POLI(BETA-AMINO-ÉSTERES) BIODEGRADABLES Y USOS DE LOS MISMOS.

Un poli(beta-amino-éster) preparado a partir de un bis(éster de acrilato) y una amina,

en el que la amina se selecciona del grupo que consiste en las fórmulas 6-94: y sus derivados y sales

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E07013193.

Solicitante: MASSACHUSETTS INSTITUTE OF TECHNOLOGY (MIT).

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 5 CAMBRIDGE CENTRE CAMBRIDGE MA 02142-1493 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: LANGER, ROBERT, LYNN,DAVID,M, ANDERSON,DANIEL,G, AKINC,AKIN.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 26 de Mayo de 2004.

Fecha Concesión Europea: 28 de Julio de 2010.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K47/48K6
  • A61K47/48R2T
  • A61K9/51H6B
  • B82Y5/00 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B82 NANOTECNOLOGIA.B82Y USOS O APLICACIONES ESPECIFICOS DE NANOESTRUCTURAS; MEDIDA O ANALISIS DE NANOESTRUCTURAS; FABRICACION O TRATAMIENTO DE NANOESTRUCTURAS.Nano- biotecnología o nano-medicina, p. ej. ingeniería de proteínas o administración de fármaco.
  • C08G63/40 QUIMICA; METALURGIA.C08 COMPUESTOS MACROMOLECULARES ORGANICOS; SU PREPARACION O PRODUCCION QUIMICA; COMPOSICIONES BASADAS EN COMPUESTOS MACROMOLECULARES.C08G COMPUESTOS MACROMOLECULARES OBTENIDOS POR REACCIONES DISTINTAS A AQUELLAS EN LAS QUE INTERVIENEN SOLAMENTE ENLACES INSATURADOS CARBONO - CARBONO (procesos de fermentación o procesos que utilizan enzimas para sintetizar un compuesto dado o una composición dada o para la separación de isómeros ópticos a partir de una mezcla racémica C12P). › C08G 63/00 Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones que forman un enlace éster carboxílico en la cadena principal de la macromolécula (poliesteramidas C08G 69/44; poliesterimidas C08G 73/16). › Poliésteres obtenidos a partir de derivados, formadores de ésteres, de ácidos policarboxílicos o de compuestos polihidroxi que forman ésteres, diferentes de sus ésteres.
  • C08G63/685D2
  • C08G69/44 C08G […] › C08G 69/00 Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones que forman un enlace amidocarboxílico en la cadena principal de la macromolécula (polihidrazidas C08G 73/08; poliamido-ácidos C08G 73/10; poliamida-imidas C08G 73/14). › Poliesteramidas.
  • C08G73/02 C08G […] › C08G 73/00 Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones que forman un enlace que contiene nitrógeno con o sin oxígeno o carbono en la cadena principal de la macromolécula, no previstos por los grupos C08G 12/00 - C08G 71/00. › Poliaminas (que contienen menos de once unidades monómeras C07C).
  • C08G73/02Q
  • C08G73/06 C08G 73/00 […] › Policondensados que tienen ciclos heterocíclicos que contienen nitrógeno en la cadena principal de la macromolécula; Polihidrazidas; Poliamido-ácidos o precursores similares de poliimidas.
  • C08G73/06C1
  • C08G73/06C2
  • C08L67/02 C08 […] › C08L COMPOSICIONES DE COMPUESTOS MACROMOLECULARES (composiciones basadas en monómeros polimerizables C08F, C08G; pinturas, tintas, barnices, colorantes, pulimentos, adhesivos D01F; filamentos o fibras artificiales D06). › C08L 67/00 Composiciones de poliésteres obtenidos por reacciones que forman un éster carboxílico unido en la cadena principal (de poliéster-amidas C08L 77/12; de poliéster-imidas C08L 79/08 ); Composiciones de los derivados de tales polímeros. › Poliésteres derivados de ácidos dicarboxílicos y compuestos dihidroxi (C08L 67/06 tiene prioridad).
  • C12N15/88 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › utilizando la micro-encapsulación, p. ej. utilizando vesículas liposómicas.

Clasificación PCT:

  • A61K9/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales caracterizadas por un aspecto particular.
  • C08G73/00 C08G […] › Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones que forman un enlace que contiene nitrógeno con o sin oxígeno o carbono en la cadena principal de la macromolécula, no previstos por los grupos C08G 12/00 - C08G 71/00.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre.

POLI(BETA-AMINO-ÉSTERES) BIODEGRADABLES Y USOS DE LOS MISMOS.

Fragmento de la descripción:

Poli(β-amino-ésteres) biodegradables y usos de los mismos.

Apoyo gubernamental

El trabajo descrito en el presente documento fue apoyado, en parte, por subvenciones de la National Science Foundation (acuerdo cooperativo nº ECC9843342 con el MIT Biotechnology Process Engineering Center), los National Institutes of Health (GM26698; NRSA beca de investigación nº 1 F32 GM20227-01), y el Department of the Army (acuerdo cooperativo nº DAMD 17-99-2-9-001 con el Center for Innovative Minimally Invasive Therapy). El gobierno de los Estados Unidos puede tener ciertos derechos en la invención.

Antecedentes de la invención

El tratamiento de enfermedades humanas a través de la aplicación de fármacos a base de nucleótidos tales como ADN y ARN tiene el potencial para revolucionar el campo médico (Anderson Nature 392 (supl.):25-30, 1996; Friedman Nature Med. 2:144-147, 1996; Crystal Science 270:404-410, 1995; Mulligan Science 260:926-932, 1993). Hasta ahora, el uso de virus modificados como vectores de transferencia génica ha representado generalmente el enfoque clínicamente más satisfactorio para la terapia génica. Aunque los vectores virales son actualmente los agentes de transferencia génica más eficaces, problemas referentes a la seguridad global de los vectores virales, que incluyen el potencial para respuestas inmunitarias no buscadas, han dado como resultado esfuerzos paralelos para desarrollar alternativas no virales (para referencias destacadas, véase: Luo y otros, Nat. Biotechnol. 18:33-37, 2000; Behr Acc. Chem. Res. 26:274-278, 1993).

Las alternativas actuales a los vectores virales incluyen sistemas de administración poliméricos (Zauner y otros, Adv. Drug Del. Rev. 30:97-113, 1998; Kabanov y otros, Bioconjugate Chem. 6:7-20, 1995), formulaciones liposómicas (Miller Angew. Chem. Int. Ed. 37:1768-1785, 1998; Hope y otros, Molecular Membrane Technology 15:1-14, 1998; Deshmukh y otros, New J. Chem. 21:113-124, 1997), y protocolos de inyección de ADN "desnudo" (Sanford Trends Biotechnol. 6:288-302, 1988).

Aunque estas estrategias tienen que conseguir aún la eficacia clínica de los vectores virales, la seguridad potencial, el procesamiento y los beneficios económicos ofrecidos por estos métodos (Anderson Nature 392 (supl.):25-30, 1996) han avivado el interés en el desarrollo continuado de enfoques no virales para la terapia génica (Boussif y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:7297-7301, 1995; Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999; Lim y otros, J Am. Chem. Soc. 121: 5633-5639, 1999; Gonzalez y otros, Bioconjugate Chem. 10:1068-1074, 1999; Kukowska-Latallo y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:4897-4902, 1996; Tang y otros, Bioconjugate Chem. 7:703-714, 1996; Haensler y otros, Bioconjugate Chem. 4:372-379, 1993).

Se han usado ampliamente polímeros catiónicos como vectores de transfección debido a la facilidad con la que condensan y protegen hebras de ADN cargadas negativamente. Los polímeros que contienen amina tales como poli(lisina) (Zauner y otros, Adv. Drug Del. Rev. 30:97-113, 1998; Kabanov y otros, Bioconjugate Chem. 6.-7-20, 1995), poli(etilenimina) (PEI) (Boussif y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:7297-7301, 1995) y dendrímeros de poli(amidoamina) (Kukowska-Latallo y otros, Proc. Natl. Acad Sci. USA 93: 4897-4902, 1996; Tang y otros, Bioconjugate Chem. 7:703-714, 1996; Haensler y otros, Bioconjugate Chem. 4:372-379, 1993) están cargados positivamente a pH fisiológico, forman pares iónicos con ácidos nucleicos y median la transfección en una variedad de líneas celulares. Sin embargo, a pesar de su uso común, los polímeros catiónicos tales como poli(lisina) y PEI pueden ser significativamente citotóxicos (Zauner y otros, Adv. Drug Del. Rev. 30:97-113, 1998; Deshmukh y otros, New J. Chem. 21;113-124, 1997; Choksakulnimitr y otros, Controlled Release 34:233-241, 1995; Brazeau y otros, Pharm. Res. 15:680-684, 1998). Como resultado, la elección de un polímero catiónico para una aplicación de transferencia génica requiere generalmente un equilibrio entre eficiencia de transfección y citotoxicidad a corto y largo plazo. Adicionalmente, la biocompatibilidad a largo plazo de estos polímeros sigue siendo una cuestión importante para su uso en aplicaciones terapéuticas in vivo, puesto que varios de estos polímeros no son fácilmente biodegradables (Uhrich Trends Polim. Sci. 5:388-393, 1997; Roberts y otros, J. Biomed. Mater. Res. 30:53-65, 1996).

Con el fin de desarrollar alternativas seguras a los vectores poliméricos existentes y otros biomateriales funcionalizados, se han desarrollado poliésteres degradables que portan cadenas laterales catiónicas (Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999; Barrera y otros, J. Am. Chem. Soc. 115:11010-11011, 1993; Kwon y otros, Macromolecules 22:3250-3255, 1989; Lim y otros, J. Am. Chem. Soc. 121:5633-5639, 1999; Zhou y otros, Macromolecules 23:3399-3406, 1990). Los ejemplos de estos polímeros incluyen poli(L-lactida-co-L-lisina) (Barrera y otros, J. Am. Chem. Soc. 115:11010-11011, 1993), poli(éster de serina) (Zhou y otros, Macromolecules 23:3399-3406, 1990), poli(éster de 4-hidroxi-L-prolina) (Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999; Lim y otros, J. Am. Chem. Soc. 121:5633-5639, 1999) y, más recientemente, poli[ácido α-(4-aminobutil)-L-glicólico]. Recientemente se demostró que el poli(éster de 4-hidroxi-L-prolina) y el poli[ácido α-(4-aminobutil)-L-glicólico] condensaban el ADN de plásmido a través de interacciones electrostáticas, y que mediaban la transferencia génica (Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999; Lim y otros, J. Am. Chem. Soc. 121:S633-5639, 1999). De manera importante, estos nuevos polímeros son significativamente menos tóxicos que la poli(lisina) y PEI, y se degradan dando metabolitos no tóxicos. Queda claro a partir de estas investigaciones que el diseño racional de poliésteres que contienen amina puede ser una vía productiva para el desarrollo de vectores de transfección eficaces y seguros. Sin embargo, desafortunadamente, las presentes síntesis de estos polímeros requieren o bien la preparación independiente de monómeros especializados (Barrera y otros, J, Am. Chem. Soc. 115:11010-11011, 1993), o bien el uso de cantidades estequiométricas de agentes de acoplamiento caros (Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999). Adicionalmente, las funcionalidades amina en los monómeros deben protegerse antes de la polimerización (Putnam y otros, Macromolecules 32:3658-3662, 1999; Lim y otros, J. Am. Chem. Soc. 121;5633-5639, 1999; Gonzalez y otros, Bioconjugate Chem. 10:1068-1074, 1999; Barrera y otros, J. Am. Chem. Soc. 115:11010-11011, 1993; Kwon y otros, Macromolecules 22:3250-3255, 1989), necesitándose etapas de desprotección tras la polimerización adicionales antes de que los polímeros puedan usarse como agentes de transfección.

Existe una necesidad continua de polímeros no tóxicos, biodegradables, biocompatibles que puedan usarse para transfectar ácidos nucleicos y que se preparen fácilmente de manera económica y eficaz. Tales polímeros tendrían varios usos, incluyendo la administración de ácidos nucleicos en la terapia génica así como en el empaquetamiento y/o administración de agentes de diagnóstico, terapéuticos y profilácticos.

Sumario de la invención

La presente invención es tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.

La presente invención proporciona polímeros útiles en la preparación de dispositivos de administración de fármacos y composiciones farmacéuticas de los mismos. La invención también proporciona métodos de preparación de los polímeros y métodos de preparación de microesferas y otras composiciones farmacéuticas que contienen los polímeros de la invención.

Los polímeros de la presente invención son poli(β-amino-ésteres) y sales y derivados de los mismos. Los polímeros preferidos son biodegradables y biocompatibles. Normalmente, los polímeros tienen una o más aminas terciarias en la estructura principal del polímero. Los polímeros preferidos tienen una o dos aminas terciarias por unidad de repetición de la estructura principal. Los polímeros también pueden ser copolímeros en los que uno de los componentes es un poli(β-amino-éster). Los polímeros de la invención pueden prepararse fácilmente condensando bis(aminas secundarias) o aminas primarias con bis(ésteres de acrilato).

Un polímero de la presente invención se prepara a partir de un bis(éster de acrilato) y una amina, seleccionándose la amina del grupo que consiste en las fórmulas...

 


Reivindicaciones:

1. Un poli(beta-amino-éster) preparado a partir de un bis(éster de acrilato) y una amina, en el que la amina se selecciona del grupo que consiste en las fórmulas 6-94:



y sus derivados y sales.

2. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


3. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


4. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


5. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


6. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


7. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


8. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


9. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


10. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que la amina es de fórmula:


11. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, en el que el acrilato es de fórmula A-PP:


12. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, en el que el bis(éster de acrilato) es de fórmula:


13. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, en el que el bis(éster de acrilato) es de fórmula:


14. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, en el que el bis(éster de acrilato) es de fórmula:


15. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, en el que el bis(éster de acrilato) es de fórmula:


16. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, en el que el poli(beta-amino-éster) se selecciona del grupo que consiste en: C86, D60, D61, U94, LL6, C94, F94, JJ94, JJ86, C86, U86, E86, B17, D70, U87, D87, C94, D86, F86, AA94, AA60, A61, D94, U94, E94, B17, M17 y AA61.

17. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, de fórmula:


en el que n es un número entero entre 3 y 10.000; y sus derivados y sales.

18. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, de fórmula:


en el que n es un número entero entre 3 y 10.000; y sus derivados y sales.

19. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 11, de fórmula:


en el que n es un número entero entre 3 y 10.000; y sus derivados y sales.

20. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, de fórmula:


preparado por adición conjugada de una amina primaria


a un bis(éster de acrilato)


en el que la amina primaria es de fórmula:


en donde:

R1 se proporciona mediante las aminas primarias 6, 7, 16, 17, 18, 37, 38, 39, 41, 47, 51, 72, 73, 74, 76, 77, 83, 84, 86, 87, 88, 89, 92 ó 94;

B es una cadena de átomos de carbono o heteroátomos ramificada o no ramificada, sustituida o no sustituida en la que los sustituyentes incluyen hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, amino, alquilamino, dialquilamino, trialquilamino, hidroxilo, alcoxilo, halógeno, arilo, grupo heterocíclico, grupo heterocíclico aromático, ciano, amida, carbamoílo, ácido carboxílico, éster, tioéter, alquiltioéter, tiol, arilo, acetilo y ureido;

n es un número entero que corresponde a un polímero con un peso molecular que oscila desde 1000 g/mol hasta 20.000 g/mol y derivados y sales del mismo.

21. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 20, en el que la amina es de fórmula:


22. El poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1, de fórmula


preparado por adición conjugada de una bis(amina secundaria)


a un bis(éster de acrilato)


en el que la bis(amina secundaria) es de fórmula:



en donde:

R1, R2 y A se proporcionan mediante la bis(amina secundaria) 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 ó 71;

cuando la bis(amina secundaria) es 70 ó 71, R1 y R2 están unidos formando una estructura cíclica con A;

B es una cadena de átomos de carbono o heteroátomos ramificada o no ramificada, sustituida o no sustituida en la que los sustituyentes incluyen hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, amino, alquilamino, dialquilamino, trialquilamino, hidroxilo, alcoxilo, halógeno, arilo, grupo heterocíclico, grupo heterocíclico aromático, ciano, amida, carbamoílo, ácido carboxílico, éster, tioéter, alquiltioéter, tiol, arilo, acetilo y ureido;

n es un número entero que corresponde a un polímero con un peso molecular que oscila desde 1000 g/mol hasta 20.000 g/mol y derivados y sales del mismo.

23. El poli(beta-amino-éster) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, en el que el polímero está terminado en amina.

24. El poli(beta-amino-éster) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, en el que el polímero está terminado en acrilato.

25. Una composición que comprende:

un poli(beta-amino-éster) según la reivindicación 1,

un polinucleótido, y

un agente co-complejante seleccionado del grupo que consiste en polímeros catiónicos, proteínas catiónicas, PLGA, espermina, espermidina, poliaminas, polietilenimina (PEI) y polilisina (PLL).

26. La composición según la reivindicación 25, en la que la razón de agente co-complejante con respecto a polinucleótido oscila desde 0,1 hasta 1,2 (p/p/p).

27. La composición según la reivindicación 25, en la que la razón de poli(beta-amino-éster) con respecto a polinucleótido oscila desde 10 hasta 120.

28. Un método de síntesis de un poli(β-amino-éster) según la reivindicación 1, comprendiendo el método las etapas de:

proporcionar una amina primaria o bis(amina secundaria) seleccionada del grupo que consiste en las fórmulas 6, 7, 16-18, 37-39, 41, 47, 51, 60-74, 76, 77, 83, 84, 86-89, 92 y 94 según la reivindicación 1;

proporcionar un bis(éster de acrilato); y

hacer reaccionar la amina y el bis(éster de acrilato) en condiciones adecuadas para formar el poli(β-amino-éster).

29. El método según la reivindicación 28, en el que la amina es de fórmula:


30. El método según la reivindicación 28, que comprende además la etapa de examinar el polímero para determinar una característica deseada, en el que el poli(β-amino-éster) no se precipita, purifica ni aísla antes de la etapa de examinar.

31. El método según la reivindicación 28, en el que la etapa de hacer reaccionar comprende la reacción de la amina y el bis(éster de acrilato) en un disolvente orgánico.

32. El método según la reivindicación 28, en el que la etapa de hacer reaccionar comprende la reacción de la amina y el bis(éster de acrilato) en ausencia de un disolvente.

33. El método según la reivindicación 28, en el que el disolvente orgánico se selecciona del grupo que consiste en THF, dietil éter, glima, hexanos, metanol, etanol, isopropanol, cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, dimetilformamida, acetonitrilo, benceno, DMSO y tolueno.

34. El método según la reivindicación 28, en el que el disolvente orgánico es DMSO.

35. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración de la amina es de entre aproximadamente 0,01 M y 5 M.

36. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración de la amina es de entre aproximadamente 0,1 M y 2 M.

37. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración de la amina es de entre aproximadamente 1 M y 2 M.

38. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración del bis(éster de acrilato) es de entre aproximadamente 0,01 M y 5 M.

39. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración del bis(éster de acrilato) es de entre aproximadamente 0,1 M y 2 M.

40. El método según la reivindicación 28, en el que la concentración del bis(éster de acrilato) es de entre aproximadamente 1 M y 2 M.

41. El método según la reivindicación 28, en el que la etapa de hacer reaccionar comprende la reacción de la amina y el bis(éster de acrilato) a una temperatura de entre 0 y 75ºC.

42. El método según la reivindicación 28, en el que la etapa de hacer reaccionar comprende la reacción de la amina y el bis(éster de acrilato) a una temperatura de entre 20 y 50ºC.

43. El método según la reivindicación 28, en el que la etapa de hacer reaccionar comprende la reacción de la amina y el bis(éster de acrilato) a una temperatura de entre 30 y 60ºC.

44. Un método de encapsulación de un agente en una matriz de poli(β-amino-ésteres) para formar micropartículas, comprendiendo el método las etapas de:

proporcionar un agente;

proporcionar un poli(β-amino-éster) según la reivindicación 1; y

poner en contacto el agente y el poli(β-amino-éster) en condiciones adecuadas para formar micropartículas.

45. El método según la reivindicación 44, en el que el agente es un polinucleótido.

46. El método según la reivindicación 45, en el que el polinucleótido es ADN.

47. El método según la reivindicación 45, en el que el polinucleótido es ARN.

48. El método según la reivindicación 44, en el que el agente es una molécula pequeña.

49. El método según la reivindicación 44, en el que el agente es una proteína.

50. El método según la reivindicación 44, en el que la etapa de poner en contacto comprende secar por pulverización una mezcla del agente y el poli(β-amino-éster).

51. El método según la reivindicación 44, en el que la etapa de poner en contacto comprende técnicas doble emulsión - evaporación del disolvente.

52. El método según la reivindicación 44, en el que la etapa de poner en contacto comprende una técnica de inversión de fases.

53. Un método de examinar una biblioteca de polímeros, comprendiendo el método las etapas de:

proporcionar una pluralidad de polímeros, siendo los polímeros poli(beta-amino-ésteres) según la reivindicación 1; y

examinar los polímeros para determinar una propiedad deseada útil en terapia génica.

54. El método según la reivindicación 53, en el que la etapa de proporcionar comprende sintetizar los polímeros en paralelo.

55. El método según la reivindicación 54, en el que la etapa de sintetizar comprende sintetizar los polímeros en DMSO.

56. El método según la reivindicación 54, en el que la etapa de sintetizar no incluye precipitar, purificar ni aislar el polímero antes de la etapa de examinar.

57. El método según la reivindicación 53, en el que la pluralidad de poli(beta-amino-ésteres) comprende al menos 500 poli(beta-amino-ésteres).

58. El método según la reivindicación 53, en el que la pluralidad de poli(beta-amino-ésteres) comprende al menos 1000 poli(beta-amino-ésteres).

59. El método según la reivindicación 53, en el que la pluralidad de poli(beta-amino-ésteres) comprende al menos 1500 poli(beta-amino-ésteres).

60. El método según la reivindicación 53, en el que la pluralidad de poli(beta-amino-ésteres) comprende al menos 2000 poli(beta-amino-ésteres).

61. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es una capacidad para unirse a un polinucleótido.

62. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es solubilidad en una disolución acuosa.

63. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es solubilidad en una disolución acuosa a un pH inferior a 7.

64. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es solubilidad en una disolución acuosa a pH 5 y no ser soluble en una disolución acuosa a pH 7.

65. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es la capacidad para unirse a heparina.

66. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es la capacidad para aumentar la eficiencia de transfección.

67. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es útil en la ingeniería de tejidos.

68. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es la capacidad para ayudar al crecimiento celular.

69. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es la capacidad para ayudar a la unión celular.

70. El método según la reivindicación 53, en el que la propiedad deseada es la capacidad para ayudar al crecimiento tisular.

71. Un método de examinar una colección de poli(beta-amino-ésteres), comprendiendo el método las etapas de:

proporcionar una pluralidad de poli(beta-amino-ésteres) según la reivindicación 1;

proporcionar un polinucleótido que incluye un gen indicador;

proporcionar células;

poner en contacto cada uno de los polímeros con el polinucleótido dando como resultado una mezcla de polinucleótido:polímero;

poner en contacto las células con la mezcla de polinucleótido:polímero; y

determinar si las células expresan el gen indicador.

72. El método según la reivindicación 71, en el que la etapa de proporcionar una pluralidad de polímeros comprende sintetizar los polímeros en paralelo.

73. El método según la reivindicación 71, en el que la pluralidad de polímeros comprende al menos 500 polímeros diferentes.

74. El método según la reivindicación 71, en el que la pluralidad de polímeros comprende al menos 1000 polímeros diferentes.

75. El método según la reivindicación 71, en el que el gen indicador codifica para la proteína fluorescente verde.

76. El método según la reivindicación 71, en el que las células son células de mamífero.

77. El método según la reivindicación 71, en el que las células son células bacterianas.

78. El método según la reivindicación 71, en el que las células son células COS-7.

79. El método según la reivindicación 71, en el que la razón de polímero con respecto a polinucleótido es de 10:1, 15:1, 20:1, 25:1, 30:1, 35:1, 40:1, 45:1, 50:1, 55:1, 60:1, 65:1, 70:1, 75:1, 80:1, 85:1, 90:1, 95:1, 100:1, 105:1, 110:1, 120:1, 130:1, 140:1, 150:1 y 200:1.

80. El método según la reivindicación 71, en el que la etapa de determinar comprende cuantificar la cantidad de expresión del gen indicador.


 

Patentes similares o relacionadas:

Nanopartículas estabilizadas con composiciones de ácido nitrofenilborónico, del 15 de Julio de 2020, de CALIFORNIA INSTITUTE OF TECHNOLOGY: Una nanopartícula que comprende un polímero que contiene un poliol y un polímero que contiene un ácido nitrofenilborónico, en donde el polímero que contiene […]

Composiciones y métodos para la administración de ácidos nucleicos a base de nanopolímeros, del 23 de Octubre de 2019, de MARINE POLYMER TECHNOLOGIES, INC.: Una composición de nanopartícula de poli-N-acetilglucosamina/ácido nucleico para uso en un método para tratar o prevenir el cáncer, una enfermedad […]

Moléculas de ARN protegidas y no protegidas y copolímeros de bloques para la administración intracelular de ARN, del 11 de Septiembre de 2019, de INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE (INSERM): Un copolímero de bloques anfifílico no iónico tetrafuncional, para uso en un método para el suministro intracelular de un ARNm protegido o no protegido […]

Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos, del 7 de Agosto de 2019, de THE UNIVERSITY OF BRITISH COLUMBIA: Una partícula de lípido que comprende un primer lípido catiónico, un segundo lípido catiónico, un lípido neutro, y un lípido PEG capaz de reducir la agregación; en donde […]

Inmovilización reversible y/o liberación controlada de ácidos nucleicos contenidos en nanopartículas mediante revestimientos poliméricos (biodegradables), del 11 de Julio de 2019, de CureVac AG: Nanopartículas que comprenden o consisten en un complejo de un ácido nucleico, que es ADN o ARN, y una molécula portadora polimérica de fórmula genérica (I): […]

Suministro de genes mediado por nanopartículas, edición genómica y modificación que fija como objetivo ligandos en diversas poblaciones de células, del 8 de Julio de 2019, de RENSSELAER POLYTECHNIC INSTITUTE: Una nanopartícula, que comprende: un poliplexo de núcleo y un recubrimiento de sílice sobre el mismo, en donde dicho poliplexo de núcleo comprende: uno o más polímeros […]

Administración de ARN autorreplicante utilizando partículas de polímeros biodegradables, del 8 de Mayo de 2019, de GLAXOSMITHKLINE BIOLOGICALS SA: Una composición inmunogénica que comprende (a) nanopartículas cargadas positivamente que comprenden un polímero biodegradable y un tensioactivo catiónico, en la que el polímero […]

Método de transfección de células, del 14 de Marzo de 2019, de COMMONWEALTH SCIENTIFIC AND INDUSTRIAL RESEARCH ORGANISATION: Un método para producir un ave que comprende células germinales modificadas genéticamente, método que comprende: (i) inyectar una mezcla de transfección que […]

Utilizamos cookies para mejorar nuestros servicios y mostrarle publicidad relevante. Si continua navegando, consideramos que acepta su uso. Puede obtener más información aquí. .