Granulado enzimático altamente concentrado y medio de lavado o limpieza que contiene dicho granulado enzimático altamente concentrado.

Detergente o lavavajillas sin fosfatos para lavaplatos, que contiene,

respecto al peso total del lavavajillas

a) Un 0,2% hasta un 7% en peso de granulado enzimático con un contenido en enzimas del 5,5 hasta el 30%en peso en sustancia activa de enzima, donde en el caso de la enzima se trata de una subtilisina, de maneraque puede tratarse de una enzima de referencia o bien de una variante de subtilisina, por lo que en elcaso de la enzima de referencia o de la enzima de partida de la variante se trata de la proteasa alcalina deBacillus amyloliquefaciens (BPN`) y donde en el caso de la enzima se trata de una variante la cual presentauna secuencia de identidad de al menos un 90% respecto a la proteasa de partida a nivel de aminoácido entoda la longitud de la variante;

b) Entre un 5 y un 60% en peso de citrato/ácido cítrico;c) Entre un 10 y un 60% en peso de carbonato.

DESCRIPCIONº Granulado enzimático altamente concentrado y medio de lavado o limpieza que contiene dicho granulado enzimático altamente concentrado La presente invención se refiere al sector de la formulación de granulados enzimáticos y su incorporación en detergentes y productos de lavado. Hace referencia a un lavavajillas para máquina que contiene un granulado enzimático altamente concentrado así como a la utilización de este lavavajillas.

El empleo de enzimas en los detergentes y medios de lavado es habitual desde hace siglos en el estado de la técnica. Sirven para ampliar el espectro de actividad de los medios correspondientes en lo que se refiere a sus actividades especiales. Se destacan las enzimas hidrolíticas como las proteasas, amilasas, lipasas y celulasas. Las tres primeras hidrolizan proteínas, almidones y grasas y por tanto contribuyen a eliminar la suciedad. Las celulasas se emplean en particular por su acción sobre los tejidos. Otro grupo de detergentes o medios de lavado son las enzimas oxidativas, en particular las oxidasas, que en caso de necesidad se utilizan junto con otros componentes y sirven preferiblemente para blanquear las impurezas. Las enzimas como, por ejemplo, las perhidrolasas sirven para producir los agentes blanqueantes in situ. Además de estas enzimas se dispone de otras enzimas que se emplearán en detergentes y medios de lavado, en especial para poder tratar las impurezas especiales de forma óptima, como por ejemplo, pectinasas, beta-glucanasas, mananasas o bien otras hemicelulasas para la hidrólisis de ciertos polímeros vegetales especiales.

Las enzimas establecidas desde hace más tiempo y que se encuentran prácticamente en todos los detergentes y medios de lavado modernos y potentes son las proteasas y en particular las serina proteasas o proteasas serínicas, entre las que se encuentran las subtilasas. Sirven para la disgregación de las impurezas que contienen proteínas. Entre las proteasas de los detergentes y medios de lavado destacan las subtilasas debido a sus propiedades enzimáticas favorables como la estabilidad o el pH óptimo. Además se han descrito otros tipos de proteasas con esta finalidad, por ejemplo, las metaloproteasas.

Las subtilasas (proteasas del tipo de la subtilisina, subtilopeptidasas, EC 3.4.21.62) actúan como endopeptidasas no específicas, es decir, hidrolizan cualquier enlace de amidas ácidas, que se encuentra en el interior de los péptidos o proteínas. Su pH óptimo se sitúa principalmente en una zona claramente alcalina. El artículo “Subtilases: Subtilisinlike Proteases” de R. Siezen, páginas 75-95 en “Subtilisin enzymes”, publicado por R. Bott y C. Betzel, New York, 1996, permite dar una ojeada a esta familia de enzimas. Las subtilasas se forman de forma natural a partir de microorganismos. A continuación se mencionan, en particular, las subtilisinas formadas y secretadas por especies Bacillus como el grupo más significativo dentro de las subtilasas.

Los representantes preferidos de las mismas son las proteasas alcalinas del Bacillus amyloliquefaciens (BPN`) y Bacillus licheniformis (Subtilisin Carlsberg) , la proteasa alcalina PB92, la subtilisina 147 y/o 309 (que se comercializa bajo el nombre comercial de Savinase de Fa. Novozymes A/S, Bagsvaerd, Dänemark) así como las proteasas alcalinas del Bacillus lentus , sobre todo del Bacillus lentus (DSM 5483) y las variantes de estas enzimas obtenidas por mutagénesis.

Haremos referencia a las amilasas como la clase de enzimas siguiente más importante y entre ellas las alfaamilasas ocupan una posición destacada. Se puede contar también con las enzimas amilolíticas como las ciclodextrina-glucanotransferasas (CGtasas) .

Las alfa-amilasas (E.C.3.2.1.1) hidrolizan los enlaces internos a-1, 4-glucosídicos del almidón y polímeros similares al almidón. Las a-amilasas son activas en los medios alcalinos y ese es el motivo por el cual se emplean, ya que los detergentes presentan unos valores de pH alcalinos. Son producidas y segregadas por los microorganismos, es decir por hongos y bacterias, sobre todo por las especies Aspergillus y Bacillus. A parte de estas enzimas naturales se dispone de una amplia gama de variantes que se derivan por mutagénesis y que presentan ventajas específicas según el tipo de aplicación.

Ejemplos de ello son las a-amilasas del Bacillus licheniformis (de la empresa Novozymes bajo el nombre Termamyl® y de la empresa Genencor bajo el nombre Purastar®ST) , de B. amyloliquefaciens (comercializadas por la empresa Novozymes bajo el nombre de BAN®) y de B. stearothermophilus (comercializadas por la empresa Novozymes bajo el nombre Novamyl®) así como sus posteriores avances tanto en medios de lavado como detergentes.

En lo que se refiere a la otra enzima hidrolítica antes mencionada, existe un estado de la técnica amplio, en particular las lipasas y celulasas, que desde hace tiempo se emplean en los detergentes y medios de lavado.

Respecto al empleo de enzimas oxidativas mencionaremos la solicitud de patente WO 97/21796 A1, donde se destaca el empleo de oxidasas alcalinas, en particular de oxidasas de colina. Para ello, la WO 2004/058955 A2 informa sobre los enzimas adecuados. La WO 98/45398 A1 aporta un ejemplo para la perhidrolasa enzimática. Finalmente la WO 2005/124012 A1 publica un sistema de blanqueo enzimático nuevo, que comprende al menos una oxidasa y al menos una perhidrolasa.

Se ha trabajado de forma constante para poder disponer de enzimas nuevas y más adecuadas para el sector técnico de los detergentes y medios de lavado, tanto dentro de las clases de enzimas antes mencionadas como también entre las clases de enzimas que hasta el momento no se habían descrito para este campo de aplicación. Un camino para conseguir las nuevas enzimas, en particular los nuevos representantes en las clases establecidas consiste en detectar hábitats naturales a través de métodos microbiológicos y aislar en ellos los microorganismos, que forman las correspondientes enzimas. Este enfoque o planteamiento se ha ido ampliando de manera que, por ejemplo, el ADN codificado de las proteasas se obtiene directamente de las muestras de origen natural. Para ello puede que se haga referencia a las solicitudes WO 2005/063974 A1 y WO 2005/103244 A1.

Las enzimas naturales (o de referencia) se optimizan mediante procedimientos de mutagénesis conocidos, por ejemplo, para su empleo en medios de lavado y detergentes. Esto se hace con la intención de mejorar los parámetros de potencia y rendimiento, las interacciones con el sustrato, la termoestabilidad o la estabilidad frente a agentes desnaturalizantes o inactivantes como, por ejemplo, frente a tensoactivos o blanqueantes. Si se realizan cambios de secuencias se habla de un diseño proteínico racional.

Una tendencia moderna del desarrollo de los enzimas consiste en combinar elementos de enzimas relacionados unos con otros, conocidos, mediante un procedimiento estadístico para dar nuevos enzimas con unas propiedades no conocidas hasta el momento. Dichos procedimientos se encuentran recogidos bajo el concepto de Directed Evolution. A este grupo pertenecen, por ejemplo, los procedimientos siguientes: El método StEP (Zhao y cols. (1998) , Nat. Biotechnol., tomo 16, pág. 258-261) , Random priming recombination (Shao y cols. (1998) , Nucleic Acids Res., tomo 26, pág. 681-683) , DNA-Shufling (Stemmer, W.P.C. (1994) , Nature, tomo 370, págs. 389-391) o bien RACHITT (Coco, w.m. y cols. (2001) , Nat. Biotechnol., tomo 19, págs. 354-359) . Otro método Shuffling con la denominación “Recombining ligation reaction” (RLR) se ha descrito en WO 00/09679 A1.

Como todos estos trabajos requieren un periodo largo de tiempo, existe una gran necesidad de enzimas que sean adecuadas para su empleo en detergentes y medios de lavado. En particular, el aspecto de la potencia es muy interesante. Puesto que cuanto mayor es el rendimiento de una enzima mejor es el efecto limpiador apreciado por el consumidor final. Al contrario con un componente enzimático de alto rendimiento se pueden conseguir los mismos buenos resultados incluso con concentraciones inferiores, lo que facilita la concepción de las fórmulas correspondientes, crea espacio para otras sustancias y/o disminuye los gastos relacionados con los componentes enzimáticos.

Otro punto de vista a tener en cuenta para el empleo de enzimas en medios de lavado y detergentes es su presentación, es decir la forma física en la que pueden ser añadidos a los medios correspondientes.

Para ello, y en particular para su presentación en una forma sólida existe asimismo un estado amplio de la técnica. Estamos hablando de partículas, o mejor del contenido: granulados (gránulos) , que al juntarse dan lugar a la forma... [Seguir leyendo]

1. Detergente o lavavajillas sin fosfatos para lavaplatos, que contiene, respecto al peso total del lavavajillas a) Un 0, 2% hasta un 7% en peso de granulado enzimático con un contenido en enzimas del 5, 5 hasta el 30% en peso en sustancia activa de enzima, donde en el caso de la enzima se trata de una subtilisina, de manera que puede tratarse de una enzima de referencia o bien de una variante de subtilisina, por lo que en el caso de la enzima de referencia o de la enzima de partida de la variante se trata de la proteasa alcalina de Bacillus amyloliquefaciens (BPN`) y donde en el caso de la enzima se trata de una variante la cual presenta una secuencia de identidad de al menos un 90% respecto a la proteasa de partida a nivel de aminoácido en toda la longitud de la variante; b) Entre un 5 y un 60% en peso de citrato/ácido cítrico; c) Entre un 10 y un 60% en peso de carbonato.

2. Utilización de un detergente para lavaplatos conforme a la reivindicación 1, para eliminar manchas que contienen albúmina en un proceso de lavado en lavaplatos.

3. Método para el lavado de vajilla en una lavaplatos que utiliza un detergente o lavavajillas para lavaplatos conforme a la reivindicación 1.