POLIMORFISMOS DE VEGF Y TERAPIA ANTI-ANGIOGÉNESIS.

Esta invención se refiere en general al tratamiento de enfermedades humanas y trastornos asociados con la terapia de anti-angiogénesis. Más específicamente, la invención se refiere a la terapia anti-angiogénesis de cáncer, ya sea sola o en combinación con otras terapias anti-cáncer. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El cáncer permanece como una de las amenazas más mortales para la salud humana, que afecta a más de un millón de nuevos pacientes cada año en los Estados Unidos. Los tumores sólidos son responsables de la mayoría de esas muertes. Aunque han existido avances significativos en el tratamiento médico de ciertos cánceres, los métodos actuales de tratamiento son relativamente no selectivos: la cirugía elimina el tejido enfermo; la radioterapia reduce los tumores sólidos; y la quimioterapia elimina las células que se dividen rápidamente. Estos tratamientos pueden dar como resultados numerosos efectos secundarios, en algunos casos, tan severos que limitan la dosis que puede administrarse y excluyen así el uso de fármacos potencialmente efectivos. La angiogénesis es un evento celular importante en el cual las células endoteliales vasculares proliferan, se acortan y se reorganizan para formar nuevos vasos a partir de redes vasculares preexistentes. La angiogénesis es esencial para el crecimiento de la mayoría de los tumores primarios y su posterior metástasis. El factor de crecimiento celular endotelial vascular (VEGF), que también se denomina VEGF-A o factor de permeabilidad vascular (VPF), se ha descrito como un regulador esencial de la angiogénesis tanto normal como anormal. Ferrara y Davis-Smyth (1997) Endocrine Rev. 18:4-15 25; Ferrara (1999) J. Mol. Med. 77:527-543. El anticuerpo anti-VEGF "Bevacisumab", también conocido como "BV, "rhuMab VEGF" o "Avastin ® " es un anticuerpo monoclonal anti-VEGF humanizado recombinante generado de acuerdo con Presta et al. (1997) Cáncer Res. 57:4593-4599, el cual se encuentra actualmente aprobado en los Estados Unidos para el tratamiento de cáncer colorrectal metastásico, cáncer pulmonar de células no pequeñas y cáncer de mama metastásico. Como otros tratamientos de cáncer, la terapia con Avastin ® se asocia con ciertos efectos colaterales, incluyendo un mayor riesgo de hipertensión. Los polimorfismos genéticos aparecen en una población cuando diferentes alelos en genes particulares dan como resultado diferentes fenotipos. Tales polimorfismos pueden jugar un papel al determinar la eficacia y seguridad de los fármacos terapéuticos. Por ejemplo, los polimorfismos específicos en VEGF han demostrado estar asociados con la incidencia de cáncer de mama. Schneider et al. (2008) Breast Cancer Research and Treatment 111:157-63. Kim, J.K. (2003) Korena Journal of Biological Sciences 7(3) 261-264 investiga la distribución de frecuencia del polimorfismo C936T en la región 3 no traducida del gen de VEGF, que está asociado con los niveles de expresión de VEGF en plasma. Zhu, X et al. (2007) Current Hypertension Reviews 3(2): 149-155 describe que la hipertensión ha surgido como uno de los efectos adversos más importantes de la terapia anti-VEGF. Los mecanismos que subyacen en la hipertensión asociada con anti-VEGF no se entienden. Se han propuesto varios potenciales mecanismos que incluyen la rarefacción vascular, disfunción endotelial, metabolismo alterado de óxido nítrico y neurohormonas aberrantes. WO 2006/086544 y WO 2007/022101 también describen una conexión entre la administración de un antagonista del factor de crecimiento celular endotelial vascular (VEGF) y la hipertensión. La identificación de polimorfismos adicionales predictivos de la eficacia o seguridad de terapias particulares puede utilizarse para diseñar mejores terapias para aquellos pacientes que se beneficiarían mejor de ellas. DESCRIPCIÓN RESUMIDA DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa en parte en la identificación de polimorfismos en VEGF que son predictivos de un mayor riesgo de hipertensión en pacientes que se someten a terapia anti-VEGF, incluyendo con Avastatin ® . En un aspecto, la invención proporciona un método para predecir si un paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF, que comprende cribar una muestra aislada del paciente para un polimorfismo genómico seleccionado a partir de VEGF (-1498C/T) y VEGF (-634G/C), en donde el paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF si el genotipo correspondiente comprende VEGF (-1498C) o VEGF (-634G). En algunas realizaciones, el antagonista de VEGF es un anticuerpo anti-VEGF, por ejemplo, bevacizumab. 2   En algunas realizaciones, el paciente se encuentra tratándose para el cáncer, por ejemplo, cáncer de mama. En algunas realizaciones, el paciente está siendo tratado con una composición anti-neoplásica. También se describe un kit para predecir si un paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF que comprende un primer oligonucleótido y un segundo oligonucleótido específico para un polimorfismo en VEGF seleccionado del grupo que consiste de: VEGF (-1498C/T) y VEGF (-634G/C). En algunas realizaciones, los oligonucleótidos en el kit son útiles para la amplificación de la región de VEGF que comprende uno de estos polimorfismos. También se describe un método para predecir si un paciente tiene una mayor probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de VEGF, que comprende cribar una muestra aislada del paciente para un polimorfismo genómico en VEGF (-2578C/A) o VEGF (-1154G/A), en donde el paciente tiene una mayor probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de VEGF si el genotipo correspondiente comprende VEGF (- 2578AA) o VEGF (1154AA). En algunas realizaciones, el antagonista de VEGF es un anticuerpo anti-VEGF, por ejemplo, bevacizumab. En algunas realizaciones, el tratamiento comprende además administrar una composición anti-neoplásica. En algunas realizaciones, el paciente se encuentra tratándose para el cáncer, por ejemplo, cáncer de mama. También se describe un kit para predecir si un paciente tiene una mayor probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de VEGF que comprende un primer oligonucleótido y un segundo oligonucleótido específico para un polimorfismo en VEGF seleccionado del grupo que consiste de: VEGF (-2578C/A) y VEGF (1154G/A). En algunas realizaciones, los oligonucleótidos en el kit son útiles para la amplificación de la región de VEGF que comprende uno de estos polimorfismos. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS REALIZACIONES PREFERIDAS La práctica de la presente invención empleará, a menos que se indique lo contrario, técnicas convencionales de biología molecular (incluyendo técnicas recombinantes), microbiología, biología celular, bioquimica e inmunología, las cuales se encuentran dentro de la experiencia de la técnica. Dichas técnicas se explican completamente en la literatura, tales como "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", segunda edición (Sambrook et al., 1989); "Oligonucleotide Synthesis" (M.J. Gait, ed., 1984); "Animal Cell Culture" (R.I. Freshney ed., 1987); "Methods in Enzymology" (Academic Press, Inc.); "Current Protocols in Molecular Biology" (F.M. Ausubel et al., eds., 1987 y actualizaciones periódicas); "PCR: The Polymerase Chain Reaction" (Mullis et al., eds., 1994) . A menos que se defina lo contrario, los términos técnicos y científicos utilizados en la presente invención tienen el mismo significado que se entiende habitualmente por un experto en la materia a la cual pertenece esta invención. Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed., J. Wiley & Sons (New York, N.Y. 1994), y March, Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure 4th ed., John Wiley & Sons (New York, N.Y. 1992), proveen al experto en la materia con una guía general para muchos de los términos utilizados en la presente solicitud. DEFINICIONES Como se utiliza en la presente invención, las formas singulares "un" "una" y "el/la" incluyen el plural a menos que el contexto lo indique claramente de otro modo. Por ejemplo "una" célula también incluirá "células". El término "comprende" pretende significar que las composiciones y métodos incluyen los elementos citados, pero no excluye otros. Los términos "VEGF" y "VEGF-A" se utilizan indistintamente para referirse al factor de crecimiento celular endotelial vascular de 165 aminoácidos y los factores de crecimiento celular endotelial vascular relacionados de 121, 189 y 206 aminoácidos, como se describe por Leung et al., Science, 246:1306 (1989) y Houck et al., Mol. Endocrin, - 5:1806 (1991), junto con formas alélicas naturales y procesadas de las mismas. El término "VEGF" también se utiliza para... [Seguir leyendo]

1. Método para predecir si un paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF, que comprende cribar una muestra aislada de dicho paciente para un polimorfismo genómico en VEGF (-1498C/T), donde el paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF si el genotipo correspondiente comprende VEGF (-1498C). 2. Método para predecir si un paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF, que comprende cribar una muestra aislada de dicho paciente para un polimorfismo genómico en VEGF (-634G/C), donde el paciente se encuentra con un mayor riesgo de hipertensión asociada con el tratamiento con un antagonista de VEGF si el genotipo correspondiente comprende VEGF (-634G). 3. Método según la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho antagonista de VEGF es un anticuerpo anti-VEGF. 4. Método según la reivindicación 3, en el que dicho anticuerpo anti-VEGF es bevacizumab. 5. Método según la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho paciente está tratándose para el cáncer con un antagonista de VEGF. 6. Método según la reivindicación 5, en el que dicho paciente está tratándose además con una composición antineoplásica. 7. Método según la reivindicación 5, en el que dicho cáncer es cáncer de mama. 8. Método según la reivindicación 5, en el que dicho antagonista de VEGF es un anticuerpo anti-VEGF. 9. Método según la reivindicación 8, en el que dicho anticuerpo anti-VEGF es bevacizumab. 10. Método según la reivindicación 8, en el que dicho paciente está tratándose además con una composición antineoplásica. 13