Composiciones farmacéuticas que comprenden bacterias que reducen oxalato.

Una composici6n para reducir la concentracion de oxalato en una persona o animal,

que consiste en unpolvo, que comprende una composición de reducción de oxalato que comprende:

a) de 0,5% a 95% de bacterias de reducción de oxalato;

b) de 0,1% a 50% de un disacarido;

c) de 3% a 85% de una maltodextrina;

d) de 0,5% a 25% de un alginato; y

e) de 1,0% a 60% de una oligofructosa.

y en donde la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes .

Composiciones farmacéuticas que comprenden bacterias que reducen oxalato Campo de la invención La presente invención se refiere a composiciones y métodos para tratar y prevenir las condiciones relacionadas con 5 el oxalato. Más en particular, la ¡nvendón se refiere a composiciones y usos que comprenden bacterias que degradan el oxalato o reducen el oxalato.

Fundamentos La enfermedad de los cálculos del tracto renal-urinario (urolitiasis) es un importante problema sanitario en todo el mundo. La mayoría de los cálculos asociados con la urolitiasis se componen de oxalato cálcico sólo o de oxalato cálcico más fosfato cálcico. Otros estados de la enfermedad han sido también asociados con el exceso de oxalato. Estos incluyen la vulvodinia o dolor vulvar crónico, la oxalosis asociada con una enfermedad renal en fase final, los trastornos de la conduclancia cardiaca, la enfermedad de Crohn, y otros estados de enfermedad entérica.

El ácido oxálico, y/o su sal, el oxalato, se encuentran en una amplia variedad de alimentos, y por lo tanto es, un componente de muchos constituyentes en las dietas humana y animal. El aumento de la absorción de oxalato puede ocurrir después de comer alimentos que contienen elevadas cantidades de ácido oxálico. Es bien sabido que los alimentos tales como las espinacas y el ruibarbo contienen altas cantidades de oxalato, pero hay una gran cantidad de otros alimentos y bebidas que también contienen oxalato. Como el oxalato se encuentra en una variedad de alimentos tan amplia, son difíciles de formular dietas con bajo contenido en oxalato y que tambíén sean sabrosas. Además, a menudo es problemático el cumplimiento de una dieta baja en oxalato.

También se produce metabólicamente oxalato endógeno por las enzimas de tejido normal. El oxalato, que incluye el oxalato de la dieta que se absorbe así como el oxalato que se produce metabólica mente, no se sigue metabolizando por enzimas del tejido y por consiguiente ha de ser excretado. Esta excreción se produce sobre todo a través de los riñones. La concentración de oxalato en los fluidos renales es crítica, causando el aumento de las concentraciones de oxalato un riesgo más elevado de formación de cristales de oxalato cálcico y por lo tanto la subsiguiente formación de cálculos renales.

El riesgo de formación de cálculos renales gira alrededor de varios factores que todavia no están completamente explicados. La enfermedad de los cálculos del tracto renal o urinario se presenta hasta en un 12% de la población en los paises occidentales y aproximadamente el 70% de estos cálculos se componen de oxalato cálcico o de oxalato cálcico más fosfato cálcico. Algunas personas (por ejemplo, pacientes con una enfermedad intestinal como la 30 enfermedad de Crohn, la enfermedad intestinal inflamatoria, o esteatorrea, y también los pacientes que han sido sometidos a una cirugía de bypass yeyunoileal) absorben más oxalato en sus dietas que otros. Para estas personas, la incidencia de urolitiasis de oxalato aumenta de una forma acusada. El aumento de la incidencia de la enfermedad se debe al aumento de los niveles de oxalato en los riñones y en la orina, y esto, el síndrome hiperoxalúrico más frecuente en el hombre, se conoce como hiperoxaluria entérica. El oxalato es también un problema en los pacientes con una enfermedad renal en fase final y hay pruebas recientes (Solomons, C. C, M. H. Melmed, S. M. Heitler [1991] "Calcium citrate for vulvar vestibulitis" Jouma/ of Reproductive Medicine 36: 879-882) que el aumento de oxalato interviene también en la vestibulitis vulvar (vulvodinia) .

Se han aislado bacterias que degradan el oxalato a partir de heces humanas (Allison, M. J., H. M. Cook, D. B. Milne,

S. Gallagher, R. V. Clayman [1986] "Oxalate degradation by gastrointestinal bacteria from humans", J. Nutr. 116:

455-460) . Se encontró que estas bacterias son similares a las bacterias reductoras del oxalato que habian sido aisladas a partir de los contenidos intestinales de varias especies de animales (Dawson, K. A, M. J. Allison, P. A Hartman [1980] "Isolation and sorne characteristics of anaerobic oxalate-degrading bacteria the rumen" App/. Environ. Microbio/. 40: 833-839; Allison, M. J., H. M. Cook [1981] "Oxalate degradation by microbes of the large bowel of herbivores: the effect of dietar y oxalate" Science 212: 675-676; Daniel , S. L., P. A Hartman, M. J. Allison 45 [1987] "Microbial degradation of the oxalate in !he gastrointestinal tracts of rats" App/. Environ. Microbio/. 53: 17931797) . Estas bacterias son diferentes de cualquier organismo descrito con anterioridad y se les ha dado tanto un nuevo nombre de especie como de género (Allison, M. J., K. A Oawson, W. R. Mayberr y , J. G. Foss [1985] "Oxa/abacter fonnigenes gen. nov., sp nov.: oxalate-degrading anaerobes that inhibit the gastrointestinal tract." Arch. Microbio/. 141: 1-7) .

No todos los seres humanos son portadores de poblaciones de O. fonnigenes en su tracto intestinal (Allison, M. J.,

S. L. Oaniel, N. A Comick [1995] "Oxalate-degrading bacteria" en Khan, S. R. (ed.) , Ca/cium oxa/ate in Bi% gica/ Systems CRC Press; Doane , L. T., M. Liebman, O. R. Caldwell [1989] "Microbial oxalate degradation: effects on oxalate and calcium balance in humans" Nutrition Research 9: 957-964) . Hay concentraciones bajas o una completa carencia de bacterias degradadoras del oxalato en las muestras fecales de personas que han tenido una cirugia de 55 by pass yeyunoileal (Allison et al [1986] "Oxalate degradation by gastrointestinal bacteria from humans" J. Nutr. 116: 455 -460) . También, ciertas personas y animales pueden mantener colonias de o. fonnigenes pero, no obstante, tienen niveles en exceso de oxalato por razones no totalmente comprendidas.

Lo que se necesita son métodos para el tratamiento de seres humanos y animales para reducir los niveles de oxalato en sus organismos para tratar o prevenir las condiciones relacionadas con el oxalato. Los métodos deseables incluirían la administración de composiciones reductoras de oxalato.

Sumario de la invención La presente invención comprende composiciones para tratar y prevenir las condiciones relacionadas con el oxalato. Las composiciones de la presente invención comprenden composiciones farmacéuticas que comprenden microorganismos que reducen el oxalato. Los métodos de la presente invención comprenden métodos para preparar composiciones farmacéuticas. Una realización comprende métodos que reducen el riesgo de desarrollar trastornos relacionados con el oxalato reduciendo la cantidad de oxalato en el tracto gastrointestinal. Esta reducción en el

tracto gastrointestinal da lugar a una reducción en los niveles sistémicos de oxalato con lo que se favorece una buena salud.

En una realización de la presente invención, se logra una reducción de la absorción de oxalato suministrando bacterias de degradación del oxalato al tracto gastrointestinal. En una realización, estas bacterias son Oxalobacter fonnigenes. Estas bacterias usan oxalato como sustrato. Esta utilización reduce la concentración de oxalato soluble en el intestino y, de esta forma, la cantidad de oxalato disponible para la absorción. Una reducción del oxalato en el tracto gastrointestinal puede conducir también a la eliminación de oxalato del sistema circulatorio. Los usos de la presente invención contemplan una reducción global de la carga de oxalato en una persona.

En una realización específica, esta invención proporciona métodos y composiciones para el suministro de O. fonnigenes viables al tracto gastrointestinal de las personas que están en un riesgo creciente de enfermedad

relacionada con el oxalato. Las bacterias eliminan oxalato del tracto intestinal, reduciendo de esta manera la cantidad de oxalato disponible para la absorción y dando lugar al aumento de la excreción de oxalato de la sangre a los intestinos.

De acuerdo con las enseñanzas de la presente invención, los microbios que degradan el oxalato y que son distintos de O. fonnigenes, que utilizan oxalato como un sustrato, también se pueden utilizar para lograr la degradación del 25 oxalato terapéutico, reduciendo asi el riesgo de urolitiasis y otros trastornos relacionados con el oxalato. Estos otros microbios pueden ser, por ejemplo, bacterias tales como clostridia o pseudomonas. Adicionalmente, la presente invención comprende métodos y composiciones para proporcionar secuencias de polinucleótidos exógenos capaces de conferir una función reductora del oxalato a los microorganismos que no producen enzimas reductoras de oxalato de forma natural. Tales secuencias de polinucleótidos pueden utilizarse para transformar tales microorganismos naturales, aquellos que son originalmente incapaces de reducir el oxalato,... [Seguir leyendo]

1. Una composición para reducir la concentración de oxalato en una persona o animal, que consiste en un polvo, que comprende una composición de reducción de oxalato que comprende: a) de 0, 5% a 95% de bacterias de reducción de oxalato; b) de 0, 1% a 50% de un disacárido; de 3% a 85% de una maltodextrina; de 0, 5% a 25% de un alginato; y

de 1, 0% a 60% de una oligofructosa. y en donde la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes.

2. La composición según la reivindicación 1a, en la que la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes, cepa HC1.

3. La composición según la reivindicación 1a, en la que la composición de reducción del oxalato tiene un valor de ufc/g de aproximadamente al menos 1 x 103 a aproximadamente 1 x 1013 bacterias de reducción del oxalato.

4. La composición según la reivindicación 1a, en la que una dosis única de la composición de reducción del oxalato tiene una actividad enzimática de reducción del oxalato de aproximadamente 5 unidades a aproximadamente 5.000 unidades.

5. Una composición para la reducción del oxalato, que comprende una cantidad efectiva de actividad de reducción del oxalato que reduzca una porción del oxalato presente, que comprende: de 0, 5% a 95% de bacterias de reducción del oxalato liofilizadas viables;

de 95% a 0, 5% de un excipiente aceptable farmacéuticamente; en donde la composición es un polvo.

6. La composición según la reivindicación 5a, en la que la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes.

7. La composición según la reivindicación 6a, en la que la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes, cepa HC 1.

8. Un método para preparar una composición farmacéutica en polvo que reduce el oxalato que comprende

proporcionar bacterias Oxalobacter formigenes de reducción del oxalato en una concentración de al menos 1 x 103 a 1 x 1013; opcionalmente mezclar las bacterias de reducción del oxalato con uno o más excipientes aceptables farmacéuticamente; liofilizar las bacterias; y cargar las bacterias en un vehículo farmacéutico de suministro que consiste en un polvo.

9. El método según la reivindicación sa, en el que los excipientes comprenden uno o más entre disacáridos, maltodextrina, alginato u oligofructosa.

10. El método según la reivindicación sa, en el que la bacteria de reducción del oxalato es Oxalobacter formigenes, cepa HC1.

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