Nueva composición para el control del crecimiento tumoral.

Composición farmacéutica que comprende al menos un desmetilante y al menos un agonista de la dopamina;

en donde el al menos un desmetilante se selecciona del grupo que consiste en 5-aza-2'-desoxicitidina (DAC,decitabina), 5-azacitidina (5-azaC), arabinosil-5-azacitosina (fazarabina) y dihidro-5-azacitidina (DHAC); y el almenos un agonista de la dopamina se selecciona del grupo que consiste en amantadina, bromocriptina, cabergolina,quinagolida, lisurida, pergolida, ropinirol, pramiprexol, rasagilina, BIM23A387, BIM-23A758, BIM-23A760, BIM-232A761 y BIM-23A765.

Nueva composición para el control del crecimiento tumoral

La invención se refiere al campo del cáncer, más específicamente al tratamiento de los tumores, más específicamente al tratamiento de los tumores que expresan una somatostatina y/o un receptor de dopamina.

En la células de los mamíferos, aproximadamente del 35 al 5% de los restos de citosina del ADN genómico están presentes como 5-metilcitosina (Ehrlich et al., 1982, Nucl. Acids Res. 10: 2709-2721) . Esta modificación de la citosina tiene lugar después de la replicación del ADN y está catalizada por la ADN metiltransferasa con la Sadenosil-metionina de donante del metilo. De aproximadamente el 70 al 80% de los restos de 5-metilcitosina se encuentran en la secuencia CpG (Bird, 1986, Nature 321: 209-213) . Esta secuencia, cuando se encuentra con alta frecuencia en el genoma, se denomina islotes CpG. Los islotes CpG sin metilar están asociados a genes de mantenimiento, mientras que los islotes de muchos genes específicos de tejido están metilados, excepto en el tejido en el que se expresan (Yevin y Razin, 1993, en «DNA Methylation: Molecular Biology and Biological Significance». Birkhauer Verlag, Basilea, págs. 523-568) . Se ha propuesto que esta metilación del ADN desempeña una función importante durante el desarrollo embrionario a la hora de controlar la expresión de diferentes genes en las células eucariotas. En concordancia con esta hipótesis, se ha hallado que la inhibición de la metilación del ADN induce la diferenciación de las células de los mamíferos (Jones y Taylor, 1980, Cell 20: 85-93) .

La metilación del ADN en la región reguladora de un gen puede inhibir la transcripción del gen. Probablemente, esto está ocasionado por la intrusión de la 5-metilcitosina en el surco mayor de la hélice del ADN, lo que interfiere con la fijación de los factores de transcripción.

Cuando se compara un cáncer con el tejido normal, aparecen con frecuencia tres cambios principales en la metilación del ADN. En primer lugar, las células cancerosas muestran un genoma muy hipometilado, lo que se ha asociado con inestabilidades cromosómicas (Eden et al., 2003, Science 300: 455; Gaudet et al., 2003, Science 300: 489-492) , así como la activación de los elementos del ADN repetitivo que suelen estar silenciados (Walsh et al., 1998, Nat. Genet. 20, 116-117) .

En segundo lugar, se puede producir la metilación de novo de los islotes CpG a lo largo del desarrollo tumoral. Se estima que en los tumores hay de media 600 islotes CpG metilados de manera aberrante en comparación con el tejido normal, aunque esto puede variar enormemente entre tipos tumorales y dentro de subtipos histopatológicos concretos. Además, la metilación no se produce de manera aleatoria, ya que hay islotes CpG que están metilados en muchos tipos de tumores, mientras que otros islotes CpG están metilados únicamente en determinados tipos de tumores (Costello, J. F, et al, 2000, Nat. Genet. 24: 132-138; Esteller, M., Herman, J. G., 2002, J. Pathol. 196: 1-7) . Esto concuerda con un modelo en el cual la metilación de los islotes CpG en determinados genes daría a la célula cancerosa una ventaja de crecimiento o de supervivencia y, por tanto, los patrones de metilación emergen según la presión selectiva para el silenciamiento del gen en el tipo de tumor examinado.

En tercer lugar, la citosina metilada en el ADN, la 5-metilcitosina, puede sufrir la desaminación espontánea para formar timina a una velocidad mucho más alta que la desaminación de la citosina en uracilo (Shen et al., 1994, Nucl. Acids Res. 22: 972-976) . Si no se repara la desaminación de la 5-metilcitosina, dará lugar a una mutación por transición de C a T. Esto se puede encontrar en la región codificante, pero muchos genes supresores de tumores también pueden estar inactivados por la metilación aberrante de los islotes CpG de su región promotora. No están claros los mecanismos moleculares mediante los cuales tiene lugar la metilación aberrante del ADN durante la carcinogenia. Es posible que la ADN metiltransferasa se equivoque al metilar los islotes CpG de la hebra naciente del ADN cuando no hay CpG complementario en la hebra madre. También es posible que la metilación aberrante se pueda deber a la retirada de las proteínas que se fijan a CpG para impedir la metilación de estos sitios. Sea cual sea el mecanismo, la frecuencia de metilación aberrante es un fenómeno raro en las células normales de los mamíferos.

Basándose en lo anterior, se ha propuesto que los compuestos que inhiben la metilación, tales como los derivados de la 2'-desoxicitidina (5-aza-2'-desoxicitidina (DAC, decitabina) , 5-azacitidina (5-azaC) , arabinosil-5-azacitosina (fazarabina) y dihidro-5-azacitidina (DHAC) ) , tienen propiedades antitumorales, ya que pueden activar la expresión de genes silenciados epigenéticamente, entre ellos los genes supresores de tumores. Además, estos desmetilantes pueden restaurar la sensibilidad a una serie de quimioterápicos, entre ellos cisplatino, epirrubicina y temolozomida (Plumb, J. A. et al., 2000, Cancer Res. 60: 6039-6044; Strathdee, G. et al., 1999, Oncogene 18: 2335-2341) . Al igual que otros muchos tratamientos nuevos que actualmente se han desarrollado contra dianas específicas, se prevé que los desmetilantes inhiban el crecimiento tumoral por la reversión específica de la represión del supresor tumoral y los genes del ciclo celular que están metilados de manera aberrante en las células tumorales y, por lo tanto, tienen menos efectos secundarios que la quimioterapia convencional inespecífica (Issa, J. P., 2003, Curr. Opin. Oncol. 15: 446-451) . Se ha descrito in vitro e in vivo la citotoxicidad sinérgica de la decitabina y de una amplia gama de agentes citotóxicos clínicamente importantes, entre ellos amsacrina, cisplatino, carboplatino, ciclofosfamida, citarabina, daunorrubicina, epirrubicina, idaurrubicina, interferón α, ácido retinoico, topotecán y temozolomida (Frost, P. et al., 1990, Cancer Res. 50: 4572-4577; Kritz et al., 1996, Am. J. Hematol. 51 (2) : resumen; Colombo et al., 1986 Cancer Treat. Rep. 70 (12) : resumen; Momparler, R. L. et al., 1990, Cancer Lett. 54: 21-28; Anzai et al., 1992, Cancer Res. 52 (8) : resumen; Dore et al., 1992, Anticancer Drugs 3 (3) : resumen; Schwartsmann et al., 1997, Leukemia 11 (Supl.

1) : resumen; Willemze et al., 1997, Leukemia 11 (Supl. 1) : resumen; Plumb et al., véase más arriba) . En Rubinfeld, J. et al. (patente internacional WO 2002/067681) se ha reivindicado una politerapia con desmetilantes y todas las sustancias farmacéuticas antitumorales conocidas, pero no ha sido demostrado.

El silenciamiento epigenético también se puede inhibir mediante el bloqueo de las histona desacetilasas (HDAC) a través de los inhibidores de la desacetilación de las histonas (inhibidores de las HDAC) . A continuación de la metilación de los restos de citosina en el ADN, como se describió anteriormente, la retirada de los grupos acetilo es un mecanismo clave para el silenciamiento génico.

El depósito de histonas a lo largo del ciclo celular mediante un procedimiento independiente de la replicación implica que se desmontan los nucleosomas que ya existían, y que se han liberado sus histonas. Se sabe que el proceso de la transcripción da lugar a un desplegamiento local de la fibra de cromatina y a una configuración «abierta» de la cromatina. Aunque la transcripción de las plantillas nucleosómicas con las polimerasas bacterianas se puede producir in vitro sin desplazar los octámeros de histonas del ADN, los ensayos in vivo demostraron que en los núcleos eucariotas hay una cantidad medible de desplazamiento de histonas dependiente de la transcripción. De hecho, incluso in vitro, la ARN polimerasa II es virtualmente incapaz de transcribir el ADN nucleosómico en las condiciones fisiológicas. La transcripción requiere que los contactos entre las histonas y el ADN se rompan para que la polimerasa recorra el ADN nucleosómico. Aunque la transcripción se puede producir sin el desplazamiento de las histonas si el octámero de histonas libera algunos de sus contactos con el ADN y mantiene otros, todos los contactos se tendrían que liberar con cierta frecuencia. A continuación, simplemente se disminuiría el octámero de histonas. Aún más, a medida que actúan los factores de remodelación localizados, alterarían la estructura del nucleosoma. Las observaciones in vitro e in vivo se pueden reconciliar si el desplazamiento de las histonas se produce de vez en cuando a medida que se desmontan los nucleosomas. Las restricciones de los nucleosomas en una fibra compactada de cromatina (a saber, cromatina «cerrada») limitarían el desplazamiento de las histonas.

La hipoacetilación, en concreto de las histonas H3... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica que comprende al menos un desmetilante y al menos un agonista de la dopamina;

en donde el al menos un desmetilante se selecciona del grupo que consiste en 5-aza-2'-desoxicitidina (DAC, decitabina) , 5-azacitidina (5-azaC) , arabinosil-5-azacitosina (fazarabina) y dihidro-5-azacitidina (DHAC) ; y el al menos un agonista de la dopamina se selecciona del grupo que consiste en amantadina, bromocriptina, cabergolina, quinagolida, lisurida, pergolida, ropinirol, pramiprexol, rasagilina, BIM23A387, BIM-23A758, BIM-23A760, BIM232A761 y BIM-23A765.

2. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicha composición comprende adicionalmente al menos un inhibidor de las HDAC seleccionado del grupo que consiste en ácidos hidroxamínicos, ácidos carboxílicos, benzamidas, epóxidos, FK228, apicidina A, B y C.

3. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2, que comprende al menos un desmetilante, al menos un inhibidor de las HDAC, al menos un análogo de la somatostatina seleccionado del grupo que consiste en somatostatina 14, somatostatina 28, cortistatina 14, cortistatina 17, cortistatina 29, octreotida, vapreotida, lanreotida, CH275, CH-288, BIM-23056, BIM-23206, BIM-23268, BIM-23926, BIM-23052, BIM-23244, BIM-23A758, BIM23A760, BIM-232A761, BIM-23A765, L- y D-Tyr (8) CYN154806, L-779.976, L-803.087, L-817.818, BIM23A387, SOM-320 y KE-108, y al menos un agonista de la dopamina.

4. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2, en donde dicho ácido hidroxamínico se selecciona del grupo que consiste en tricostatina A, SAHA, NVP-LAQ-82425 y PXD-101; o

en donde dicho ácido carboxílico se selecciona del grupo que consiste en ácido butanoico, ácido valproico y ácido 4-fenoxibutanoico; o en donde dicha benzamida se selecciona del grupo que consiste en N-acetildinalina y MS-275; o en donde dicho epóxido se selecciona del grupo que consiste en depeudicina y trapoxina A.

5. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3, en donde al menos un análogo de la somatostatina se selecciona del grupo que consiste en somatostatina 14, somatostatina 28, cortistatina 14, cortistatina 17, cortistatina 29, octreotida, vapreotida y lanreotida.

6. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3, en donde al menos un análogo de la somatostatina se selecciona del grupo que consiste en SOM-230 y KE-108.

7. Composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde el al menos un agonista de la dopamina se selecciona del grupo que consiste en amantadina, bromocriptina, cabergolina, quinagolida, lisurida, pergolida, ropinirol, pramiprexol y rasagilina.

8. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el desmetilante es la 5-aza-2'desoxicitidina y el agonista de la dopamina es la cabergolina.

9. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el desmetilante es la 5-aza-2'desoxicitidina y el al menos un agonista de la dopamina es la quimera de somatostatina-dopamina BIM-23A765.

10. Composición farmacéutica que comprende la 5-aza-2'-desoxicitidina y la octreotida.

11. Composición farmacéutica que comprende la 5-aza-2'-desoxicitidina y BIM-23926 o BIM-23206.

12. Composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para el uso en el tratamiento de un tumor que expresa los receptores de la dopamina en su superficie.

13. Composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde dicho tumor es un tumor neuroendocrino, un adenocarcinoma, un tumor cerebral, una neoplasia hemática y un cáncer hepatocelular.

14. Composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 13, en donde dicho tumor neuroendocrino se selecciona del grupo que consiste en adenoma hipofisario, tumor de células de islotes, insulinoma, carcinoide, feocromocitoma, paragaglioma, cáncer tiroideo medular; o

en donde dicho adenocarcinoma se selecciona del grupo que consiste en tumor de mama, riñón, colon, páncreas, próstata u ovario; o en donde dicho tumor cerebral es un meningioma; o en donde dicha neoplasia hemática se selecciona del grupo que consiste en linfoma de Hodgkin y linfoma no hodgkiniano, y leucemia crónica y aguda.

15. Composición farmacéutica tal y como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, para el uso en el tratamiento de un tumor.