto, la presente invención provee un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R) , y el grupo 2-amino-3-metil-butiril unido al anillo de piperidina está en la configuración (S) o en la configuración (R) , que comprende las etapas de

a) desproteger una piperidinilsulfanilacetilmutilina N-protegida de fórmula y aislar un compuesto de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la 10 configuración (R) , en forma libre o en forma de una sal de adición de un ácido, en forma cristalina b) acilar dicho compuesto de fórmula III con (R) - o (S) -valina protegida como una enamina y activada como un anhídrido mezclado de ácido carbónico para formar un compuesto de fórmula en la que R1 y R2 son alquilo C1-4, y R3 es hidrógeno o alquilo C1-4, c) desproteger el compuesto de fórmula IV y aislar el compuesto de fórmula I.

En una realización preferida, el compuesto de fórmula I se aísla en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. En una realización incluso más preferida, el compuesto de fórmula I se aísla en forma de un clorhidrato.

En un compuesto de fórmula I un átomo de carbono del anillo de piperidina se une a un átomo de azufre. Este enlace puede estar en cualquier posición del anillo de piperidina, por ejemplo, en la posición a, 1 o y, preferiblemente en la posición 1 con respecto al átomo de nitrógeno del anillo de piperidina.

La desprotección del compuesto N-protegido de fórmula II se realiza por una escisión ácida del grupo protector para formar una sal de adición de ácidos en forma de una mezcla isomérica con respecto a la configuración del átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre en un compuesto de fórmula II. Preferiblemente, la configuración en el anillo de mutilina de un compuesto de fórmula II es la misma que en una mutilina de origen natural. La mezcla isomérica se separa convenientemente a través de la cristalización, de tal manera que se obtienen isómeros sustancialmente puros en los que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R) . La etapa de cristalización conduce a un efecto de purificación alto y, por lo tanto, el compuesto de fórmula III en forma cristalina es muy adecuado en forma de un intermediario, particularmente también en una escala industrial, en el procedimiento para producir piperidinilsulfanilacetilmutilinas. Además, el uso del compuesto de fórmula III en forma cristalina tiene la ventaja de que pueden suministrarse otras etapas de purificación, tales como cromatografía, ya que la pureza del compuesto de fórmula III en forma cristalina es completamente suficiente para la producción de piperidinilsulfanilacetilmutilinas valil-sustituidas.

Pueden usarse un ácido mineral o un ácido orgánico para realizar la desprotección de un compuesto de fórmula II. En una realización preferida, el ácido metanosulfónico se usa para formar el mesilato respectivo en forma de una sal de adición de ácidos. Como grupo protector puede usarse el llamado Prot en un compuesto de grupos N-protectores convencionales de fórmula II.

Se ha mostrado que seleccionando un agente de desprotección adecuado, la solubilidad de la configuración (S) o la configuración (R) pueden mejorar selectivamente en que esta configuración (S) puede separarse de la configuración (R) . Por ejemplo, usando el ácido metanosulfónico como agente de desprotección, el producto cristalizado es el isómero (S) puro, mientras que el isómero (R) se mantiene en solución (véase el Ejemplo 1F) .

En una etapa posterior, la introducción del resto valil al isómero sustancialmente puro del compuesto de fórmula III se realiza acilando dicho compuesto con (R) - o (S) -valina protegida como una enamina para formar un compuesto de fórmula IV. La valina protegida se produce haciendo reaccionar la (R) -o (S) -valina con un 1-ceto éster de fórmula R1-CO-CH (R3) -COOR2 en la que R1, R2 y R3 son como se han definido anteriormente. Preferiblemente, se usa un éster metílico del ácido acetoacético. Preferiblemente, la valina se activa de acuerdo con un procedimiento de anhídrido de ácido carbónico mixto. El anhídrido mixto se produce in situ, por ejemplo, con la adición de cloruro del ácido piválico. Después de la adición del compuesto de Fórmula III producida en la etapa a) , se obtiene un compuesto protegido de fórmula IV. Estos compuestos comprenden propiedades de cristalización superior en comparación con compuestos que tienen otros grupos protectores, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo. Los compuestos que tienen estas propiedades de cristalización superior son fáciles de manejar con respecto a la producción y el aislamiento y proporcionan mejores oportunidades para la purificación adicional, por ejemplo, con respecto a piperidinilsulfanilacetilmutilinas 3-sustituidas de acuerdo con la fórmula I, el compuesto protegido con enamina de acuerdo con la fórmula IV se aísla y se purifica a través de la cristalización, mientras que el derivado protegido por terc-butoxicarbonilo correspondiente tiene que purificarse usando etapas de cromatografía tediosas y difíciles.

El grupo protector de compuestos de fórmula IV se elimina por medio de escisión ácida. Después de la eliminación del éster del ácido acetoacético y de la extracción, el compuesto de acuerdo con la fórmula I puede aislarse en forma libre o, después de la adición de un ácido que proporciona sales farmacéuticamente aceptables y después de la liofilización de la fase acuosa respectiva, en una forma amorfa de una sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, un clorhidrato.

En una realización preferida el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está en la posición 1 con respecto al átomo de nitrógeno del anillo de piperidina, es decir, una piperidinilsulfanilacetilmutilina 3-sustituida de fórmula I. Más preferiblemente, la presente invención se refiere a clorhidrato de 14-O-[ (N- (3-metil-2- (R) -aminobutiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina.

La presente invención se refiere adicionalmente a una forma cristalina novedosa de clorhidrato de 14-O-[ (N- (3-metil 2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina. El compuesto amorfo liofilizado de clorhidrato de 14-O-[ (N (3-metil-2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina obtenido a través de la secuencia de reacción que se ha descrito anteriormente se convierte en una forma cristalina usando un procedimiento de cristalización en un medio acuoso. El procedimiento puede mejorarse y acelerarse mediante el uso de cristales sembrados. A través de la recristalización, el clorhidrato de 14-O-[ (N- (3-metil-2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina cristalino puede llevarse a una forma de consistencia y pureza química y óptica deseadas. Se obtienen de esta manera isómeros sustancialmente puros que tienen un exceso diastereomérico de º97% con respecto a la... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento para la preparación de piperidinilsulfanilacetilmutilinas de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R) , y el grupo 2-amino-3-metil-butiril unido al anillo de piperidina está en la configuración (S) o en la configuración (R) , que comprende las etapas de a) desproteger una piperidinilsulfanilacetilmutilina N-protegida de fórmula y aislar un compuesto de fórmula en la que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R) , en forma libre o en forma de una sal de adición de un ácido, en forma cristalina b) acilar dicho compuesto de fórmula III con (R) - o (S) -valina protegida como una enamina y activada como un anhídrido mezclado de ácido carbónico para formar un compuesto de fórmula en la que R1 y R2 son alquilo C1-4, y R3 es hidrógeno o alquilo C1-4, 10 c) desproteger el compuesto de fórmula IV y aislar el compuesto de fórmula I.

2. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto de fórmula I se aísla en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. 15

3. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que el compuesto de fórmula I se aísla en forma de un clorhidrato.

4. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho compuesto de fórmula III es una 20 sal de adición con ácido metanosulfónico.

5. El procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 4, en el que el grupo N-protector es un grupo terc-butoxi-carbonilo.

6. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicha piperidinilsulfanilacetilmutilina Nprotegida se prepara haciendo reaccionar un pleuromutilin-22-O-sulfonato (por ejemplo, mesilato, besilato o tosilato) con un piperidin tiol N-protegido.

7. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 6, en el que la piperidinilsulfanilacetilmutilina N

protegida se prepara haciendo reaccionar un pleuromutilin-22-O-sulfonato con un piperidin tiol N-protegido en el que el átomo de carbono del anillo de piperidina unido al átomo de azufre está o en la configuración (S) o en la configuración (R) .

8. El procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 1-7, en el que el compuesto aislado de la 35 fórmula I es una piperidinilsulfanilacetilmutilina 3-substituida.

9. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1-8, en el que dicho piperidinilsulfanilacetilmutilina 3sustituido es clorhidrato de 14-O-[ (N-3-metil-2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina.

10. Un compuesto de fórmula IV como se define en la reivindicación 1.

11. Un compuesto de la reivindicación 10, en el que R1 y R2 son metilo y R3 es hidrógeno.

12. El compuesto de la reivindicación 11 en forma cristalina.

13. La sal de adición de ácidos de un compuesto de fórmula III en forma cristalina.

14. Clorhidrato de 14-O-[ (N-3-metil-2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina cristalino.

15. El compuesto de la reivindicación 14, que tiene un exceso 3- (S) -diastereomérico de º97%.

16. El compuesto de la reivindicación 14, con picos XRD 2-theta de 10 Ángulo [2-Theta] 6, 2 ± 0, 2 10, 9 ± 0, 2 12, 3 ± 0, 2 13, 4 ± 0, 2 14, 1 ± 0, 2 20, 8 ± 0, 2

17. Un procedimiento para la preparación del compuesto cristalino de la reivindicación 14, que comprende las etapas d.

15. disolver y calentar clorhidrato de 14-O-[ (N-3-metil-2- (R) -amino-butiril-piperidin-3 (S) -il) sulfanil) acetil]mutilina en un medio acuoso - opcionalmente sembrar la solución y agitarla a temperatura elevad.

20. enfriar la suspensión obtenida y agitarla a temperatura ambiente

- aislar el producto cristalino y repetir opcionalmente el procedimiento.

18. Composiciones farmacéuticas que contienen clorhidrato de 14-O-