Un compuesto que bloquea un receptor inhibidor de una célula asesina natural para su uso en el tratamiento deuna enfermedad viral causada por VIH en un sujeto humano que lo necesita,

en el que el sujeto humano ha sidotratado con terapia antirretroviral altamente activa y en el que el compuesto es un anticuerpo que se une al Receptorsimilar a Ig de Células Asesinas 2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3 y que bloquea la inhibición mediada por KIR2DL1,KIR2DL2 y KIR2DL3 de citotoxicidad de células NK..

Composiciones y procedimientos de tratamiento de una infeccion viral Campo de la invención La presente invencion se refiere a procedimientos y composiciones para el tratamiento de infecciones virales tales como VIH (Virus de Inmunodeficiencia Humana) y VHC (Virus de Hepatitis C) . Mas particularmente, la invencion se refiere al uso de un anticuerpo monoclonal (mAb) especifico para uno o mas receptores similares a Ig de celulas Asesinas humanas (KIR) para tratamiento de estas y otras enfermedades virales. En una realizacion particular, la invencion se refiere al uso de tales mAb en el tratamiento de pacientes de VIH que se han sometido a Terapia Antirretroviral Altamente Activa (HAART ) . En otra realizacion particular, la i nvencion se refi ere al uso de un anticuerpo terapeutico especifico para un a molecula de superficie expresada en celulas infectadas con virus en combinacion con un mAb (u otro compuesto) que se une a y bloquea a los receptores KIR inhibidores de celulas asesinas naturales y permite una p otenciacion de la c itotoxicidad de celulas as esinas naturales en sujetos mamiferos con el fin de p otenciar la eficacia del tratamiento en sujetos humanos, particularmente a traves de u n aumento del mecanismo de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (ADCC) que conduce a la erradicacion de celulas infectadas viralmente.

Antecedentes de la invención

Diversas estrategias terapeuticas en seres humanos se basan en el uso de anticuerpos terapeuticos. Esto incluye, por ejemplo, el uso de antic uerpos terapeuticos desarrollados para agotar celulas diana, particularmente celulas enfermas tales como celulas infectadas viralmente, celulas tumorales u otras celulas patogenas. Tales anticuerpos son tipicamente anticuerpos monoclonales, de especies de gamma inmunoglobulina (IgG) , tipicamente con la parte Fc de IgG1 o IgG3. Estos anticuerpos pueden ser anticuerpos nativos o recombinantes, anticuerpos de raton humanizados (es decir, que comprenden dominios funcionales de diversas especies, tipicamente parte Fc de origen humano o de primate no humano y region variable o region determinante de complementariedad (CDR) de origen de raton) . Como alternativa, el anticuerpo monoclonal puede ser completamente humano a traves de inmunizacion en ratones transgenicos de locus de Ig humana u obtenido a traves de bibliotecas de ADNc obtenidas a partir de celulas humanas. Un ejemplo particular de tales anticuerpos terapeuticos es rituximab (Mabthera®, Rituxan®) , que es un anticuerpo monoclonal anti-CD20 quimerico preparado con las regiones constantes y1 y K humanas (por lo tanto con parte Fc de IgG1 humana) enlazadas a dominios variables murinos que confieren especificidad de CD20. En los ultimos anos, rituximab ha modificado considerablemente la estrat egia terapeutica frente a malig nidades linfoproliferativas de, partic ularmente, linfomas no Ho dgkin (NHL) . 0tros ejempl os de anticu erpos de IgG1 humanizados incluyen alemtuzumab (Campath-1H®) , que se usa en el tratamiento de malignidades de celulas B o trastuzumab (Herceptin®) , que se usa en el tratamiento de cancer mamario. En la tecnica se divulgan ejemplos adicionales de anticuerpos terapeuticos en desarrollo.

El mecanismo de accion de los anticuerpos terapeuticos se desarrollo para el agotamiento de celulas que portan el antigeno reconocido especificamente por el anticuerpo. Este agotamiento se puede mediar a traves de al menos cuatro mecanismos: ADCC, lisis dependiente de complemento, fagocitosis y efectos antitumorales directos, por ejemplo inhibicion de crecimiento tumoral mediante bloqueo mediado por mA b de senalizacion de receptor de crecimiento.

Aunque estos anticuerpos representan un enfoque novedoso frente a terapia humana, particularmente en el tratamiento de neoplasias, los mismos no siempre muestran una eficacia marcada. Por ejemplo, aunque rituximab, en solitario o en combinacion con quimioterapia ha demostrado ser eficaz en el tratamiento de NHL de grado bajo, intermedio y elevado, del 30% al 50% d e los pacientes con NHL de grado bajo no tienen respuesta clinica a rituximab. Se ha sugerido que el nivel de expresion de CD20 en celulas de linfoma, la presencia de carga tumoral elevada en el momento del tratamiento o las concentraciones de rituximab en suero bajas pueden explicar la 45 carencia de eficacia de rituximab en algunos pacientes. Sin embargo, las causas reales del fracaso del tratamiento permanecen en su mayoria desconocidas. Se ha descubierto previamente que la eficacia para la destruccion de celulas tumorales de rituximab se puede potenciar reforzando ADCC mediante celulas asesinas naturales (NK) . Un mecanismo mediante el cual las celulas NK pueden destruir celulas diana es mediante ADCC, cuando un mAb se une con la parte especifica de antigeno a un antigeno en una celula diana y al mismo tiempo la parte Fc del mAb se une a un receptor de Fc (denominado CD16) en celulas NK. Esto conduce la activacion de CD16 en la celula NK, lo cual desencadena la activacion de la maquinaria citolitica de celulas NK. Sin embargo, las celulas NK tambien expresan receptores inhibidores, tales como KIR, que envian senales negativas a las celulas NK, equilibrando de este modo las senales positivas, por ejemplo, transducidas a traves de CD16. Se ha observado que mediante el bloqueo de los receptores KIR inhibidores, usando mAb que se une a KIR y evita su funcion, se puede potenciar la 55 senalizacion estimuladora a traves de CD16, conduciendo a una destruccion por NK aumentada de celulas diana tumorales, en presencia de mAb que se pueden unir simultaneamente a un antigeno en la diana y a CD16 en celulas NK.

Los documentos W02005003168 y W02005003172 describen el uso de anticuerpos anti-KIR de reaccion cruzada para tratar, por ejemplo, cancer, una enfermedad infecciosa o un trastorno inmune. El documento W02005009465

describe elusode un anticuerpo que bloquea un receptor inhibidor de celulas NK y un anticuerpo terapeutico que puede estar unido por CD16 para tratar cancer, una enfermedad infecciosa o un trastorno inmune.

Ahmad y Ahmad (Current HIV research, 2007; 1:295-307) divulga la evasion de VIH de respuesta de celulas NK del huesped.

La memoria descriptiva divulga un procedimiento para potenciar la respuesta de ADCC mediada por NK hacia celulas infectadas por virus en presencia de mAb terapeuticos especificos para antigenos expresados en celulas infectadas viralmente, como un tratamiento de infecciones virales, por ejemplo infecciones por VIH.

Sumario de la invención

La memoria descriptiva divulga enfoques novedosos para tratar VIH y para pote nciar la eficacia de anticuerpos terapeuticos para el tratamiento de infecciones virales.Estos enfoques se basan en un subgrupo especifico de pacientes con VIH que son adecuados para tratamiento con compuestos que se dirigen a receptores inhibidores de celulas NK yen un aumento del mecanismo de ADCC in vivo, cuando se inyectan anticuerpos terapeuticos. De hecho, la presente invencion actualmente proporciona composiciones novedosas y procedimientos que superan la dificultad actual relacionada con la eficacia baja de anticuerpos terapeuticos en el tratamiento de infecciones virales. Se demuestra en la presente invencion que las celulas NK de un individuo tienen mala ADCC mediada por mAb (anticuerpos monoclonales) terapeutica debido a que esta inhibida por receptores inhibidores en las celulas NK. Preferentemente, un aumento en el mecanismo de ADCC se consigue mediante la administracion de compuestos que bloquean el receptor inhibidor de celulas asesinas naturales y permite una potenciacion de citotoxicidad de celulas asesinas naturales en sujetos mamiferos. Preferentemente el compuesto es un anticuerpo o un fragmento del mismo. Los anticuerpos reaccionan con un receptor inhibidor de celulas NK, es decir moleculas de receptor inhibidor d e c elulas Ases inas (KIR o CD 941NKG2A1C) en ce lulas NK y ne utralizan sus senales inhibidoras, aumentando de ese modo su actividad de ADCC.

Por consiguiente, en un aspecto, la memoria descriptiva divulga un procedimiento de tratamiento de una enfermedad viral causada por VIH en un sujeto humano que lo necesita, que comprende administrar al sujeto humano un primer compuesto que bloquea un receptor inhibidor de una celula NK, en el que el sujeto humano se ha tratado con terapia antirretroviral altamente activa (HAART) , en el que el compuesto es un anticuerpo que se une a KIR2DL1, KIR2DL2, y KIR2DL3 y que bloquea la inhibicion mediada por KIR2DL1-, KIR2DL2-, y KIR2DL3- de citotoxicidad de celulas NK. En otro aspecto, el anticuerpo compite con anticuerpo monoclonal DF200 en la union a al menos uno de KIR2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3 o con anticuerpo monoclonal 1-7F9en la... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto que bloquea un receptor inhibidor de una celula asesina natural parasu uso en el tratamiento de una enfermedad viral causada por VIH en un sujeto humano que lo necesita, en el que el sujeto humano ha sido tratado con terapia antirretroviral altamente activa y en el que el compuesto es un anticuerpo que se une al Receptor similar a Ig de Celulas Asesinas 2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3 y que bloquea la inhibicion mediada por KIR2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3 de citotoxicidad de celulas NK.

2. El compuesto de la reivindicacion 1, para su uso de acuerdo con la reivindicacion 1 en el que el anticuerpo inhibe especificamente la union de moleculas de HLA-C a receptores KIR2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3.

3. El compuesto de la reiv indicacion 1, para su uso d e acuerdo con la reivindicacion 1 en e l que el anticuerpo

compite con un anticuerpo producido por el hibridoma depositado como CNCM I-3224, en la union a al menos uno de KIR2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3.

4. El compuesto de la reiv indicacion 1, para su uso d e acuerdo con la reivindicacion 1 en e l que el anticuerpo compite con un anticuerpo que comprende las secuencias de cadena variable pesada (VH) y variable ligera (VL) de SEC ID N°: 1 y SEC ID N°: 2, respectivamente, en la union a al menos uno de KIR2DL1, KIR2DL2 y KIR2DL3.

5. El compuesto de la reivindicacion 4, para su uso de acuerdo con la reivindicacion 1 en el que el anticuerpo comprende las secuencias de cadena variable pesada (VH) y variable ligera (VL) de SEC ID N°: 1 y SEQ ID N°: 2, respectivamente.