EJE DE POSICIONAMIENTO PARA APARATO DE ENSAYO MULTIPOCILLO.

Un aparato (10) para pruebas dotado de múltiples pocillos que comprende una placa filtrante (12) con múltiples pocillos y una placa receptora (14;

60) que soporta a dicha placa filtrante (12) con múltiples pocillos, cuya placa filtrante (12) con múltiples pocillos tiene una multiplicidad de primeros pocillos (18) que se extienden desde una placa (16), comprendiendo cada uno de dichos primeros pocillos (18) (a ) un miembro hueco (22) que tiene dos aberturas (24) y que se extiende desde dicha placa (16) y (b.) una barrera permeable (26) sujeta alrededor de una abertura inferior (24) de dichas aberturas, y dos vástagos (34, 36) formados sobre la superficie inferior de la placa filtrante (12) que ajustan en unos agujeros (40, 38) practicados en la superficie superior de dicha placa receptora (14), cuya placa receptora (14; 60) tiene uno o más segundos pocillos (19; 62) para acomodar dichos primeros pocillos (18) de la placa filtrante (12), estando conformados dichos vástagos (34, 36) y dichos agujeros (40, 38) para impedir el contacto de dichos primeros pocillos (18) y dichos uno o más segundos pocillos (19; 62) cuando dichos vástagos (34, 36) están totalmente posicionados dentro de dichos agujeros (40, 38) y para permitir el movimiento lateral controlado de dicha placa filtrante (12) con múltiples pocillos con el fin de permitir el contacto de dichos primeros pocillos (18) y dichos uno o más segundos pocillos (19; 62) cuando dichos vástagos (34, 36) se han extraído parcialmente de dichos agujeros (40, 38)

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2002/018374.

Solicitante: MILLIPORE CORPORATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 290 CONCORD ROAD BILLERICA MASSACHUSETTS 01821 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: DESILETS, KENNETH, RISING, DONALD.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 11 de Junio de 2002.

Clasificación PCT:

  • B01D61/18 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01D SEPARACION (separación de sólidos por vía húmeda B03B, B03D, mesas o cribas neumáticas B03B, por vía seca B07; separación magnética o electrostática de materiales sólidos a partir de materiales sólidos o de fluidos, separación mediante campos eléctricos de alta tensión B03C; aparatos centrifugadores B04B; aparato de vórtice B04C; prensas en sí para exprimir los líquidos de las sustancias que los contienen B30B 9/02). › B01D 61/00 Procedimiento de separación que utilizan membranas semipermeables, p. ej. diálisis, ósmosis o ultrafiltración; Aparatos, accesorios u operaciones auxiliares, especialmente adaptados para ello (separación de gases o vapores por difusión B01D 53/22). › Aparatos a este efecto.
  • B01L3/00 B01 […] › B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
  • C12M1/20 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › C12M 1/00 Equipos para enzimología o microbiología. › Campos planos horizontales.

Clasificación antigua:

  • B01D61/18 B01D 61/00 […] › Aparatos a este efecto.
  • B01L3/00 B01L […] › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
  • C12M1/20 C12M 1/00 […] › Campos planos horizontales.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre.

EJE DE POSICIONAMIENTO PARA APARATO DE ENSAYO MULTIPOCILLO.

Fragmento de la descripción:

ANTECEDENTES DEL INVENTO

Este invento se refiere a un aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos para promover interacciones de fluidos tales como mediante la monitorización de metabolismos de células dentro de los pocillos del aparato de pruebas. Más particularmente, este invento se refiere a dicho aparato para pruebas dotado de múltiples 5 pocillos que comprende una placa filtrante con múltiples pocillos y una placa receptora que permite añadir o retirar líquido de la placa receptora sin perturbar a un material tal como las células dentro de los pocillos de la placa filtrante de múltiples pocillos.

En la actualidad, un aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos para probar muestras incluye una placa filtrante con múltiples pocillos, una placa receptora con múltiples pocillos y una tapa. Los pocillos de la placa 10 filtrante con múltiples pocillos incluyen un miembro hueco, típicamente tubular, con un extremo abierto al que se fija una membrana tal como una membrana microporosa. Los miembros tubulares se pueden insertar en una bandeja de alimentación que contiene un medio nutriente de tal manera que las células contenidas en los pocillos se puedan fijar a la membrana y crecer en la misma. Las células se alimentan a medida que los nutrientes pasan desde el medio nutriente a través de la membrana y llegan a las células a una velocidad controlada por el gradiente de 15 concentración de los nutrientes desde el medio hasta las células. El medio nutriente contenido en la bandeja de alimentación se rellena periódicamente para mantener el crecimiento de las células.

Una vez que se ha alcanzado el nivel previsto de crecimiento de las células en la membrana de los pocillos, se puede utilizar la placa filtrante con múltiples pocillos en métodos de ensayo convencionales. Estos métodos de ensayo en general se efectúan mediante el posicionamiento de las membranas y las células en la placa filtrante con 20 múltiples pocillos en los pocillos de la placa receptora con múltiples pocillos, tal como una placa receptora con 96 pocillos situada por debajo de la placa filtrante con múltiples pocillos, o bien tiene justamente el mismo número de pocillos en coincidencia con la placa filtrante/células Los pocillos de la placa receptora con múltiples pocillos contienen una composición líquida a ensayar. La composición que se va a ensayar se difunde en la membrana y luego a través de la misma. Luego, los productos líquidos resultantes contenidos dentro de los pocillos de la placa 25 filtrante con múltiples pocillos o en los pocillos de la placa receptora con múltiples pocillos se ensayan para determinar la capacidad de la composición que se esté ensayando para penetrar la barrera de células.

Un componente importante en el proceso de descubrimiento y desarrollo de fármacos es la determinación de la absorción oral y biodisponibilidad de los compuestos nuevos. Con el fin de realizar esta evaluación en un ensayo rentable, con elevada producción y sensible, es ideal usar un dispositivo in vitro con una multitud de pocillos 30 que contengan células, una pequeña cantidad de material de ensayo, y automatización. Clásicamente, la determinación de las características de absorción oral se realiza usando una estirpe definida de células epiteliales y midiendo la velocidad aparente de transporte del fármaco a través de un monoestrato de las células. Más recientemente, es posible clasificar/ordenar la velocidad pasiva de transporte de los posibles fármacos candidatos usando una barrera de membrana artificial. Los valores generados de estos experimentos in vitro son métodos 35 valiosos para la detección sistemática de los fármacos candidatos con mayores probabilidades de resultados satisfactorios mucho tiempo antes de que se valide la velocidad de absorción oral mediante medidas in vivo. Un experimento típico para determinar las características de absorción de fármacos de un compuesto químico conocido o desconocido se realiza del modo siguiente. El dispositivo con múltiples pocillos se siembra con células epiteliales en la parte más alta del filtro en un medio de nutrientes definido. El mismo medio se añade también a la bandeja de 40 alimentación de un solo pocillo situada debajo y en contacto para paso de fluidos con el dispositivo que contiene las células. Se deja que las células proliferen y se diferencien durante un número de días. El medio nutriente se reemplaza periódicamente con medio fresco para reponer los nutrientes agotados y retirar las células residuales y las células muertas. Al término de un período de crecimiento, las células y el dispositivo con múltiples pocillos se lavan suavemente con un amortiguador isotónico para retirar el medio nutriente residual y de proteínas. En este 45 momento, la placa filtrante con múltiples pocillos se transfiere a la placa receptora con múltiples pocillos y los productos químicos a ensayar se introducen, o bien al compartimiento situado por encima del estrato de células, o bien por debajo del soporte de células y filtro en la bandeja receptora con múltiples pocillos. La cámara opuesta se llena con un amortiguador exento de fármaco y el dispositivo con múltiples pocillos se incuba durante cierto período de tiempo, típicamente a 37º centígrados, con agitación. Si se desean múltiples puntos de tiempo, se puede 50 conseguir la toma de muestras de cualquiera de los dos componentes sin separar el dispositivo. La cantidad de productos químicos y fármacos que se transporta a través de la barrera de células se puede determinar mediante una variedad de métodos analíticos, pero típicamente se determina por cromatografía de líquidos- espectrometría de masas- espectrometría de masas (en adelante LC- MS/MS).

En los diseños de la técnica anterior, se producen efectos de acoplamiento perjudiciales entre la placa 55 filtrante con múltiples pocillos y una placa receptora con múltiples pocillos debidos a la acción de fuerzas capilares entre las paredes exteriores de los pocillos de la placa filtrante y las paredes interiores de los pocillos de la placa receptora. Estas fuerzas dan lugar a que el líquido contenido en la placa receptora con múltiples pocillos se traslade desde la pared del pocillo hasta la parte más alta de la placa receptora con múltiples pocillos, lo que resulta en un derrame al interior de un pocillo adyacente y en su contaminación. Esta contaminación es inaceptable. 60

Además, la placa filtrante con múltiples pocillos y la placa receptora, ya sea una bandeja de alimentación con un solo pocillo o una placa receptora con múltiples pocillos, se deben separar fácilmente una de otra, en particular cuando la placa con múltiples pocillos de pruebas se procesa en un entorno automatizado.

Es también conveniente retirar cualesquiera gotitas de líquido retenidas sobre las superficies inferiores de las membranas durante la retirada de la placa filtrante con múltiples pocillos del líquido contenido en los pocillos de 5 la placa receptora, ya se trate de una bandeja de alimentación de un solo pocillo o de una placa receptora con múltiples pocillos.

El documento US5801055A describe un conjunto de placa de cultivo con múltiples pocillos que comprende una placa filtrante con múltiples pocillos y una placa receptora con múltiples pocillos que soporta a la placa filtrante con múltiples pocillos. La placa filtrante con múltiples pocillos tiene una agrupación de pocillos que se extienden 10 desde una placa y de los que cada uno comprende un miembro hueco con dos aberturas, estando cerrada la inferior de dichas aberturas por una barrera permeable. La placa receptora tiene un número correspondiente de pocillos para alojar a los pocillos de la placa filtrante. El posicionamiento de la placa filtrante con respecto a la placa receptora se consigue mediante una faldilla periférica de la placa filtrante que se acopla con un reborde periférico de la placa receptora. 15

El documento US6159368A describe otro aparato de micro-filtración con múltiples pocillos que comprende una placa filtrante con múltiples pocillos, una placa receptora con múltiples pocillos y una bandeja directora de goteo colocada entre las mismas.

SUMARIO DEL INVENTO

De acuerdo con lo anteriormente expuesto, sería conveniente proveer un aparato para pruebas dotado de 20 múltiples pocillos que comprende una placa receptora y una placa filtrante con múltiples pocillos que facilite la extracción del líquido en exceso de las paredes de la placa filtrante con múltiples pocillos. Adicionalmente, sería conveniente proveer dicho aparato para pruebas dotado...

 


Reivindicaciones:

1. Un aparato (10) para pruebas dotado de múltiples pocillos que comprende

una placa filtrante (12) con múltiples pocillos y una placa receptora (14; 60) que soporta a dicha placa filtrante (12) con múltiples pocillos,

cuya placa filtrante (12) con múltiples pocillos tiene una multiplicidad de primeros pocillos (18) que se 5 extienden desde una placa (16), comprendiendo cada uno de dichos primeros pocillos (18)

(a ) un miembro hueco (22) que tiene dos aberturas (24) y que se extiende desde dicha placa (16) y

(b.) una barrera permeable (26) sujeta alrededor de una abertura inferior (24) de dichas aberturas, y 10

dos vástagos (34, 36) formados sobre la superficie inferior de la placa filtrante (12) que ajustan en unos agujeros (40, 38) practicados en la superficie superior de dicha placa receptora (14),

cuya placa receptora (14; 60) tiene uno o más segundos pocillos (19; 62) para acomodar dichos primeros pocillos (18) de la placa filtrante (12), estando conformados dichos vástagos (34, 36) y dichos agujeros (40, 38) para impedir el contacto de dichos primeros pocillos (18) y dichos uno o más segundos pocillos (19; 62) cuando dichos 15 vástagos (34, 36) están totalmente posicionados dentro de dichos agujeros (40, 38) y para permitir el movimiento lateral controlado de dicha placa filtrante (12) con múltiples pocillos con el fin de permitir el contacto de dichos primeros pocillos (18) y dichos uno o más segundos pocillos (19; 62) cuando dichos vástagos (34, 36) se han extraído parcialmente de dichos agujeros (40, 38).

2. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según la reivindicación 1, en donde dichos vástagos 20 (34, 36) tienen una superficie biselada al menos a lo largo de las partes más bajas de los mismos.

3. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según las reivindicaciones 1 ó 2, en donde uno (40) de dichos agujeros tiene un perímetro de tres lados y un segundo (38) de dichos agujeros está conformado como una ranura, un óvalo, o un rectángulo.

4. El aparato para pruebas dotados de múltiples pocillos según las reivindicaciones 1 ó 2, en el que uno 25 (40) de dichos agujeros tiene un perímetro de tres lados y un segundo (38) de dichos agujeros está conformado como una ranura.

5. El aparato dotado de múltiples pocillos de la reivindicación 1, que tiene más de dos vástagos (34, 36) y dos agujeros (40, 38).

6. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, 30 en el que un agujero (20) de acceso a través de dicha placa filtrante (12) está posicionado junto a cada uno de dichos primeros pocillos (18).

7. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que la barrera permeable (26) se selecciona del grupo que consiste en una membrana, una tela de vidrio, un tejido de vidrio, una hoja de plástico tejida y una hoja de plástico sin tejer. 35

8. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que la placa receptora es una placa receptora (14) con múltiples pocillos.

9. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el número de segundos pocillos (19) de la placa receptora (14) corresponde en número y posición al número de primeros pocillos (18) de la placa filtrante (12). 40

10. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según la reivindicación 9, en el que cada uno de dichos segundos pocillos (19) se ha dimensionado para acomodar uno de dichos primeros pocillos (18).

11. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que la placa receptora es una placa (60) de un solo pocillo.

12. El aparato para pruebas dotado de múltiples pocillos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 45 11, en el que dichos vástagos (34, 36) son más largos que dichos miembros huecos (22) de dichos primeros pocillos (18).


 

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