El uso de una composición farmacéutica que comprende una preparación de anticuerpo,

con especificidad hacia el conjugado fosforilcolina, en la fabricación de un medicamento para inmunización y tratamiento de humanos contra aterosclerosis o una enfermedad aterosclerótica relacionada

CAMPO DE LA INVENCIÓN

Esta invención se refiere al campo de tratamiento de ateroesclerosis y de enfermedades cardiovasculares isquémicas.

DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA

La ateroesclerosis es una enfermedad crónica que causa un engrosamiento de la capa más interna (la íntima) de las arterias de tamaño medio y grande. Ello hace que el flujo de sangre disminuya y pueda causar isquemia y la destrucción de tejido en órganos irrigados por los vasos afectados. La ateroesclerosis es la mayor causa de enfermedad cardiovascular incluyendo infarto de miocardio, ataque de apoplejía y enfermedad arterial periférica. Es la mayor causa de mortandad en el mundo occidental y se predice que puede llegar a liderar la causa de muerte en el mundo entero dentro de dos décadas.

La enfermedad se inicializa por acumulación de lipoproteínas; primariamente lipoproteína de baja densidad (LDL), en la matriz extracelular del vaso. Estas partículas LDL se agregan y se someten a una modificación oxidativa. LDL oxidada es proinflamatoria, tóxica y causa daño vascular. Ateroesclerosis representa en muchos aspectos, una respuesta a este daño incluyendo inflamación y fibrosis.

En 1989 Palinski y colegas identificaron anticuerpos circulantes contra LDL oxidadas en humanos. Esta observación sugirió que la ateroesclerosis puede ser una enfermedad autoinmune causada por reacciones inmunes contra lipoproteínas oxidadas. En este momento, varios laboratorios empezaron la búsqueda de asociaciones entre títulos de anticuerpo contra LDL oxidadas y enfermedad cardiovascular. Sin embargo, la imagen que surgió de estos estudios fue nada clara. Existían anticuerpos contra un gran número de diferentes epitopos en LDL oxidadas, pero la estructura de estos epitopos era desconocida. El término “anticuerpos LDL oxidadas” se refería así a una mezcla desconocida de diferentes anticuerpos en lugar de un anticuerpo específico.

Está bien establecido que hay una inflamación en curso en las lesiones de aterosclerosis, caracterizada por la activación de células inmunocompetentes y la producción de citoquinas inflamatorias. Factores de riesgo establecidos como hipertensión, lípidos en sangre, diabetes y fumar es probable que promuevan esta reacción inflamatoria, pero el mecanismo por el cual esto ocurre no está bien caracterizado y existen posibilidades diferentes que no se excluyen mutuamente. Varios autoantígenos diferentes que pueden provocar esta reactividad inmune han sido propuestos, incluyendo lipoproteína oxidada de baja densidad (oxLDL) y proteínas de choque térmico (HSP) 2,3. Los datos disponibles en el papel de reacciones inmunes en aterosclerosis indican una relación compleja. Un ejemplo de esto es la inmunización en modelos animales para influenciar la aterogenesis. Cuando HSP es utilizado, la ateroesclerosis aumenta pero disminuye cuando oxLDL es el antígeno 4,5.

El papel de aOxLDL en enfermedad en humanos parece ser complejo. En humanos, ha sido previamente demostrado que aOxLDL es superior en controles de salud que en hombres próximos a la hipertensión, un ejemplo de enfermedad6 cardiovascular temprana. Adicionalmente, una correlación inversa existe entre los niveles de OxLDL en plasma y títulos28 de aOxLDL. Esto puede sugerir que los niveles altos de aOxLDL juegan un papel en la regulación de los niveles de OxLDL en plasma, aunque la regulación de los niveles de OxLDL en plasma también son afectados por otros factores, quizá debido a una respuesta inmune compleja que envuelve un rango de anticuerpos cuando OxLDL es usado como antígeno. Por otro lado, muchos autores han informado que aOxLDL se elevan en enfermedades cardiovaculares en humanos (CVD), especialmente en las últimas etapas2,3,9,10. Un ejemplo es el lupus eritematoso sistémico (SLE) y la enfermedad autoinmune asociada con un alto riesgo de CVD. Pacientes-SLE con un historial de CVD tuvieron elevados niveles11 aOxLDL. Estos resultados, hasta cierto punto contradictorios pueden depender de diferentes métodos y etapas de LDL-oxidación, dando diferencias en el rendimiento en la antigenicidad. Es también probable que la etapa de la enfermedad y el perfil de factor riesgo estén relacionados con los niveles de anticuerpo. Elevados niveles de aOxLDL han sido encontrados en pacientes con ateroesclerosis avanzada y son predictivos en la progresión ateroesclerosis carótida28.

La lipoproteína de baja densidad oxidada (oxLDL) tiene ella misma propiedades proinflamatorias incluyendo la activación de células T12, 13, monocitos/macrófagos y células endoteliales14-16. OxLDL promueve también la inflamación en las células competentes inmunes de las lesiones ateroscleroticas17. Sin embargo, debería remarcarse que oxLDL puede disminuir las reacciones inflamatorias agudas y por ejemplo, promover una o más inflamación crónica de bajo grado como se ve en la aterosclerosis18. Es interesante resaltar que muchos efectos biológicos de oxLDL son causados por factores de activación en placa (PAF)-similar a lípidos en oxLDL19-21 .

Fosforilcolina (PC) es un componente principal no sólo en los fosfolípidos inflamatorios similares al factor de activación en placa-PAF (donde es fundamental para la interacción con el PAF-receptor) y en oxLDL, pero también como componentes inmunogénicos de muchas bacterias incluyendo S. Pneumoniae22. Además, PC se expresa por células2,23 apoptóticas.

En US5455032, los conjugados de fosfocolina han sido utilizados en vacunas para inducir inmunoprotección contra infecciones de muchas bacterias como Streptococcus pneumoniae. En un reciente estudio24 por Binder et al en vacuna de pneumococcus en ratones, se muestra que la vacuna disminuyó la formación de lesión aterosclerótica. Se ha encontrado que muchos autoanticuerpos de OxLDL derivados de los ratones ateroscleróticos comparten la identidad estructural con anticuerpos que protegen contra patógenos infecciosos comunes, incluyendo Streptococcus pneumoniae. El estudio, en ratones, no en humanos, no da una información específica sobre la especificidad, o que anticuerpos antifosforilcolina lgM son significativamente más importantes que los correspondientes anticuerpos lgG como un factor de protección en aterosclerosis. Además, los conjugados de fosforilcolina no han sido utilizados en la vacuna de pneumococcus.

En otro estudio fue mostrado25 que los niveles de anticuerpo antifosforilcolina son elevados en humanos con enfermedades periodontales. La conclusión es que fosforilcolina es un importante antígeno oral asociado con organismos en la flora periodontal y que el anticuerpo anti-PC es elevado como consecuencia de la enfermedad periodontal. Ninguna información es dada en referencia a los anticuerpos y la protección posible de o progresión de la aterosclerosis.

Una pareja de documentos (p.e, WO2002080954, WO0168119 y WO941445432) relacionados con el tratamiento de inmunización de aterosclerosis han sido publicados pero cada uno está basado en el uso de fragmentos de péptidos de apolipoproteína B, anticuerpos de cadena alfa/beta de receptores de células T o vacuna basada en esterol. Métodos para detectar la placa aterosclerotica (WO9908109 y WO013207033) utilizando anticuerpos monoclonales para la oxidación de epítopos específicos en lipoproteína han sido descritos. Estos son diferentes del método propuesto en esta invención donde un conjugado de fosforilcolina es usado para detectar anticuerpos, p.e, anticuerpos lgM o lgG, en muestras sujeto.

Inmunización activa con epitopos de OxLDL, tal como MDA-LDL, o con un patógeno natural, S. pneumoniae, se encontrado que es ateroprotectiva en ratones modelos de aterosclerosis, pero las respuestas proaterogénicas via respuestas adaptativas Th1 son también provocadas27. Los niveles de E06, un anticuerpo que se une a PC, son elevados pero no dan evidencia de su actual papel en la inmunidad innata ateroprotectora.

Se ha mostrado que anticuerpos elevados contra haptenos PC unen los diferentes antígenos PC encontrados dentro de un rango de contextos biológicos diferentes, tales como en membranas de células apoptóticas, patógenos y/o lesiones ateroescleróticas29. Métodos para la producción de anticuerpos anti PC han sido descritos pero no para el uso en el tratamiento de aterosclerosis30, 31.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención trata del uso de composiciones farmacéuticas que comprende una preparación de anticuerpo, por ejemplo un anticuerpo monoclonal, con especificidad a un conjugado de fosforilcolina, y el uso de estas composiciones en el tratamiento... [Seguir leyendo]

1. El uso de una composición farmacéutica que comprende una preparación de anticuerpo, con especificidad hacia el conjugado fosforilcolina, en la fabricación de un medicamento para inmunización y tratamiento de humanos contra aterosclerosis o una enfermedad aterosclerótica relacionada.

2. Una preparación de un anticuerpo con especificidad a un conjugado fosforilcolina en el uso de inmunización y tratamiento de humanos contra aterosclerosis y una enfermedad aterosclerótica relacionada.

3. El uso de la reivindicación 1 o la preparación de anticuerpo de la reivindicación 2 donde la preparación de anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

4. El uso de la reivindicación 1 o 3 o la preparación de anticuerpo de la reivindicación 2 o 3 donde el medicamento es para administrarse por inyección.

5. El uso o la preparación de anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde la fosforilcolina está unida a un portador mediante un espaciador.

6. El uso o preparación de anticuerpo de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde el conjugado fosforilcolina comprende fosforilcolina unida a una proteína portadora, opcionalmente vía un espaciador.

7. El uso o preparación de anticuerpo de acuerdo a la reivindicación 6, donde la proteína es KLH (hemocianina de lapa californiana) o albúmina de suero humano (HSA).

8. Uso de una preparación de anticuerpo, con especificidad a un conjugado fosforilcolina en la fabricación de un medicamento para el tratamiento profiláctico o terapéutico de un humano que sufre de aterosclerosis o que corre el riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular isquémica.

9. Una preparación de anticuerpo con especificidad a un conjugado fosforilcolina para el uso en el tratamiento profiláctico o terapéutico de un humano que sufre de aterosclerosis o que corre el riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular isquémica.

10. El uso de la reivindicación 8 o la preparación de anticuerpo de la reivindicación 9 donde la preparación del anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.