Inhibidores de histona desacetilasa con actividad combinada sobre histona desacetilasas de clase I y clase IIB en combinación con inhibidores del proteasoma.

Combinación de un inhibidor del proteasoma, en la que dicho inhibidor del proteasoma es bortezomib,

y uninhibidor de histona desacetilasa, en la que dicho inhibidor de histona desacetilasa es el compuesto n.º 1a(JNJ26481585)

las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables y las formas estereoquímicamente isoméricasdel mismo.

Inhibidores de histona desacetilasa con actividad combinada sobre histona desacetilasas de clase I y clase IIB en combinación con inhibidores del proteasoma La presente invención se refiere a inhibidores de histona desacetilasa (HDAC) con actividad combinada sobre histona desacetilasas de clase I y clase II. Se refiere a combinaciones y composiciones que los comprenden, así como a su uso, como medicamento, por ejemplo como medicamento para inhibir tumores hematopoyéticos tales como linfomas y leucemias.

La familia de enzimas HDAC lleva el nombre de su primer sustrato identificado, es decir, las proteínas histona nucleares. Las proteínas histona (H2A, H2B, H3 y H4) forman un complejo de octámero, alrededor del cual se enrolla la hélice de ADN con el fin de establecer una estructura de cromatina condensada. El estado de acetilación de histonas está en equilibrio dinámico gobernado por histona acetil transferasas (HAT) , que acetilan y HDAC que son responsables de la desacetilación de colas de histona. La inhibición de la enzima HDAC promueve la acetilación de las colas de histona del nucleosoma, favoreciendo una estructura de cromatina más competente desde el punto de vista de la transcripción, que a su vez conduce a la expresión alterada de genes implicados en procesos celulares tales como diferenciación, apoptosis y proliferación celular. En los últimos años, se ha identificado un número creciente de sustratos de HDAC distintos de histonas adicionales.

Se observa reclutamiento de HDAC no regulado y constante conjuntamente con factores de transcripción oncogénicos para la cromatina en formas específicas de leucemia y linfoma, tales como leucemia promielocítica aguda (LPA) , linfoma no Hodgkin y leucemia mieloide aguda (LMA) . Se observó regulación por incremento de HDAC1 al nivel de proteína en células de cáncer de próstata, a medida que la enfermedad evoluciona desde lesiones malignas y adenocarcinoma de próstata que responde a andrógenos bien diferenciado hacia el cáncer de próstata insensible a andrógenos desdiferenciado de manera fenotípica. Además, se encuentra un aumento de la expresión de HDAC2 en la mayoría de los explantes de cáncer de colon humanos que se desencadena por la pérdida del supresor de tumores poliposis coli adenomatosa (APC) .

En concordancia con el equilibrio de actividad HDAC/HAT en cáncer, se ha mostrado que los inhibidores de HDAC inducen detención del ciclo celular, diferenciación terminal y/o apoptosis en un amplio espectro de líneas de células tumorales humanas in vitro, inhiben la angiogénesis y presentan actividad antitumoral in vivo en modelos de xenoinjerto humano en ratones desnudos.

La familia de HDAC de enzimas se divide comúnmente en 3 clases: es decir, clases I, II y III. Sólo las clases I y II se han implicado predominantemente en la mediación de los efectos de inhibidores de HDAC actualmente en desarrollo clínico.

Se ha mostrado que las HDAC del grupo de clase I, que consiste en los miembros 1-3 y 8 de la familia de HDAC, son cruciales para la proliferación de células tumorales.

Entre la amplia variedad de factores de transcripción que utilizan HDAC de clase I para silenciar promotores específicos, el ejemplo mejor conocido es la clase de receptores de hormonas nucleares, que solamente se unen a HDAC3 en ausencia de su ligando, y por tanto mantienen un estado de silenciamiento transcripcional. El complejo 45 se disocia de una manera dependiente del ligando, por ejemplo, por retinoides, estrógenos, andrógenos, etcétera, dando como resultado expresión génica y diferenciación. Otro ejemplo clave es el silenciamiento dependiente de HDAC1 del inhibidor de cinasa dependiente de ciclina p21wafl, cipl. El papel crucial de la inducción de p21wafl, cipl en los efectos antiproliferativos de inhibidores de HDAC se demostró mediante estudios que muestran un aumento de 6 veces en la resistencia al inhibidor de HDAC tricostatina A (TSA) en células deficientes en p21wafl, cipl en comparación con las células HCT-116 originales. Además, a diferencia de genes supresores de tumores genuinos, p21wafl, cipl está presente de manera ubicua en células tumorales, y se induce por inhibidores de HDAC.

Las histonas no son los únicos sustratos de las HDAC de clase I. Por ejemplo, las HDAC 1-3 desacetilan el supresor de tumores p53, que como consecuencia se ubiquitina y se degrada. Puesto que p53 es un potente supresor de 55 tumores, incluyendo detención del ciclo celular y apoptosis, el mantenimiento de bajos niveles de esta proteína es clave para permitir la supervivencia y proliferación no controlada de células tumorales.

Las HDAC de clase II pueden dividirse en 2 subclases: clase IIa que contiene HDAC 4, 5, 7, 9 y la variante de corte y empalme de HDAC 9 MITR. La clase IIb comprende HDAC6 y HDAC10, teniendo ambas dominios de HDAC duplicados. Las HDAC de clase IIa no presentan actividad histona desacetilasa intrínseca sino que regulan la expresión génica funcionando como factores puente puesto que ambas se asocian con complejos de HDAC de clase 1 y con complejos de factor de transcripción/ADN.

HDAC6, un miembro de la clase IIb, ha recibido atención debido a su identificación como Hsp90 desacetilasa. Se ha 65 demostrado que los inhibidores de HDAC LAQ824 y LBH589 inducen la desacetilación de Hsp90 mientras que trapoxina y butirato de sodio no. Hsp90 desacetilasa da como resultado degradación de proteínas cliente prosupervivencia y pro-proliferativas asociadas con Hsp90. Los ejemplos clave incluyen Her-2, Bcr-Abl, receptor de glucocorticoides, FLT-3 mutante, c-Raf y Akt. Además de Hsp90, HDAC6 también media la desacetilación de tubulina que da como resultado la desestabilización de microtúbulos en condiciones de estrés.

El papel biológico de HDAC6 se confirmó adicionalmente por el hecho de que un inhibidor de molécula pequeña específico de HDAC6, tubacina, provocaba hiperacetilación de α-tubulina y disminuía la motilidad celular sin afectar a la progresión del ciclo celular. Tubacina, que inhibe solamente el dominio α-tubulina desacetilasa de HDAC6, provoca solamente un aumento mínimo en la acetilación de HSP90.

En concordancia, se encontró que HDAC6 es clave para la migración celular estimulada por estradiol de células de carcinoma de mama MCF-7.

Finalmente, HDAC6 desempeña un papel crucial en el manejo celular de proteínas mal plegadas y el aclaramiento de éstas del citoplasma.

Debido al gran número de proteínas reguladoras del ciclo celular reguladas por HDAC al nivel de o bien su expresión o bien su actividad, el efecto antiproliferativo de inhibidores de HDAC no puede vincularse a un único mecanismo de acción. La inhibición de HDAC sigue siendo prometedora en la terapia anticancerígena, en la que los efectos concertados sobre múltiples rutas implicadas en la inhibición del crecimiento, diferenciación y apoptosis pueden ser

ventajosos en el tratamiento de una patología heterogénea tal como formación y crecimiento de tumores.

A lo largo de los años, se ha hecho evidente que las HDAC no sólo desempeñan un papel clave en la carcinogénesis, sino también en varios procesos de diferenciación no malignos. Esto es lo más evidente para 4, 5, 7 y 9 de clase IIa. Por ejemplo, se ha sugerido que HDAC7 desempeña un papel crítico en la maduración tímica de células T, mientras que HDAC4 se ha implicado en la regulación de la hipertrofia de condrocitos y la formación de hueso endocondral. El mayor interés, sin embargo, se ha centrado alrededor del papel de las HDAC de clase IIa en la diferenciación muscular. Las HDAC 4, 5, 7 y 9 suprimen todas la diferenciación de miocitos (células musculares) como consecuencia de ser correpresores transcripcionales del factor potenciador de miocitos 2 (MEF2) .

La toxicidad más común observada con inhibidores de HDAC es mielosupresión de grado leve a moderado. Además, aparecen náuseas/vómitos, fatiga y diarrea como efectos adversos en muchos ensayos clínicos.

El documento EP 1485365 publicado el 18 de septiembre de 2003 da a conocer entre otros el inhibidor de HDAC R306465.

El documento WO 2006/010750 publicado el 2 de febrero de 2006 describe la preparación, la formulación y las propiedades farmacéuticas de compuestos con la siguiente fórmula de Markush.

las formas de N-óxido, las sales de adición farmacéuticamente aceptables y las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos,

en los que n, m, R1, R2, R3, X e Y tienen los significados definidos en dicha memoria descriptiva.

Sin embargo, el potencial de la terapia con inhibidores de HDAC va más allá de su uso como agentes individuales. Las rutas moleculares afectadas por inhibidores... [Seguir leyendo]

1. Combinación de un inhibidor del proteasoma, en la que dicho inhibidor del proteasoma es bortezomib, y un inhibidor de histona desacetilasa, en la que dicho inhibidor de histona desacetilasa es el compuesto n.º 1a (JNJ26481585)

las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables y las formas estereoquímicamente isoméricas 10 del mismo.

2. Combinación según la reivindicación 1, en forma de una composición farmacéutica que comprende bortezomib y compuesto n.º 1a junto con uno o más portadores farmacéuticos.

3. Combinación según la reivindicación 2, para su uso simultáneo, separado o secuencial.

4. Combinación según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su uso en terapia médica.

5. Uso de una combinación según cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, para la fabricación de un medicamento 20 para inhibir el crecimiento de células tumorales.

6. Uso de un inhibidor de histona desacetilasa en combinación con un inhibidor del proteasoma, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia promielocítica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia monocítica aguda, linfoma, leucemia de células B crónica,

leucemia mieloide crónica, leucemia mieloide crónica en crisis hemoblástica, linfoma de Burkitt y mieloma múltiple en el que dicho inhibidor de histona desacetilasa es el compuesto n.º 1a las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables y las formas estereoquímicamente isoméricas del mismo,

y en el que dicho inhibidor del proteasoma es bortezomib.

7. Uso según la reivindicación 6, en el que dicho medicamento es para el tratamiento de leucemia linfoblástica aguda resistente a fármacos, leucemia mielógena aguda resistente a fármacos, leucemia promielocítica aguda resistente a fármacos, leucemia mieloide aguda resistente a fármacos, leucemia monocítica aguda resistente a fármacos, linfoma resistente a fármacos, leucemia de células B crónica resistente a fármacos, leucemia mieloide crónica resistente a fármacos, leucemia mieloide crónica en crisis hemoblástica resistente a fármacos, linfoma de Burkitt resistente a fármacos y mieloma múltiple resistente a fármacos.

8. Uso según las reivindicaciones 6 y 7, en el que dicho medicamento es para el tratamiento de mieloma múltiple resistente a bortezomib.