COMPOSICIONES Y PROCEDIMIENTOS PARA EL TRATAMIENTO Y DIAGNÓSTICO DE TRASTORNOS INMUNITARIOS.

Composiciones y procedimientos para el tratamiento y diagnóstico de trastornos inmunitarios Introducción La presente invención se refiere a procedimientos y composiciones para el tratamiento de trastornos inmunitarios, especialmente trastornos relacionados con linfocitos T cooperadores (TH) y similares a linfocitos TH. La invención proporciona procedimientos de diagnóstico y composiciones para el tratamiento de tales trastornos, y para monitorizar la eficacia de compuestos usados en ensayos clínicos. 2. Antecedentes de la invención Se reconocen dos tipos distintos de linfocitos T: linfocitos T citotóxicos CD8 + (CTL) y linfocitos T cooperadores CD4 + (linfocitos TH). Los CTL reconocen y destruyen células que presentan xenoantígenos en sus superficies. Los precursores de CTL presentan preceptores de linfocitos T que reconocen péptidos procesados derivados de proteínas exógenas, junto con moléculas de MHC de clase I, sobre otras superficies celulares. Este procedimiento de reconocimiento provoca la activación, la maduración y la proliferación de los CTL precursores, dando como resultado clones de CTL que pueden destruir las células que presentan los antígenos reconocidos como xenoantígenos. Los linfocitos TH están implicados en las formas tanto humorales como mediadas por células de las respuestas inmunitarias efectoras. Con respecto a la respuesta inmunitaria humoral, o de anticuerpo, se producen anticuerpos por los linfocitos B a través de interacciones con linfocitos TH. Específicamente, los antígenos extracelulares se endocitan por células que presentan antígenos (APC), se procesan, y se presentan de forma preferente junto con moléculas de complejo principal de histocompatibilidad de clase II (MHC) para linfocitos TH CD4 + restringidos a MHC de clase II. Estos linfocitos TH activan a su vez linfocitos B, dando como resultado la producción de anticuerpos. La respuesta inmunitaria mediada por células o celular, funciona para neutralizar microbios que habitan en lugares intracelulares. Los xenoantígenos, tales como, por ejemplo, antígenos víricos, se sintetizan dentro de células infectadas y se presentan sobre las superficies de tales células junto con moléculas de MHC de clase I. Esto, luego, conduce a la estimulación de los CTL CD8 + restringidos a MHC de clase I. Algunos agentes, tales como micobacterias, que provocan tuberculosis y lepra, son engullidos por macrófagos y procesados en vacuolas que contienen enzimas proteolíticas y otras sustancias tóxicas, aunque estos componentes macrófagos pueden destruir y digerir la mayoría de los microbios, agentes tales como micobacterias sobreviven y se multiplican. Sin embargo, los antígenos de los agentes son procesados por los macrófagos y se presentan de forma preferente junto con moléculas de MHC de clase II para linfocitos TH CD4 + restringidos a MHC de clase II, que se estimulan para segregar interferón-, que, a su vez, activa macrófagos. Esta activación da como resultado células que presentan un incremento en su capacidad bactericida. Los linfocitos TH están compuestos al menos de dos subpoblaciones distintas, denominadas subpoblaciones de linfocitos TH1 y TH2. La evidencia sugiere que los subtipos TH1 y TH2 representan poblaciones extremadamente polarizadas de linfocitos TH. Aunque estas subpoblaciones se descubrieron originalmente en sistemas murinos (revisados en Mosmann, T.R. y Coffman, R.L., 1989, Ann. Rev. Immunol. 7:145), también se ha establecido en seres humanos la existencia de subpoblaciones similares a TH1 y TH2 (Del Prete, A.F. y cols., 1991, J. Clin. Invest. 88:346; Wiernenga, E.A. y cols., 1990, J. Imm. 144:4651; Yamamura, M. y cols. 1991, Science 254:277; Robinson, D. y cols., 1993, J. Allergy Clin. Imm. 92:313). Aunque los linfocitos similares a TH1 y TH2 pueden representar las subpoblaciones de linfocitos TH más extremadamente polarizadas, otras subpoblaciones de linfocitos TH, tales como linfocitos TH0 (Firestein, G.S. y cols., 1989, J. Imm. 143:518), representan linfocitos TH que tienen características de subpoblaciones de linfocitos TH1 y TH2. Parece que las células similares a TH1 y TH2, funcionan como parte de las diferentes funciones efectoras del sistema inmunitario (Mosmann, T.R. y Coffmann, R.L., 1989, Ann. Rev. Imm. 1:145). Específicamente, las células similares a TH1 dirigen el desarrollo de la inmunidad mediada por células, provocando defensas del huésped mediadas por fagocitos, y están asociadas con la hipersensibilidad retardada. En consecuencia, las infecciones con microbios intracelulares tienden a inducir respuestas de tipo TH1. Los linfocitos TH2 conducen respuestas inmunitarias humorales, que se asocian, por ejemplo, con defensas frente a determinados parásitos helmínticos, y están implicados en respuestas de anticuerpos y alérgicas. Se ha observado que la capacidad de los diferentes tipos de linfocitos TH para conducir diferentes respuestas efectoras inmunitarias es debida a las combinaciones exclusivas de citocinas que se expresan dentro de una subpoblación de linfocitos TH particular. Por ejemplo, se sabe que los linfocitos TH1 segregan interleucina-2 (IL-2), interferón- (IFN-), y linfotoxina, mientras que los linfocitos TH2 segregaron interleucina-4 (IL-4), interleucina-5 (IL- 5) e interleucina-10 (IL-10). 2 E06003809 25-10-2011   E06003809 25-10-2011 Se cree que las subpoblaciones de TH1 y TH2 surgen de un precursor indiferenciado común (denominado THP). Por ejemplo, se pueden inducir linfocitos CD4+ indiferenciados de ratones que expresen un único receptor de linfocitos T transgénico para que se desarrollen tanto el tipo de linfocitos TH1 como el TH2. La condición de la estimulación de antígeno, incluyendo la naturaleza y la cantidad de antígeno implicado, el tipo de células que presentan antígenos, y el tipo de moléculas de hormonas y citocinas presentes, parece representar los determinantes del patrón de la diferenciación de TH1 frente a TH2, perteneciendo, quizás, el papel decisivo a las citocinas presentes. Con una serie de posibles determinantes tan compleja, un recuento completo de los factores exactos importantes en la conducción de la diferenciación de TH1 o TH2 es, en gran parte, desconocido. Además, se ha observado recientemente que, además de los linfocitos TH CD4 + , los CTL CD8 + , bajo determinadas condiciones, también pueden presentar perfiles citocínicos similares a TH1 o similares a TH2 (Seder, R.A. y cols., 1995, J. Cad. Med. 181:5-7; Manetti, R. y cols., 1994, J. Cad. Med. 180:2407-2411; Maggi, E. y cols., 1994, J. Cad. Med. 180:489-495). Aunque actualmente se desconoce el papel funcional preciso de estos linfocitos similares a TH CD8 + , parece que estas subpoblaciones celulares tienen una gran relevancia para respuestas inmunitarias frente a agentes infecciosos, tales como virus y parásitos intracelulares. Una vez se expanden las subpoblaciones de TH1 y TH2, los tipos de linfocitos tienden a regularse negativamente entre sí a través de las acciones de citocinas únicas a cada una. Por ejemplo, el IFN- producido por TH1 regula negativamente linfocitos TH2, mientras que la IL-10 producida por TH2 regula negativamente linfocitos TH1. Además, las citocinas producidas por T1 y T2 antagonizan las funciones efectoras entre sí (Mosmann, T.R. y Moore, 1991, Immunol. Today 12:49). A menudo, el fallo al controlar o al resolver un proceso infeccioso da como resultado una respuesta inmunitaria inapropiada, en lugar de insuficiente, y puede ser la razón de muchos trastornos inmunológicos. Estos trastornos pueden incluir, por ejemplo, condiciones atópicas (es decir, afecciones alérgicas mediadas por IgE), tales como asma, alergia, incluyendo rinitis alérgica, dermatitis, incluyendo soriasis, sensibilidades a patógenos, enfermedad inflamatoria crónica, autoinmunidad específica de órganos, rechazo de injerto y enfermedad de injerto contra huésped. Por ejemplo, las formas de leishmaniasis humana y murina que no cicatrizan son resultado de respuestas inmunitarias dominadas similares a TH2 fuertes pero contraproducentes. Parece que la lepra lepromatosa también presenta una respuesta similar a TH2, prevalente, aunque inapropiada. Es posible que otro ejemplo pueda ser la infección por VIH. En este documento, se ha sugerido que un descenso en la proporción de linfocitos similares a TH1 con respecto a otras subpoblaciones de linfocitos TH puede desempeñar un papel esencial en la progresión hacia los síntomas de la enfermedad. Además, se ha observado que, al menos in vitro, parece que los clones similares a TH2 son soportes más eficaces de la replicación vírica del VIH que los clones similares a TH1. Además, aunque las respuestas inflamatorias mediadas por TH1 para muchos microorganismos son beneficiosas, estas respuestas a los propios antígenos normalmente son adversas. Se ha sugerido que la activación preferente de respuestas... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo que se une específicamente a un péptido codificado por la secuencia de nucleótidos de la SEC ID N.º: 2 o un péptido codificado por el gen T1, ST-2 o Fit-1 o uno de sus fragmentos que se una de ese modo, para su uso en el tratamiento de un trastorno relacionado con subpoblaciones de linfocitos TH2 seleccionadas de entre afecciones atópicas, infección helmíntica, infección vírica e infección bacteriana. 2. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno relacionado con subpoblaciones de linfocitos TH es una afección atópica. 3. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la afección atópica es asma. 4. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la afección atópica es alergia. 5. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la afección atópica es rinitis alérgica, una alergia gastrointestinal, eosinofilia, conjuntivitis o nefritis glomerular. 6. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno relacionado con subpoblaciones de linfocitos TH2 es leishmaniasis. 7. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno relacionado con subpoblaciones de linfocitos TH2 es infección por VIH. 8. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno relacionado con subpoblaciones de linfocitos TH2 es una infección bacteriana seleccionada de entre tuberculosis y lepra lepromatosa. 9. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el anticuerpo o fragmento es un anticuerpo monoclonal o uno de sus fragmentos. 10. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que el anticuerpo o fragmento es un anticuerpo humanizado o uno de sus fragmentos. 11. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, para un uso como se enuncia, en el que el anticuerpo o fragmento es un anticuerpo quimérico o uno de sus fragmentos. 12. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1 a 8, en el que el anticuerpo es un anticuerpo de cadena sencilla. 13. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1 a 8, en el que el anticuerpo es un anticuerpo policlonal. 14. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con la reivindicación 1 a 8, en el que el fragmento de anticuerpo es un fragmento Fab o un fragmento F(ab')2. 15. El anticuerpo o fragmento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el anticuerpo o fragmento se une específicamente al dominio extracelular del péptido. 16. Un procedimiento in vitro de separación de linfocitos TH2 de una población celular que comprende la unión a un péptido presente en la célula deseada de interés y codificado por la secuencia de nucleótidos de SEC ID N.º 2 o un péptido presente en la célula deseada de interés y codificado por el gen T1, ST2 o Fit-1 con un anticuerpo o fragmento específicos para el dominio extracelular de dicho péptido, y la retirada de células unidas por dicho anticuerpo o fragmento. 17. Un procedimiento in vitro para reducir el número de linfocitos TH2 presentes en una población celular que comprende la unión a un péptido presente en las células deseadas de interés y codificado por la secuencia de nucleótidos de SEC ID N.º: 2 o un péptido presente en las células deseadas de interés y codificado por el gen T1, ST2 o Fit-1 con un anticuerpo o fragmento específicos para el dominio extracelular de dicho péptido, y la retirada de células unidas por dicho anticuerpo o fragmento. 56 E06003809 25-10-2011   57 E06003809 25-10-2011   58 E06003809 25-10-2011   59 E06003809 25-10-2011   E06003809 25-10-2011   61 E06003809 25-10-2011   62   63