8 patentes, modelos y diseños de TERUHIKO BEPPU

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/04/1988). Clasificación: C12N9/64.

COMPRENDE LAS SIGUIENTES ETAPAS: A) DIGERIR EL PLASMIDO PCR701 (FIG. 1), CON HIND III MEDIANTE INCUBACION EN UNA SOLUCION QUE CONTIENE ADEMAS TAMPON HIND III B) INCUBAR LOS DIGERIDOS DE LA ETAPA A), EN PRESENCIA DE NUCLEASA S, EN UNA SOLUCION TAMPONADA; C) LIGAR LOS DNAS OBTENIDOS EN LA ETAPA ANTERIOR MEDIANTE INCUBACION EN UNA SOLUCION QUE CONTIENE ADEMAS DNA LIGASA T4, ATP Y TAMPON DE LIGACION. PARA CADA ETAPA SE PROPORCIONAN LOS INTERVALOS ADECUADOS DE TIEMPO Y TEMPERATURA. SE DESCRIBEN DOS TIPOS DISTINTOS DE SOLUCION TAMPONADA EN LA ETAPA B, QUE DEN LUGAR A POSIBILIDADES ALTERNATIVAS EN LA ETAPA C). DE APLICACION EN LA OBTENCION DE PROQUIMOSINA, QUE SE UTILIZA EN LA MANUFACTURA E INDUSTRIA DEL QUESO PARA LA COAGULACION DE LA LECHE.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/04/1988). Clasificación: C12N9/64.

UN PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR PROQUIMOSINA EN EL QUE SE DESCRIBEN LOS PLASMIDOS DE EXPRESION QUE CONTIENEN LA SECUENCIA DE CDNA COMPLETA DE PROQUIMOSINA DE TERNERA Y SON CAPACES DE EXPRESAR EL GEN DE PROQUIMOSINA EN CELULAS HUESPEDES DE E. COLI. SE DESCRIBE UN METODO PARA LA PREPARACION DE DICHOS PLASMIDOS QUE COMPRENDE ALTERAR EL ESPACIAMIENTO ENTRE LAS SECUENCIAS 5D Y ATG DENTRO DE LA REGION OPERADORA-PROMOTORA TRP DE E. COLI DEL PLASMIDO DE EXPRESION DE ORIGEN, PCR701, QUE EXPRESA EL GEN DE PROQUIMOSINA EN LAS CELULAS HUESPEDES DE E. COLI. ESTOS PLASMIDOS DE EXPRESION MODIFICADA SE DISEÑAN PARA PROPORCIONAR ALTOS NIVELES DE EXPRESION DE PROQUIMOSINA. LA PROQUIMOSINA ES DE APLICACION EN LA COAGULACION DE LA LECHE EN LA MANUFACTURA E INDUSTRIA DEL QUESO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/05/1987). Clasificación: C12N9/64.

PROCEDIMIENTO PARA LA OBTENCION DE PLASMIDOS PCR711. CONSISTE EN LA DIGESTION COMPLETA DEL PLASMIDO PCR701 CON INDIII, A UNA TEMPERATURA COMPRENDIDA ENTRE 25JC Y 40JC; REPARACION DE LAS PARTES DE UNA SOLA HEBRA RESULTANTES EN LOS DOS EXTREMOS CORTADOS, MEDIANTE DNA POLIMERASA, POR INCUBACION A UNA TEMPERATURA COMPRENDIDA ENTRE 20JC Y 40JC; Y LIGADO COMPLETO DE LOS EXTREMOS RESULTANTES MEDIANTE DNA LIGASA T4, POR INCUBACION A UNA TEMPERATURA DENTRO DEL MISMO INTERVALO. ESTOS PLASMIDOS TIENEN APLICACIONES PARA EXPRESAR PROQUIMOSINA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/03/1987). Clasificación: C12N9/56.

METODO DE PREPARACION DEL PLASMIDO PKS3. COMPRENDE LA DIGESTION PARCIAL DEL PLASMIDO PHWI CON HAE III POR INCUBACION A 37JC DURANTE 2 MINUTOS, DETENCION DE LA DIGESTION POR TRATAMIENTO CON FENOL Y PRECIPITACION DEL DNA (A) RESULTANTE CON ETANOL; DIGESTION COMPLETA DEL PLASMIDO PMC1396 CON BAM HI Y SAL I POR INCUBACION A 37JC DURANTE 1 HORA Y PRECIPITACION DEL DNA CON ETANOL; TRATAMIENTO DE ESTE DNA LINEARIZADO CON DNA POLIMERASA EN SU PORCION DE UNA SOLA HEBRA PARA OBTENER EL FRAGMENTO (B) CON AMBOS EXTREMOS OBTUSOS; Y, FINALMENTE, UNIR LOS FRAGMENTOS (A) Y (B) DE DNA POR MEDIO DE LIGASA DNA T4 PARA OBTENER EL PLASMIDO PKS3. TIENE APLICACIONES PARA LA PRODUCCION DE PROQUIMOSINA QUE PUEDE SER EXPRESADA EN B. SUBTILIS EN ORGANISMOS CON UN GEN RESISTENTE A LA ERITROMICINA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/03/1987). Clasificación: C12N9/56.

METODO DE PREPARACION DEL PLASMIDO PCR702. COMPRENDE LA DIGESTION COMPLETA DEL PLASMIDO PCR701 CON HINFI POR INCUBACION A 37JC DURANTE 1,5 HORAS Y PRECIPITACION DEL DNA RESULTANTE CON NUCLEASA S1 PARA SEPARAR LA PORCION DE UNA HEBRA Y OBTENER EL CORRESPONDIENTE FRAGMENTO DE DNA; UNION DEL LIGANTE SAL I A ESTE FRAGMENTO POR INCUBACION DURANTE LA NOCHE A 11JC; Y DIGESTION CON SAL I PARA OBTENER EL FRAGMENCO (C) DE DNA; DIGESTION DEL PLASMIDO PBR322 CON SAL I POR INCUBACION A 37JC DSURANTE 1 HORA Y TRATAMIENTO CON FOSFATO ALCALINO DE TERNERA PARA AISLAR EL FRAGMENTO D DE ADNA; Y, FINALMENTE, UNIR LOS FRAGMENTOS (C) Y (D) POR MEDIO DE LIGASA DNA T4 PARA OBTENER EL PLASMIDO PCR702. TIENE APLICACIONES PARA LA PRODUCCION DE PROQUIMOSINA QUE PUEDE SER EXPRESADA EN B. SUBTILIS EN ORGANISMOS CON UN GEN RESISTENTE A LA ERITROMICINA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/03/1987). Clasificación: C12N9/56.

METODO DE PRODUCCION DEL PLASMIDO PKSR101. CONSISTE EN DIGERIR DOBLEMENTE EL PLASMIDO PKS3 POR BAM HI Y SAL I PARA AISLAR EL FRAGMENTO (E) DE DNA, QUE CONTIENE LA PARTE C3M DE 4,3 KB, E INCLUYE EL PROMOTOR ERM Y UNA PARTE DEL GEN DE LA PROTEINA 29 K; DIGERIR COMPLETAMENTE EL PLASMIDO PCR702 CON BAM HI Y ECO RI PARA AISLAR EL FRAGMENTO (F) DE DNA FORMADO POR 465 BP; DIGERIR EL PLASMIDO PCR702 DOBLEMENTE CON ECO RI Y SAL I PARA AISLAR EL FRAGMENTO (G) DE DNA; Y LIGAR LOS FRAGMENTOS (E), (F) Y (G) DE DNA POR MEDIO DE LIGASA T4 PARA OBTENER EL PLASMIDO DESEADO. ESTE PLASMIDO TIENE APLICACIONES PARA, TRANSFORMADO EN B. SUBTILIS, PRODUCIR PROQUIMOSINA DE TERNERA.-.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/03/1987). Clasificación: C12N9/64.

PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR EL PLASMIDO PCR714. CONSISTE EN CORTAR, MEDIANTE ENZIMAS DE RESTRICCION, LA SECUENCIA BASE DE PCR701 ENTRE LA SECUENCIA SD Y EL CODON ATG; LIGAR LOS EXTREMOS CORTADOS; Y CON ESTO ALTERAR LA CONSTITUCION DE LOS PARES DE BASES ENTRE DICHAS SECUENCIAS SD Y ATG, TAL COMO LA ADAPTACION DE PARES BASE Y/O EL NUMERO DE PARES BASE QUE INTERVIENEN, SIENDO POSIBLE ALARGAR EL ESPACIAMIENTO ENTRE LA SECUENCIA SD Y EL CODON DE INICIACION ATG ESCINDIENDO CON ENZIMAS DE RESTRICCION, REPARANDO LOS TERMINOS DE UNA SOLA HEBRA RESULTANTES, Y LIGANDO LOS EXTREMOS CORTADOS; SIENDO POSIBLE A LA INVERSA ACORTAR DICHO ESPACIAMIENTO SEPARANDO LOS TERMINOS DE UNA SOLA HEBRA Y LIGANDO LOS EXTREMOS CORTADOS; UTILIZANDO PREFERIBLEMENTE EL ULTIMO METODO. TIENE UTILIDAD PARA PROPORCIONAR ALTOS NIVELES DE EXPRESION DE PROQUIMOSINA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/04/1986). Clasificación: C12N9/56.

PROCEDIMIENTO PARA LA OBTENCION DE PROQUIMOSINA. CONSISTE EN INSERTAR UN GEN DE PROQUIMOSINA EN UN SISTEMA VECTOR DE B. SUBTILIS, QUE CONTIENE UN PROMOTOR, CON EL SISTEMA DE LECTURA APROPIADO, PARA FORMAR PLASMIDOS DE EXPRESION; TRANSFORMAR UN ORGANICOS HUESPED B. SUBTILIS CON DICHO PLASMIDO DE EXPRESION PARA OBTENER TRANSFORMANTES; SELECCIONAR EL TRANSFORMANTE RESISTENTE AL FARMACO; CULTIVAR DICHO TRANSFORMANTE EN UN MEDIO NUTRIENTE ADECUADO; Y, FINALMENTE, AISLAR PROQUIMOSINA A PARTIR DE LOS CULTIVOS OBTENIDOS. TIENE APLICACIONES PARA OBTENER, MEDIANTE LA TECNOLOGIA DEL DNA RECOMBINANTE, UN PROMOTOR RESISTENTE A LA ERITROMICINA.