INHIBIDORES DUALES ANTITROMBÓTICOS QUE COMPRENDEN UN RESIDUO DE BIOTINA.

un compuesto antitrombotico de formula (I) **Fórmula** oligosacarido-espaciador-A (I),

donde el oligosacarido es un residuo de pentasacarido cargado negativamente de Formula (II) donde R5 es OSO3 - o alcoxi C1-C8, estando compensada la carga por contraiones cargados positivamente, y donde el residuo de pentasacarido esta derivado de un pentasacarido que tiene una actividad anti-Xa (mediada por AT-III) per se; el espaciador es un residuo conector flexible esencialmente farmacologicamente inactivo que tiene una longitud de la cadena de 10 a 70 atomos; A es el residuo -CH[NH-SO2-R1][CO-NR2-CH(4-benzamidina)-CO-NR3R4], donde R1 es fenilo, naftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, (iso)quinolinilo, tetrahidro(iso)quinolinilo, 3,4-dihidro-1Hisoquinolinilo, cromanilo o el grupo alcanfor, cuyos grupos pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o mas sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-C8 o alcoxi C1-C8; y donde R2 y R3 son independientemente H o alquilo C1-C8; R4 es alquilo C1-C8 o cicloalquilo C3-C8; o R3 y R4 junto con el atomo de nitrogeno a los que estan unidos son un anillo de 4 a 8 miembros no aromatico que contiene opcionalmente otro heteroatomo, estando el anillo sustituido opcionalmente con alquilo C1-C8 o SO2-alquilo C1-C8; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, o uno de sus derivados donde el grupo amino del radical amidino esta protegido con hidroxilo o un grupo alcoxi(C1-C6)carbonilo; donde el espaciador del compuesto de formula I comprende adicionalmente al menos un enlace covalente con un residuo de biotina

5 La presente invención se refiere a nuevos inhibidores duales antitrombóticos que comprenden un residuo de biotina

o un derivado de biotina, a un procedimiento para su preparación, a composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos como ingredientes activos, así como al uso de dichos compuestos para la fabricación de medicamentos.

El reciente progreso en la investigación de sustancias farmacéuticas activas sintéticas que tienen propiedades antitrombóticas similares o superiores cuando se comparan con la heparina, ha dado como resultado el diseño de nuevos inhibidores duales p. ej. como se describe en los documentos WO 99/65934 y WO 01/42262. Esos compuestos son típicamente productos conjugados de un residuo oligosacárido conectado a un inhibidor de trombina directo por medio de un espaciador esencialmente farmacológicamente inactivo. El residuo oligosacárido de la molécula presenta actividad anti-Xa mediada por anti-trombina III (AT-III). De este modo, los nuevos productos conjugados tienen actividad dual, antitrombótica y anticoagulante.

Un excelente ejemplo de la nueva clase de inhibidores duales es el compuesto indicado con el nombre en clave Org 42675, en el que un pentasacárido está conectado con un inhibidor directo de trombina, que tiene la siguiente estructura:

**(Ver fórmula)**

Los estudios de trombosis experimental han demostrado que este compuesto, además de potentes propiedades anticoagulantes y antitrombóticas, también inhibe la actividad de la trombina unida a coágulo. Adicionalmente, Org 42675 parece que es altamente eficaz en la prevención de la reoclusión trombótica que sigue a la trombosis de trombos arteriales oclusivos. El compuesto presenta una vida media prolongada 10 veces en comparación con el inhibidor de trombina directo no conjugado correspondiente derivado de NAPAP. En comparación con el argatroban, la heparina y el fondaparinux, Org 42675 mostró una eficacia mejorada. (Journal of Thrombosis and Haemostasis, Volumen 1, Tema 9, Página 1945, 2003). Se considera que el potencial clínico de los nuevos inhibidores duales es significativo y por lo tanto ya se han iniciado las pruebas clínicas.

Como medida preventiva, dentro del campo de la terapia anticoagulante y antitrombótica, existe la necesidad de un antídoto que sea capaz de neutralizar o minimizar eficazmente la actividad del fármaco anticoagulante o 35 antitrombótico utilizado. Esto es porque es bien conocido que se puede desencadenar una hemorragia en un paciente bajo tratamiento debido a cualquier causa accidental. Adicionalmente, puede ser necesario intervenir quirúrgicamente en un paciente bajo tratamiento antitrombótico o anticoagulante. Por añadidura, durante algunos procedimientos quirúrgicos, los anticoagulantes se pueden utilizar a una alta dosis para prevenir la coagulación sanguínea y es necesario neutralizarlos al final de la operación. Por lo tanto es ventajoso tener disponibles agentes

40 antitrombóticos/anticoagulantes que puedan ser neutralizados con el fin de detener la actividad antitrombótica/anticoagulante en cualquier momento.

En el documento US 2004/0024197 se describe que, en caso de emergencia, la actividad antitrombótica de ciertos polisacáridos se puede reducir utilizando avidina, si esos polisacáridos contienen al menos un enlace covalente con 45 biotina o un derivado de biotina.

40

45

50

Buijsman et al., (Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 9 (1999) 2013-2018) describen la síntesis de una molécula antitrombótica que consiste de un pentasacárido de heparina conjugado con el inhibidor de sitio activo NAPAP.

El documento US 2003 114361 describe un producto conjugado de pentasacárido de NAPAP.

La presente invención se refiere a inhibidores duales neutralizables novedosos derivados de los inhibidores duales descritos en el documento WO 99/65934 y el documento WO 01/42262. Se ha encontrado que cierta "marca" de biotina, refiriéndose también el grupo

**(Ver fórmula)**

en este documento como "BT" (derivado de ácido hexahidro-2-oxo-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-pentanoico, preferiblemente el isómero D(+)) o uno de sus análogos, se puede anclar a, o introducir en, la estructura del compuestos descrito en el documento WO 99/65934 y el documento WO 01/42262, dando como resultado inhibidores duales neutralizables.

De este modo, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I)

oligosacárido-espaciador-A (I),

**(Ver fórmula)**

se; el espaciador es un residuo conector flexible esencialmente farmacológicamente inactivo que tiene una longitud de la cadena de 10 a 70 átomos; A es el residuo -CH[NH-SO2-R1][CO-NR2-CH(4-benzamidin)-CO-NR3R4], donde R1 es fenilo, naftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, (iso)quinolinilo, tetrahidro(iso)quinolinilo, 3,4-dihidro-1Hisoquinolinilo, cromanilo o el grupo alcanfor, cuyos grupos pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-C8 o alcoxi C1-C8; y donde R2 yR3 son independientemente H o alquilo C1-C8; R4 es alquilo C1-C8 o cicloalquilo C3-C8; o R3 yR4 junto con el átomo de nitrógeno a los que están unidos son un anillo de 4 a 8 miembros no aromático que contiene opcionalmente otro heteroátomo, estando el anillo sustituido opcionalmente con alquilo C1-C8 o SO2-alquilo C1-C8;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus derivados donde el grupo amino del radical amidino está protegido con hidroxilo o un grupo alcoxi(1-6)carbonilo; donde el espaciador del compuesto de fórmula I comprende adicionalmente al menos un enlace covalente con un residuo de biotina.

Los compuestos de la invención son inhibidores duales, que tienen un perfil mixto afinable tanto de actividad antitrombina (factor IIa) directa, no mediada como de actividad anti-Xa mediada por anti-trombina III (AT-III). Los compuestos de la invención tienen una larga vida media en plasma y, como resultado, poseen una actividad antitrombina prolongada en comparación con NAPAP o sus derivados referidos previamente en las publicaciones especializadas. Por añadidura, los compuestos de la invención pueden escapar de la acción neutralizadora del factor plaquetario 4 (PF4). Su baja toxicidad también es un aspecto ventajoso de los compuestos de esta invención.

Los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento y la prevención de las enfermedades mediadas con la trombina y asociadas con la trombina. Esto incluye varios estados trombóticos y protrombóticos en los que se activa la cascada de la coagulación que incluyen, pero no están limitados a, trombosis venosa profunda, embolia pulmonar, tromboflebitis, oclusión arterial a partir de trombosis o embolia, reoclusión arterial durante o después de angioplastia o trombolisis, restenosis siguiente a lesión arterial o procedimientos cardiológicos invasivos, trombosis o embolia venosa postoperatoria, aterosclerosis aguda o crónica, ictus, infarto de miocardio, cáncer y

40

metástasis, y enfermedades neurodegenerativas. Los compuestos de la invención también se pueden utilizar como anticoagulantes en circuitos de sangre extracorpóreos, según sea necesario en diálisis y cirugía.

Los compuestos de la invención también se pueden utilizar como anticoagulantes in vitro.

La marca de biotina en el compuesto de la presente invención es rápidamente reconocida por, y unida a, un antídoto específico, que es la avidina (The Merck Index, Decimosegunda edición, 1996, M.N. 920, páginas 151-152) o estreptavidina, dos proteínas tetraméricas con sus respectivas masas iguales a aproximadamente 66.000 y 60.000 Da que tienen una afinidad muy elevada por la biotina. De este modo, en una situación de emergencia, la acción del inhibidor dual de esta invención puede ser fácilmente neutralizada utilizando avidina o estreptavadina, por ejemplo mediante inyección de una disolución farmacéutica que las contiene. Los análogos de avidina y estreptavidina que tienen elevada afinidad por la biotina se pueden utilizar de un modo similar. El complejo antídoto-inhibidor inactivo resultante es aclarado de la circulación sanguínea.

Los residuos de biotina, que se pueden utilizar como marca de acuerdo con esta invención, se pueden seleccionar entre los residuos de biotina mostrados en el catálogo Pierce, 1999-2000, páginas 62 a 81, por ejemplo 6biotinamidohexanoato, 6-(6-biotinamidohexanamido)hexanoato,... [Seguir leyendo]

1. un compuesto antitrombótico de fórmula (I) oligosacárido-espaciador-A (I),

donde el oligosacárido es un residuo de pentasacárido cargado negativamente de Fórmula (II)

-

donde R5 es OSO3 o alcoxi C1-C8, estando compensada la carga por contraiones cargados positivamente, y donde 10 el residuo de pentasacárido está derivado de un pentasacárido que tiene una actividad anti-Xa (mediada por AT-III)

per se;

el espaciador es un residuo conector flexible esencialmente farmacológicamente inactivo que tiene una longitud de la cadena de 10 a 70 átomos; A es el residuo -CH[NH-SO2-R1][CO-NR2-CH(4-benzamidina)-CO-NR3R4],donde R1 es fenilo, naftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, (iso)quinolinilo, tetrahidro(iso)quinolinilo, 3,4-dihidro-1Hisoquinolinilo, cromanilo o el grupo alcanfor, cuyos grupos pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-C8 o alcoxi C1-C8; y donde R2 yR3 son independientemente H o alquilo C1-C8; R4 es alquilo C1-C8 o cicloalquilo C3-C8; o R3 yR4 junto con el átomo de nitrógeno a los que están unidos son un anillo de 4 a 8 miembros no aromático que contiene opcionalmente otro heteroátomo, estando el anillo sustituido opcionalmente con alquilo C1-C8 o SO2-alquilo C1-C8;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus derivados donde el grupo amino del radical amidino está protegido con hidroxilo o un grupo alcoxi(C1-C6)carbonilo; donde el espaciador del compuesto de fórmula I comprende adicionalmente al menos un enlace covalente con un residuo de biotina.

**(Ver fórmula)**

30 3. El compuesto de la reivindicación 2, donde el residuo de pentasacárido tiene la estructura

**(Ver fórmula)**

4. El compuesto una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde el espaciador tiene una longitud de 10 a 50 átomos, preferiblemente de 16 a 22, y muy preferiblemente de 19 átomos.

5. El compuesto de la reivindicación 4, donde el espaciador tiene una longitud de 16 a 22 átomos.

6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, donde el espaciador comprende al menos un elemento -(CH2CH2O)-.

7. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones s 1 a 6, donde R1 es fenilo o naftilo, sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados entre metilo o metoxi.

8. El compuesto de la reivindicación 7, donde R1 es 4-metoxi-2,3,6-trimetilfenilo.

9. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, donde NR3R4 representa el grupo piperidinil.

10. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, donde R2 es H.

20 11. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, donde el espaciador del compuesto de fórmula I comprende un enlace covalente con un residuo de un análogo de biotina de fórmula -(CH2)4-NR-BT, dondeR es H o alquilo C1-C4 y BT es el residuo

**(Ver fórmula)**

25 12. El compuesto de la reivindicación 11, que es o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus derivados donde el grupo amino del radical amidino está protegido con hidroxilo o un grupo alcoxi(C1-C6)carbonilo.

**(Ver fórmula)**

13. El compuesto de la reivindicación 12, que está en forma de su sal de sodio.

14. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 y agentes auxiliares farmacéuticamente adecuados.

15. Un procedimiento para la preparación del compuesto de fórmula I de la reivindicación 1 que comprende una etapa en la que el radical de benzamidina en el residuo A está en forma de un precursor, que es el grupo 1,2,4ºxadiazolin-5-ona, y se convierte con posterioridad en la benzamidina mediante desprotección.

16. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para su uso en terapia,

17. El uso del compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la trombosis u otras enfermedades relacionadas con la trombina.