Métodos y composiciones para tratar cánceres.

Combinación de un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog,

siendo dicho primer agenteciclopamina o forskolina, y un segundo agente que inhibe BCR-ABL, seleccionándose dicho segundo agente delgrupo que consiste en **Fórmula**

Métodos y composiciones para tratar cánceres

Campo técnico

La presente invención se refiere en general a métodos para inhibir el crecimiento de células tumorales y para tratar cáncer.

Técnica anterior

La ruta de señalización Hh se ha caracterizado bien en la técnica (véase, por ejemplo, Nybakken et al, Curr. Opin. Genet. Dev. 2002, 12: 503-511; y Lum et al, Science 2003, 299: 2039-2045) . Dicho de manera breve, en ausencia de ligandos Hedgehog, el receptor transmembrana, Patched (Ptch) , se une a Smoothened (Smo) y bloquea la función de Smo. Esta inhibición se mitiga en la presencia de ligandos, lo cual permite a Smo iniciar una cascada de señalización que da como resultado la liberación de los factores de transcripción Glis de proteínas citoplásmicas fusionadas (Fu) y del Suppressor of fused (SuFu) . (Supresor de fusión) . En la situación inactiva, SuFu impide que los Glis se transloquen al núcleo. En la situación activa, Fu inhibe a SuFu y se liberan los Glis. Las proteínas Gli se translocan al interior del núcleo y controlan la transcripción genética objetivo.

El oncogén BCR-ABL es el producto del cromosoma Filadelfia (Ph) 22q y codifica para una proteína BCR-ABL quimérica que tiene actividad tirosina cinasa de ABL activada de manera constitutiva. (Lugo et al, Science 1990, 247: 1079-1082) . BCR-ABL es la causa subyacente de la leucemia mieloide crónica. Mientras que la proteína BCR-ABL de 210 kDa se expresa en pacientes LMC, una proteína BCR-ABL de 190 kDa resultante de un punto de ruptura alternativo en el gen de BCR se expresa en pacientes con leucemia linfoblástica aguda (LLA) positiva para Ph (Ph+) . (Bartram et al, Nature 1983, 306: 277-280; Chan et al, Nature 1987, 325: 635-637) .

Se ha demostrado que BCR-ABL induce la proliferación y la antiapoptosis a través de diversos mecanismos en progenitores mieloides o linfoides comprometidos ó fibroblastos 3T3. (Pendergast et al, Cell 1993, 75: 175-85; Ilaria et al, J. Biol. Chem. 1996, 271: 31704-10; Chai et al, J. Immunol. 1997, 159:4720-8; y Skorski et al, EMBO J. 1997,

16: 6151-61) . Sin embargo, se sabe poco acerca del efecto de BCR-ABL sobre la población de células madre hematopoyéticas (CMH) . Publicaciones recientes sugieren que rutas de desarrollo como la ruta de señalización Wnt

o el gen Policomb BMI1 podrían estar implicados en la regulación y la expansión de las células madre leucémicas (Mohty et al, Blood, 2007; Hosen et al, Stem Cells, 2007) . BMI1 y beta-catenina están ambos regulados por incremento en la crisis blástica de la LMC y su expresión se correlaciona con el avance de la enfermedad. Los progenitores de granulocitos-macrófagos positivos para BCR-ABL que han adquirido expresión de 1-catenina son células madre leucémicas candidatas en la crisis blástica de la LMC. Las rutas de auto-renovación implicadas en la expansión de las células madre leucémicas positivas para BCR-ABL durante la fase crónica, que conducen a la expansión inicial del clon maligno, no se entienden bien actualmente. El documento WO 2006/102611 se refiere a compuestos que activan PP2A, Current. Med. Chem. 13 (6) , páginas 603-607 menciona a la ciclopamina como inhibidor de la señalización Hedgehog, pero ambas publicaciones no mencionan combinaciones con dos agentes diferentes.

Descripción de la invención La invención proporciona composiciones y composiciones farmacéuticas de las mismas, que pueden ser útiles para inhibir el crecimiento de células tumorales y para tratar una variedad de cánceres.

En un aspecto, la presente invención proporciona una composición tal como se define en la reivindicación 2 y sus reivindicaciones dependientes que se incorporan todas ellas al presente documento como referencia, que comprende un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog y un segundo agente que inhibe BCR-ABL. En otro aspecto, la invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog, un segundo agente que inhibe BCR-ABL y un portador farmacéuticamente aceptable, cada uno tal como se define en la reivindicación 2 y sus reivindicaciones dependientes que se incorporan todas ellas al presente documento como referencia.

En otro aspecto, la invención proporciona una combinación de un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog y un segundo agente que inhibe BCR-Abl, cada uno tal como se define en la reivindicación 1 o sus reivindicaciones dependientes que se incorporan al presente documento como referencia. Una realización de la invención también se refiere a combinaciones o composiciones para su uso según las reivindicaciones 6 ó 7, que también se incorporan al presente documento como referencia. La invención también proporciona métodos para tratar cánceres, en particular una leucemia positiva para BCR-ABL, que comprenden administrar a un sistema o a un sujeto, una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog y un segundo agente que inhibe BCR-ABL, o composiciones farmacéuticas o sales farmacéuticamente aceptables de la misma, tratando de esta manera dicha leucemia positiva para BCR-ABL. Por ejemplo, las composiciones de la invención pueden usarse para tratar leucemia mieloide crónica o leucemia linfocítica aguda.

Adicionalmente, la presente invención proporciona el uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog y un segundo agente que inhibe BCR-ABL, o composiciones farmacéuticas o sales farmacéuticamente aceptables de la misma, en la fabricación de un medicamento para tratar un trastorno proliferativo celular, en particular leucemia positiva para BCR-ABL, tal como se define en la reivindicación 5 y sus reivindicaciones dependientes que se incorporan todas ellas al presente documento como referencia.

En las composiciones y métodos anteriores para usar las composiciones de la invención, el primer agente en la composición inventiva puede unirse a Smo. El primer agente es ciclopamina o forskolina. El segundo agente en la composición o combinación inventiva se selecciona del grupo que consiste en:

En las composiciones y combinaciones anteriores de la invención, y métodos dados a conocer para usar las composiciones de la invención, la composición inventiva puede administrarse a un sistema que comprenda células o tejidos. En algunas realizaciones, la composición de la invención puede administrarse a un sujeto humano o animal.

Breve descripción de los dibujos La figura 1A muestra los niveles de transcrito para Gli1 y Ptch1 en células CD34+ purificadas de pacientes sanos y de pacientes con LMC en fase crónica o en crisis blástica (valores normalizados para células CD34+) . La figura 1B muestra la expresión de niveles de transcrito de Gli1 y Ptch1 en células madre o médula ósea completa positivas frente a negativas para BCR-ABL.

La figura 2A muestra el porcentaje de progenitores mieloides positivos para BCR-ABL (GFP) (Lin-, Kit+, Sca-) y CMH (Lin-, Kit+, Sca+) tras el tratamiento de cultivos mixtos de médula ósea con ciclopamina durante 72 horas. La figura 2B muestra la expresión de Gli1 tras el tratamiento de la médula ósea de ratones leucémicos con ciclopamina. La figura 2C muestra el número total de colonias contadas 10 días tras la siembra en placa de cultivos mixtos de médula ósea tratados con ciclopamina.

La figura 3A muestra el número de células positivas para Ly5.2 (embriones) en la sangre periférica tras el trasplante a ratones PepC-Ly5.1. La figura 3B muestra la distribución de tipos celulares en células positivas para Ly5.2 10 semanas tras el trasplante en la sangre periférica. La figura 3C muestra la regeneración de células positivas para Ly5.2 en la sangre periférica tras el tratamiento con 5-FU (150 mg/kg) . La figura 3D muestra el porcentaje de células positivas para GFP en la sangre periférica de ratones con trasplante de médula ósea que contiene el 10% de células positivas para GFP, el 10% de células positivas para GFP de Smo o el 10% de células positivas para GFP de SMOW535E, durante un período de 60 semanas. La figura 3E muestra niveles de transcrito de GLI1 relativos de médula ósea, o bien infectada con un vector de control pMSCV o bien con el vector de GFP de Smo o GFP de SMOW535E.

La figura 4A muestra el número de células positivas para BCR-ABL en la sangre periférica de ratones con trasplante 20 días tras el trasplante (Tx) . La figura 4B muestra el peso del bazo de ratones con trasplante 28 días tras el Tx. La figura 4C muestra la supervivencia de ratones... [Seguir leyendo]

1. Combinación de un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog, siendo dicho primer agente ciclopamina o forskolina, y un segundo agente que inhibe BCR-ABL, seleccionándose dicho segundo agente del grupo que consiste en

2. Composición que comprende un primer agente que inhibe la ruta de señalización Hedgehog, siendo dicho primer agente ciclopamina o forskolina, y un segundo agente que inhibe BCR-ABL, seleccionándose dicho segundo agente del grupo que consiste en

3. Composición según la reivindicación 2, en la que dicho primer agente se une a Smo.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 2 y un portador farmacéuticamente aceptable.

5. Uso de una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2-4, para la fabricación de un medicamento 5 para tratar leucemia positiva para BCR-ABL.

6. Uso según la reivindicación 5, en el que dicha leucemia positiva para BCR-ABL es leucemia mieloide crónica o leucemia linfocítica aguda.

7. Combinación según la reivindicación 1 o composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2-4, para su uso en el tratamiento de leucemia positiva para BCR-ABL.

8. Combinación o composición según la reivindicación 7, en la que dicha leucemia positiva para BCR-ABL es leucemia mieloide crónica o leucemia linfocítica aguda.