ENZIMAS TERMOESTABLES MODIFICADAS REVERSIBLEMENTE PARA LA SINTESIS Y LA AMPLIFICACION DE DNA IN VITRO.
La composición que comprende una primera enzima modificada termoestable que muestra actividad exonucleasa 3'',
que prácticamente no muestra actividad DNA-polimerasa y una segunda enzima modificada termoestable que muestra actividad DNA-polimerasa, considerando que la fidelidad del proceso de amplificación se mejora con el uso de la composición en un proceso de amplificación, en comparación con el uso de la segunda enzima solamente y, considerando que dichas primera y segunda enzimas termoestables modificadas se modifican reversiblemente mediante un reactivo inhibidor que provoca prácticamente una inactivación completa de la actividad enzimática, en la que la incubación de dichas primera y segunda enzimas termoestables modificadas en un tampón acuoso a pH alcalino a una temperatura inferior a 25 ºC durante 20 minutos resulta en un aumento no significativo de la actividad de dichas primera y segunda enzimas modificadas termoestables, en la que la incubación a temperatura superior a 50 ºC en untampón acuoso a pH alcalino provoca al menos un aumento del doble en la actividad enzimática en menos de 20 minutos, lo que permite la formación de productos de extensión del cebador.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: ROCHE DIAGNOSTICS GMBH
F.HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: SANDHOFER STRASSE 116,68305 MANNHEIM.
Inventor/es: SOBEK, HARALD, GREIF, MICHAEL.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 30 de Noviembre de 2002.
Fecha Concesión Europea: 18 de Abril de 2007.
Clasificación PCT:
- C12N9/99 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Inactivación de enzimas por tratamiento químico.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.
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