Un método para producir una composición para la liberación controlada de una molécula bioactiva,

el método comprendiendo:

A) (i) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-leu-encefalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(ii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-bifalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(iii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-insulina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase;

B) formar una emulsión por agitación por vortex de la monofase con el PVA; y

C) formar micropartículas o nanopartículas que comprenden el PLGA que encapsula el conjugado.

Metodo para producir composiciones para la administracion mejorada de moleculas bioactivas

Antecedentes de la invención

La encapsulación de farmacéuticas en microesferas y nanoesferas de polímero biodegradables puede prolongar el mantenimiento de los niveles de fármaco terapéuticos en relación a la administración del mismo fármaco. La liberación extendida se puede extender hasta varios meses dependiendo de la formulación y de la molécula activa encapsulada. Sin embargo muchas moléculas bioactivas, y especialmente las proteínas, se dañan o se vuelven inestables por los procesos requeridos para encapsularlas en los portadores poliméricos. Además, la naturaleza plora, cargada de muchas proteínas puede limitar el grado de encapsulación en los portadores de fármacos de polímero y puede llevar a una pérdida rápida de una fracción de la molécula bioactiva encapsulada cuando se administra por primera vez ("estallido") .

La encapsulación de moléculas bioactivas en sistemas de administración de polímero biodegradables ha sido usada para estimular una respuesta inmune cuando se administran a un paciente (ver Patente U.S. No.

5.942.253 de Gombotz y otros) . Mientras esto es un resultado deseado en algunos casos, no es deseable cuando el propósito es la administración de la molécula bioactiva para propósitos terapéuticos. Así, el reconocimiento disminuido por el sistema inmunológico de las moléculas bioactivas administradas usando polímeros biodegradables será beneficioso en un contexto terapéutico.

Las moléculas bioactivas, especialmente las proteínas terapéuticas (fármacos) , pueden ser modificadas con polímeros hidrofílicos (un proceso generalmente conocido como "pegilación") , como el glicol de polietileno, unido covalentemente a una o más cadenas laterales de aminoácidos (ver, por ejemplo, la Patente U.S. Nº 4.179.337 de Davis y otros; la Patente U.S. Nº 5.446.090 de Harris, la Patente U.S. Nº 5.880.255 de Delgado y otros) . Mientras en la técnica es conocido que dicha unión puede llevar a un aumento aparente en la masa molecular y a una tasa de aclaración de la sangre disminuida para la proteína terapéutica modificada (ver por ejemplo, la Patente U.S. Nº

5.320.840 de Camble y otros) , el estado de la técnica no enseña que se pueda conseguir inmunogenicidad disminuida o que la duración de la liberación de los sistemas de administración de fármacos de polímero biodegradables pueda ser extendida usando proteínas pegiladas. El estado de la técnica no enseña que la pegilación pueda aumentar la carga de fármaco obtenible en un sistema de administración de fármaco biodegradable en relación a un fármaco no pegilado, ni tampoco enseña que el estallido reducido del fármaco es obtenible para la fracción pegilada en relación al fármaco no pegilado.

La WO 98/46212 se refiere a micropartículas biodegradables para la administración sostenida de fármacos terapéuticos. El documento divulga métodos mejorados para la fabricación de micropartículas poliméricas que contienen una variedad de ingredientes activos. La divulgación se refiere a la liofilización directa de una emulsión o una suspensión. A este respecto, un ingrediente activo y un polímero son dispersados dentro de una fase continua, la dispersión resultante es congelada, y el agua y los solventes orgánicos son retirados de la dispersión pro liofilización.

Resumen de la invención

La presente invención proporciona métodos nuevos para producir formulaciones para la liberación controlada, prolongada de moléculas bioactivas de acuerdo a la reivindicación 1. Las formulaciones se basan en micropartículas o nanopartículas formadas de la combinación de copolímeros poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) biodegradables. Las moléculas bioactivas son acopladas al glicol de polietileno y después formuladas con las micropartículas o nanopartículas sólidas para proporcionar la liberación controlada. Las formulaciones de liberación controlada pueden ser administradas por inyección, por inhalación, nasalmente, u oralmente.

Por consiguiente, se divulga que la unión de polímeros hidrofílicos a moléculas bioactivas, como fármacos y proteínas terapéuticas, tiene varios efectos beneficiosos, incluyendo el proporcionar protección de la degradación y la desnaturalización bajo las condiciones de encapsulación en los portadores de fármaco. Adicionalmente la cantidad de proteína modificada que puede ser encapsulada se aumenta en relación a la proteína no modificada, proporcionando así una dosis total más baja de material, beneficiando tanto al paciente como al productor.

Además, la presente invención además divulga que la inmunogenicidad de las moléculas bioactivas pegiladas encapsuladas en portadores de administración de fármacos de polímero biodegradables disminuye en relación a las moléculas bioactivas no pegiladas en los portadores, particularmente cuando se administran por inyección subcutánea o intramuscular o por inhalación o administración mucosal (por ejemplo, administración nasal u oral) . Dicha inmunogenicidad disminuida es particularmente ventajosa cuando los polímeros biodegradables son usados para la administración oral, ya que este es un método típico para la vacunación mucosal.

La presente invención divulga que las proteínas, péptidos, oligosacáridos y oligonucleótidos pegilados, que normalmente no son absorbidos del tracto gastrointestinal, se vuelven biodisponibles por la administración en sistemas de polímeros biodegradables, particularmente nanoesferas. El término "biodisponible", como se usa en la presente, se refiere a la fracción de molécula bioactiva que entra en el flujo sanguíneo tras la administración a un sujeto. Las formulaciones de liberación controlada producidas de acuerdo a la invención aumentan la biodisponibilidad de las moléculas bioactivas, y en particular, las formulaciones de nanoesfera descritas en la presenta cuando se administran oralmente. Por ejemplo, los niveles de sangre pueden ser mantenidos hasta varios días tras una única administración oral de molécula bioactiva pegilada encapsulada en nanoesfera. Adicionalmente las cadenas de glicol de polietileno protegen las moléculas bioactivas de la degradación y la desnaturalización en el proceso de la formación de las nanoesferas, contribuyen al atrapamiento de material activo, y disminuyen el efecto "estallido".

Así, la invención proporciona un método para producir una composición para la liberación controlada de una molécula bioactiva, el método comprende A)

(i) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-leu-encefalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(ii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-bifalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(iii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-insulina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase;

B) formar una emulsión por agitación por vortex de la monofase con el PVA; y C) formar micropartículas o nanopartículas que comprenden el PLGA que encapsula el conjugado.

En una realización particularmente preferida, la composición se administra oralmente.

Las composiciones producidas de acuerdo a la reivindicación 1 pueden ser usadas para mejorar la administración in vitro de las moléculas bioactivas terapéuticas como se define en la reivindicación 1 en varios aspectos. En particular, la invención proporciona las ventajas de inmunogenicidad disminuida, biodisponibilidad aumentada, duración aumentada, estabilidad aumentada, estallido disminuido y liberación controlada y sostenida de moléculas bioactivas in vivo.

Descripción Detallada de la Invención

I. Moléculas Bioactivas [0011] El término "molécula bioactiva", como se usa en la presente, se refiere a cualquier proteína, péptido, polisacárido, ácido nucleico u otro compuesto biológicamente activo terapéutico para la administración a un sujeto, como un humano u otro mamífero.

Las proteínas terapéuticas incluyen, pero no están limitadas a, alfa-interferones, beta-interferones, gammainterferones, eritroproteínas, el factor estimulante de las colonias de granulocitos, el factor estimulante de las colonias de macrófagos de granulocitos (GM-CSF) , interleucina 1, interleucina 2, interleucina 3, interleucina 12, asparaginasa, adenosina deaminasa e insulina.

Los péptidos terapéuticos también incluyen hormonas, como la ACTH,... [Seguir leyendo]

1. Un método para producir una composición para la liberación controlada de una molécula bioactiva, el método comprendiendo:

A)

(i) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-leu-encefalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(ii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-bifalina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase; o

(iii) disolver (a) un PLGA y (b) un conjugado de PEG-insulina en un solvente de cloruro de metileno para formar una monofase;

B) formar una emulsión por agitación por vortex de la monofase con el PVA; y C) formar micropartículas o nanopartículas que comprenden el PLGA que encapsula el conjugado.

2. Un método de la reivindicación 1 en donde la composición es para la administración oral.

3. El método de la reivindicación 1 en donde la composición es para la administración

(i) por inhalación o administración mucosal; o (ii) por inyección opcionalmente en donde la inyección es subcutánea o intramuscular.