PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCION DE UNA METILACION DE CITOSINA EN ISLOTES DE CPG.
Procedimiento para el análisis del grado de metilación dentro de un islote de CpG en muestras de ADN,
caracterizado porque se realizan las siguientes etapas de procedimiento: a) a partir de una muestra se extrae el ADN, b) el ADN se trata, preferiblemente con un bisulfito (= disulfito, hidrógeno-sulfito), de tal manera que la citosina es transformada en una base diferente en cuanto al comportamiento de apareamiento de bases en el dúplex de ADN, mientras que la 5-metilcitosina permanece inalterada, c) uno o varios cebadores de oligonucleótidos se hibridan con el ADN tratado, d) los cebadores hibridados se prolongan en una reacción de polimerasa, siendo incorporados nucleótidos marcados en lo esencial solamente cuando en el ADN tratado, después de la etapa b), se presentaban todavía bases de citosina, y suponiéndose como similar el estado de metilación en las posiciones que se han de investigar, y estando el grado de la incorporación de los nucleótidos marcados correlacionado con la metilación en la muestra de ADN que se ha de investigar; e) se eliminan los nucleótidos marcados no han sido incorporados en la reacción de polimerasa; f) se determina de un modo aproximado el número de las marcaciones en el fragmento producido mediante la prolongación con un cebador, midiendo una intensidad de señal que sale de estas marcaciones.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: EPIGENOMICS AG.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: KASTANIENALLEE 24,10435 BERLIN.
Inventor/es: BERLIN, KURT.
Fecha de Publicación: .
Clasificación PCT:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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