Bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie,

para ser utilizado en la inhibición o el tratamiento de una inflamación asociada a depósitos amiloides y de una inflamación cerebral asociada a depósitos de amiloides o que implique microglias activadas

Método para tratar una inflamación asociada a depósitos amiloides y una inflamación cerebral que implica una microglia activada.

Sector de la técnica

La invención se refiere a la inhibición de la formación de depósitos amiloides y a la disolución de depósitos amiloides pre-formados y a productos y compuestos farmacéuticos para tratar la inflamación cerebral y para tratar la inflamación asociada a los depósitos amiloides o similares a amiloides en el cerebro y en otras partes del cuerpo.

Estado de la técnica

Las enfermedades en las que se forman placas se caracterizan por la presencia de depósitos de placas amiloides en el cerebro así como por degeneración neuronal. Los depósitos amiloides se forman por péptidos agregados a una masa insoluble. La naturaleza del péptido varía según la enfermedad pero en la mayoría de los casos, el agregado tiene una estructura de lámina beta y se tiñe con tinción Rojo del Congo. Además de la enfermedad de Alzheimer (EA), la enfermedad de Alzheimer de aparición precoz, la enfermedad de Alzheimer de aparición tardía, la enfermedad de Alzheimer presintomática, otras enfermedades caracterizadas por depósitos amiloides son, por ejemplo, la amiloidosis SAA, el síndrome islandés hereditario, el mieloma múltiple, y las enfermedades priónicas. La enfermedad priónica más común en animales son el temblor epidémico (escrapie) de ovejas y cabras y la encefalopatía espongiforme (BSE) del ganado (Wilesmith y Wells, 1991). En los humanos se han identificado cuatro enfermedades priónicas: (i) Kuru, (ii) la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (CJD), (iii) la enfermedad Gerstmann-Streussler-Sheinker (GSS), y (iv) y el insomnio familiar fatal (FFI) (Gajdusek, 1977; y Tritschler et al. 1992).

Las enfermedades priónicas implican la conversión de la proteína priónica celular normal (PrPC) en la correspondiente isoforma escrapie (PrPSc). Las mediciones espectroscópicas demuestran que la conversión de PrPC en la isoforma escrapie (PrPSc) supone una importante transición de conformación, implicando que las enfermedades priónicas, como otras enfermedades amiloidogénicas, son trastornos de la conformación proteínica. La transición de PrPC a PrPSc está acompañada de una disminución de la estructura secundaria α-helicoidal (del 42% al 30%) y de un notable incremento del contenido en lámina beta (del 3% al 43%) (Caughey et al, 1991; y Pan et al, 1993). Esta reestructuración está asociada a propiedades fisicoquímicas anormales, incluyendo la insolubilidad de detergentes no desnaturalizantes y la resistencia parcial a la proteólisis. Estudios anteriores han mostrado que un péptido sintético homólogo a residuos 106-126 de PrP humano (PrP106-126) muestra algunas de las propiedades fisicoquímicas y patogénicas de PrPSc (Selvaggini et al, 1993; Tagliavini et al, 1993; y Forloni et al, 1993). El péptido muestra un notable polimorfismo conformacional, adquiriendo diferentes estructuras secundarias en diversos entornos (De Gioia et al, 1994). Tiende a adoptar una conformación de lámina beta en soluciones tamponadas y se acumula en fibrillas amiloides que son resistentes en parte a la digestión con proteasa. Recientemente, los estudios cristalográficos por rayos x de un complejo de anticuerpos 3F4 y su epítopo péptido (PrP104-113) han proporcionado una visión estructural de esta flexible región que se considera es un componente de la reestructuración conformacional esencial para el desarrollo de una enfermedad priónica (Kanyo et al, 1999). La identificación de clases de secuencias que participan en los procesos de plegado-desplegado y/o solubilización-agregación puede abrir una nueva vía en el tratamiento de enfermedades que forman placas, basado en la prevención de la agregación y/o la inducción de la desagregación (Silen y Agard, 1989; Frenkel et al, 1998; Horiuchi y Caughey, 1999).

La enfermedad de Alzheimer (EA) es un trastorno progresivo que tiene como resultado la demencia senil. De manera general, la enfermedad presenta dos categorías: la aparición tardía que se produce en la vejez (normalmente pasados los 65 años) y la aparición precoz que se desarrolla mucho antes del periodo senil, entre los 35 y 60 años por ejemplo. En ambos tipos de enfermedad, la patología es similar, pero las anomalías tienden a ser más graves y generalizadas en los casos que comienzan a una edad temprana. La enfermedad se caracteriza por dos tipos de lesiones del cerebro, las placas seniles y los nudos neurofibrilares. Las placas seniles son áreas de neutrófilos desorganizados de hasta 150 mm con depósitos amiloides extracelulares en el centro, visibles mediante análisis microscópico de secciones de tejido cerebral. Los nudos neurofibrilares son depósitos intracelulares de proteína tau consistentes en dos filamentos enrollados entre sí en parejas.

El principal componente de las placas seniles es un péptido denominado Aβ o péptido beta-amiloide (βAP). El péptido beta-amiloide es un fragmento interno de 39-43 aminoácidos de una proteína precursora denominada proteína precursora de amiloide (PPA). Varias mutaciones de la proteína PPA han sido correlacionadas con la presencia de la enfermedad de Alzheimer (Ver, por ej., Goate et al., Nature 349,704, 1991, valina717 a isoleucina; Chartier Harían et al. Nature 353, 844, 1991, valina717 a glicina; Murrell et al., Science 254, 97, 1991, valina717 a fenilalanina; Mullan et al., Nature Genet. 1, 345, 1992, una mutación doble, cambiando lisina595-metionina596 por asparagina595-leucina596).

Se cree que tales mutaciones causan la enfermedad de Alzheimer por el procesamiento incrementado o alterado de la PPA en beta-amiloide, en particular, por el procesamiento de la PPA en cantidades mayores de la forma larga del beta-amiloide (es decir, Aβ1-42 y Aβ1-43). Se cree que las mutaciones en otros genes, como los genes de la presenilina, PS1 y PS2, afectan indirectamente el procesamiento de la PPA generando mayores cantidades del beta-amiloide de forma larga (ver Hardy, TINS 20, 154, 1997). Estas observaciones indican que el beta-amiloide y en particular su forma larga, es un elemento causativo de la enfermedad de Alzheimer.

También se conocen otros péptidos o proteínas de los que hay pruebas de auto-agregación, como por ejemplo, sin ánimo de ser exhaustivos, la amilina (Young A A. et al., 1994, FEBS Lett, 343(3);237-41); bombesina, ceruleína, octapéptido de colecistokinina, eledoisina, pentapéptido relacionado con la gastrina, tetrapéptido de gastrina, somatostatina (reducida), sustancia P; y péptido, hormona que libera la hormona luteinizante, somatostatina N-Tyr (Banks y Kastin, 1992).

Las publicaciones sobre fibras amiloides indican que las láminas beta cilíndricas son las únicas estructuras que concuerdan con algunos de los datos del microscopio electrónico y rayos x, y fibras de fragmentos Aβ Alzheimer y variantes están probablemente compuestas de dos o tres láminas beta cilíndricas (Perutz et al., 2002). El péptido completo Aβ contiene 42 residuos, exactamente el número correcto para nuclear un cuerpo cilíndrico; este hallazgo y las muchas posibles interacciones electroestáticas fuertes en láminas beta hicieron que el péptido Aβ representara en ausencia de prolinas la propensión del péptido Aβ a formar las placas amiloides extracelulares encontradas en pacientes con Alzheimer. Si esta interpretación es correcta, los amiloides consisten en tubos estrechos (nanotubos) con una cavidad central rellena de agua. La reversibilidad del crecimiento de la placa amiloide in-vitro sugiere un equilibrio de estado estable entre βA en placas y en solución (Maggio y Mantyh, 1996). La dependencia de la polimerización βA en las interacciones péptido-péptido para formar una fibrilla de lámina beta y la influencia estimuladora de otras proteínas en la reacción, sugieren que la formación de amiloides puede estar sujeta a modulación. Se han hecho muchos intentos de encontrar sustancias capaces de interferir la formación de amiloides. Entre los compuestos más investigados están los anticuerpos, péptidos compuestos de aminoácidos beta-rompedores como la prolina, la adición de grupos cargados al motivo de reconocimiento y el empleo de aminoácidos N-metilados como módulos (revisado por Gazit, 2002).

Péptidos cíclicos hechos de residuos D y L alternos forman dichos nanotubos que matan bacterias introduciéndose en membranas y despolarizándolas (Perutz et al., 2002). Existen algunos indicios de que algunas... [Seguir leyendo]

1. Bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie, para ser utilizado en la inhibición o el tratamiento de una inflamación asociada a depósitos amiloides y de una inflamación cerebral asociada a depósitos de amiloides o que implique microglias activadas.

2. Bacteriófago para ser utilizado de acuerdo con la reivindicación 1, donde la inflamación cerebral es inhibida o tratada mediante la administración intranasal de una cantidad efectiva del bacteriófago filamentoso.

3. Bacteriófago para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, donde la inflamación cerebral asociada a depósitos de amiloides o que implica microglias activadas es una enfermedad formadora de placas, seleccionada entre la enfermedad de Alzheimer y una enfermedad priónica.

4. Bacteriófago para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde la inflamación asociada a depósitos de amiloides es seleccionada entre el mieloma múltiple y una amiloidosis renal.

5. Bacteriófago para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde el bacteriófago filamentoso es seleccionado entre los bacteriófagos M13, f1 y fd y una mezcla cualquiera de éstos.

6. Composición farmacéutica que comporta un soporte o un excipiente farmacéuticamente aceptable y, como ingrediente activo, o bien un bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bien un bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie.

7. Composición farmacéutica según la reivindicación 6, en la que dicho bacteriófago filamentoso es elegido entre el grupo constituido por M13, f1 y fd, y mezclas de estos.

8. Bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie, para ser utilizado como medicamento.

9. Procedimiento in vitro para inhibir la formación de depósitos de amiloides, que comprende el provocar que un bacteriófago filamentoso entre en contacto con un péptido que forma placas para inhibir la formación de depósitos de amiloides, donde el bacteriófago filamentoso es un bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o un bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie.

10. Procedimiento in vitro para desagregar depósitos de amiloides preformados, que comprende el provocar que un bacteriófago filamentoso entre en contacto con los depósitos de amiloides preformados para desagregar los depósitos de amiloides preformados, donde el bacteriófago filamentoso es un bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o un bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su super- ficie.

11. Procedimiento según la reivindicación 9 ó 10, donde el bacteriófago filamentoso es elegido entre el grupo constituido por bacteriófagos M13, f1 y fd, y mezclas de éstos.

12. Bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie, para ser utilizado en el tratamiento de una enfermedad elegida entre el grupo constituido por la enfermedad de Alzheimer, la amiloidosis SAA, el síndrome islandés hereditario, la demencia senil, mielomas múltiples, de Kuru, la enfermedad de Creutzfedl-Jacob (CJD), la enfermedad de Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS), el insomnio familiar fatal (FFI), el temblor epidémico (escrapie) y la encefalitis espongiforme bovina (BSE).

13. Bacteriófago para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, donde la enfermedad es la enfermedad de Alzheimer.

14. Bacteriófago para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, donde la enfermedad es la enfermedad de Alzheimer de aparición precoz, la enfermedad de Alzheimer de aparición tardía o la enfermedad de Alzheimer pre-sintomática.

15. Bacteriófago para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, donde el bacteriófago filamentoso es elegido entre los bacteriófagos M13, f1 y fd, y las mezclas de cualquiera de éstos.

16. Utilización de un bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie, en la preparación de un medicamento destinado a inhibir o tratar una inflamación asociada a depósitos de amiloides y una inflamación cerebral asociada a depósitos de amiloides o implicando microglias activadas.

17. Utilización de un bacteriófago filamentoso de tipo salvaje o bacteriófago filamentoso que no presenta un anticuerpo o un antígeno de bacteriófago no filamentoso en su superficie, en la preparación de un medicamento destinado a tratar una enfermedad elegida entre el grupo constituido por la Alzheimer, la amiloidosis SAA, el síndrome islandés hereditario, la demencia senil, mielomas múltiples, de Kuru, la enfermedad de Creutzfedl-Jacob (CJD), la enfermedad de Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS), el insomnio familiar fatal (FFI), el temblor epidémico (scrapie) y la encefalitis espongiforme bovina (BSE).