PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCION SIMULTANEA DE LA METILACION DE CITOSINA Y DE MUTACIONES EN MUESTRAS DE ADN.
Procedimiento para la detección simultánea de 5-metilcitosina y de polimorfismos de un único nucleótido (del inglés Single Nucleotide Polymorphisms = SNP''s) o mutaciones en muestras de ADN genómico,
caracterizado porque se realizan las siguientes etapas: (a) se hace reaccionar químicamente un ADN genómico, procedente de una muestra de ADN, con un reactivo, reaccionando de manera diferente la 5-metilcitosina y la citosina, y por consiguiente éstas, después de la reacción, muestran un diferente comportamiento de apareamiento de bases en el dúplex de ADN; (b) se amplifica el ADN tratado previamente mediando utilización de una polimerasa y de por lo menos un oligonucleótido (tipo A) como cebador; (c) se hibrida el ADN genómico amplificado con por lo menos un oligonucleótido (del tipo B) mediando formación de un dúplex, en que los mencionados oligonucleótidos hibridados del tipo B delimitan con su extremo 3'', directamente o a una cierta distancia de hasta 10 bases, con las posiciones que han de ser investigadas en lo que se refiere a su metilación en la muestra de ADN genómico; (d) el oligonucleótido (tipo B), que tiene una secuencia conocida de n nucleótidos, se prolonga mediante una polimerasa por un máximo de diez nucleótidos, empleándose una pluralidad de nucleótidos, llevando por lo menos un nucleótido una marcación detectable y dependiendo la prolongación del estado de metilación de la respectiva citosina en la muestra de ADN genómico; (e) los oligonucleótidos prolongados se investigan en cuanto a la presencia de la marcación.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: EPIGENOMICS AG.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: KASTANIENALLEE 24,10435 BERLIN.
Inventor/es: OLEK, ALEXANDER, BERLIN, KURT.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 14 de Mayo de 2008.
Clasificación PCT:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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