Procedimiento de formación de imágenes de muerte celular in vivo.

Uso de una anexina marcada con un radionúclido biocompatible para la preparación de un agente diagnósticoapropiado para la formación de imágenes in vivo de células nucleadas,

dentro de una región de una persona,presentando una fosfatidilserina expuesta, comprendiendo la utilización:

a) la administración a la persona de la anexina marcada con un raidonúclido bicompatible;

b) la colocación de la persona dentro del campo de detección de un dispositivo detector de radiaciones; y

c) la medición de la emisión de radiaciones provinentes del radionúclido en la persona, para construir unaimagen de la emisión de las radiaciones;

en la que dicha imagen es una representación de una fosfatidilserina expuesta sobre dicha célula nucleada en elinterior de una región de dicha persona.

Procedimiento de formación de imágenes de muerte celular in vivo Campo de la invención La presente invención se refiere al uso de anexina radiomarcada para la formación de imágenes de regiones de una muerte celular en un mamífero utilizando formación de imágenes por rayos gamma.

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Antecedentes de la invención La apoptosis o muerte celular programada juega un papel crucial en el desarrollo de una pluralidad de procesos patológicos y homeostáticos (Thompson, 1985) . Por tanto, pueden ser posibles nuevas estrategias terapéuticas de una diversidad de enfermedades mediante la modulación de la muerte celular apoptótica. El estudio de nuevos agentes farmacológicos para promover o inhibir la muerte celular apoptótica ha resultado impedido por la falta de un (unos) procedimiento (s) no invasivo (s) para detectar y controlar la muerte celular apoptótica in vivo.

La espectroscopia por resonancia magnética nuclear de protones lípidos (1H NMRS) ha resultado ser de utilidad en la detección de los cambios de composición específicos y / o de la fluidez de la membrana plasmática de los linfoblastos u otras estirpes celulares sometidas a una muerte celular apoptótica (Blankerberg, et al., 1996) . El uso clínico de la apoptosis mediante el estudio de la 1H NMRS de los lípidos está en la actualidad limitada por complejos microentornos locales magnéticos encontrados de forma natural en muchos tejidos y órganos.

La presente invención se define mediante las reivindicaciones.

Rradionúclidos útiles en el procedimiento incluyen el Yodo 123, el Yodo 131, el Galio 67, el Indio 111, el Flúor 18, y el Tecnecio 99 m (Tc99m) . Debe apreciarse que el Flúor 18 es un emisor de positrones y, por tanto, resulta útil en la tomografía por emisión de positrones (PET) . El Yodo 123, el Yodo 131, el Galio 67, el Indio 111 y el Tecnecio 99 m son útiles en la detección de emisiones gamma estándar. El Tc99m es un radionúclido preferente para su uso en la invención. En una forma de realización preferente, el Tc99m está unido a la anexina por medio de la hidrazino nicotinamida (HYNIC) . La anexina mercada con Tc99m es típicamente administrada en una dosis de entre aproximadamente 5 y aproximadamente 20 mCi.

El dispositivo detector de las radiacciones puede ser un dispositivo detector de rayos gamma y la emisión de las radiaciones medidas es la emisión de rayos gamma. El dispositivo detector de las radiaciones puede ser un dispositivo detector de la emisión de positrones y la emisión de las radiaciones medidas es una medición de positrones.

Las etapas (b) y (c) pueden ser repetidas a intervalos seleccionados, en los que la repetición sea eficaz para realizar el seguimiento de los cambios de la intensidad de la emisión de las radiaciones (por ejemplo, la emisión de rayos gamma o de positrones) desde la región a lo largo del tiempo, reflejando los cambios en el número de células sometidas a la muerte celular.

Las etapas (b) y (c) pueden ser repetidas a intervalos seleccionados,... [Seguir leyendo]

1. Uso de una anexina marcada con un radionúclido biocompatible para la preparación de un agente diagnóstico apropiado para la formación de imágenes in vivo de células nucleadas, dentro de una región de una persona, presentando una fosfatidilserina expuesta, comprendiendo la utilización:

a) la administración a la persona de la anexina marcada con un raidonúclido bicompatible;

b) la colocación de la persona dentro del campo de detección de un dispositivo detector de radiaciones; y

c) la medición de la emisión de radiaciones provinentes del radionúclido en la persona, para construir una imagen de la emisión de las radiaciones;

en la que dicha imagen es una representación de una fosfatidilserina expuesta sobre dicha célula nucleada en el interior de una región de dicha persona.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el radionúclido se selecciona entre el grupo consistente en Yodo 123, Yodo 131, Galio 67, Indio 111, Flúor 18, y Tecnecio 99 m (Tc99m) .

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en la que el radionúclido es Tecnecio 99 m (Tc99m) .

4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en la que el Tc99m está unido a la anexina por medio de hidrazino nicotinamida (HYNIC) .

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en la que la cantidad de anexina marcada con Tc99m administrada se traduce por una dosis de aproximadamente 5 mCi y aproximadamente 20 mCi.

6. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicho dispositivo detector de radiaciones es un dispositivo detector de rayos gamma y dicha emisión de radiaciones es una emisión de rayos gamma.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en la que dicho dispositivo de detección de rayos gamma es un equipo de gammagrafía.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en la que la medición de la emisión de rayos gamma para construir la imagen se lleva a cabo entre aproximadamente 5 minutos y aproximadamente 2 horas después de la administración de la anexina marcada.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en la que la medición de la emisión de rayos gamma para construir la imagen se lleva a cabo aproximadamente 1 hora después de la administración de la anexina marcada.

10. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicho dispositivo detector de radiaciones es un dispositivo detector de la emisión de positrones.

11. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicha emisión de radiaciones es medida utilizando un dispositivo detector de emisión de positrones.

12. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, y que incluye así mismo la repetición de las etapas (b) y (c) a intervalos seleccionados, en la que dicha repetición es eficaz para realizar el seguimiento a lo largo del tiempo de la intensidad de la emisión de las radiaciones procedentes de la región.

13. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, la cual incluye así mismo la repetición de las etapas (b) y (c) a intervalos seleccionados, en la que dicha repetición es eficaz para efectuar un seguimiento a lo largo del tiempo de los cambios de la localización de la emisión de las radiaciones en la región.

14. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicho dispositivo detector de radiaciones es una cámara de formación de imágenes de 3 dimensiones.

15. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicha anexina es la anexina V.

16. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la cantidad de la anexina marcada administrada es inferior a aproximadamente 300 Ig de proteína / kg; o entre aproximadamente 1 Ig de proteína / kg y 10 Ig de proteína / kg.

17. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la anexina marcada es administrada por vía intravenosa, por vía intraperitoneal, por vía intralumbar, por vía intrapleural, por vía intralinfática o por vía intramuscular.

18. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicha región está en un órgano de dicha persona o en cualquier porción del órgano, en la cabeza de dicha persona o en cualquier porción de la cabeza, en el corazón de dicha persona o en cualquier porción del corazón, en el hígado de dicha persona o en cualquier porción del hígado, en los pulmones de dicha persona o en cualquier porción de los pulmones, en el bazo de dicha persona o en cualquier porción del bazo, en la médula ósea o en cualquier porción de la médula ósea, en un tumor de dicha persona o en cualquier porción de dicho tumor, en un trasplantes de dicha persona o en cualquier trasplante, o en una zona isquémica de dicha persona o en cualquier porción de la zona isquémica.

19. El uso de acuerdo con la reivindicación 15, en la que dicha región no está afectada por ninguna cualquiera de las siguientes circunstancias: un rechazo o una lesión de un trasplante de órgano, un rechazo o una lesión de un trasplante de médula ósea, una enfermedad inflamatoria infecciosa, una enfermedad inflamatoria no infecciosa, una enfermedad autoinmune, un infarto cerebral y de miocardio y una isquemia, cardiomipatías, una enfermedad ateroesclerótica, enfermedades degenerativas neuronales y neuromusculares, prepanoicitosis, talasemia º, tratamiento del cáncer, SIDA, síndromes mielodisplásicos, y una enfermedad del hígado inducida por una toxina.

20. Un kit para la formación de imágenes in vivo de una muerte celular el cual incluye:

a) un frasco cerrado herméticamente que contiene anexina marcada con HYNIC;

b) un frasco cerrado herméticamente que contiene una disolución de tricina Sn preparada y mantenida bajo N2;

c) unas instrucciones para fabricar la anexina marcada con Tc99m utilizando la anexina marcada conHYNIC y por la disolución de tricina Sn junto con el Tc99m; y

d) unas instrucciones para la administración de la anexina con Tc99m para la formación de imágenes in vivo de áreas de una muerte celular.

21. Un kit para la formación de imágenes in vivo de una muerte celular de acuerdo con la reivindicación 20, incluyendo anhídrido carbónico sólido contenido en el kit para mantener el kit a - 70º C.

22. Un kit para la formación de imágenes in vivo de una muerte celular de acuerdo con las reivindicaciones 20 o 21, 20 en el que la anexina marcada con HYNIC está liofilizada.