METODO PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS HETEROLOGAS PRODUCIDAS EN FORMA FUSIONADA A "E. COLI", SU USO, VECTORES DE EXPRESION Y LINAJES RECOMBINADOS.
LA PRESENTE INVENCION ES RELATIVA AL CAMPO DE LA BIOTECNOLOGIA Y EN PARTICULAR AL USO DE TECNOLOGIA DE RECOMBINACION DE DNA PARA LA PRODUCCION DE PROTEINAS HETEROLOGAS.
EL OBJETO TECNICO DE ELLA ES DESARROLLAR UN METODO ALTAMENTE EFICIENTE PARA LA EXPRESION DE GENES HETEROLOGOS DE FORMA FUSIONADA EN "ESCHERICHIA COLI", LOS CUALES SE CODIFICAN POR PROTEINAS LAS CUALES PUEDEN SER FACILMENTE PURIFICADAS DEBIDO AL HECHO DE QUE SON SINTETIZADAS EN FORMA SOLUBLE EN EL CITOPLASMA CELULAR. PARA CONSEGUIR ESTO, SE USA UN VECTOR DE EXPRESION, EL CUAL CONTIENE UNA SECUENCIA ESTABILIZADORA LA CUAL SE CODIFICA SOLO PARA LOS PRIMEROS 58 AMINO ACIDOS PERTENECIENTES AL EXTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA HUMANA INTERLEUKIN-2, LA CUAL ESTA BAJO EL PROMOTOR TRIPTOFANO DEL ACTUAL "ESCHERICHIA COLI". ESTE VECTOR CONTIENE ADEMAS EL GEN PARA RESISTIR LA AMPICILINA COMO UNA MARCA DE SELECCION Y EL TERMINADOR DEL ION DE TRANSCRIPCION DEL BACTERIOFAGO T4. EN PARTICULAR LOS GENES LOS CUALES SE CODIFICAN POR LAS PROTEINAS ANTIGENAS DEL VIRUS DE INMUNODEFIENCIA HUMANA (VIH 1 Y 2) SERAN CLONADOS EN EL, OBTENIENDOSE ALTOS NIVELES DE EXPRESION DE DICHA PROTEINA DE LOS LINAJES TRANSFORMADOS DE LA BACTERIA "ESCHERICHIA COLI". EL METODO, EL CUAL ES EL OBJETO DE LA PRESENTE INVENCION, SE PUEDE EMPLEAR PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS HETEROLOGAS, RECOMBINADAS EN ALTOS NIVELES, SINTETIZADAS EN FORMA INSOLUBLE Y FUSIONADA EN "E. COLI", LAS CUALES SE PUEDEN USAR EN LA INDUSTRIA FARMACEUTICA PARA OBTENER PREPARACIONES DE VACUNA O EN EL DESARROLLO DE SISTEMAS DE DIAGNOSTICOS, EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA, EN AGRICULTURA,ETC
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: CENTRO DE INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA.
Nacionalidad solicitante: Cuba.
Dirección: 31 STREET, '/156 & 190, CUBANACAN PLAYA,HAVANA.
Inventor/es: HERRERA MARTINEZ, LUIS SATURNINO, FERNANDEZ MASO, JULIO RAUL, NOVOA PEREZ, LIDIA INES, MACHADO LAHERA, JORGE A., BENITEZ FUENTES, JESUS V., NARCIANDI DIAZ, RAMON EMILIO, AVE 391 NO.18218, RODRIQUEZ REINOSO, JOSE LUIS, ESTRADA GARCIA, MARIO PABLOGARCIA SUAREZ, JOSE.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 15 de Noviembre de 1995.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/48 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Retroviridae, p. ej. virus de la leucemia bovina, virus de la leucemia felina.
- C12N15/62 C12N 15/00 […] › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
- C12N15/71 C12N 15/00 […] › Sistemas de expresión que utilizan secuencias reguladoras derivadas del operón trp.
- C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
- G01N33/68 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.
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