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UN PROCEDIMIENTO PARA LA PRODUCCION DE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO Y DERIVADOS DEL MISMO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/07/1988). Clasificación: C12Q1/68.

SE OBTIENE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO A UN SOPORTE SOLIDO, SEGUN EL PROCEDIMIENTO DE LA FIGURA, PARTIENDO DE UNA SONDA DE ACIDO NUCLEICO, A LAS QUE SE UNE, UN NUCLEOTIDO MODIFICADO CON GRUPOS MERCURIO O MERCAPTO, EN EL EXTREMO 3'-HIDROXILO DEL DNA, MEDIANTE LA REACCION ENZIMATICA DE DESOXINUCLEOTIDIL-TRANSFERASA TERMINAL Y POSTERIOR INCUBACION A 15G DURANTE 60 MINUTOS, EXTRACCION CON FENOL Y PRECIPITACION CON ALCOHOL. PREVIAMENTE SE HABRA PREPARADO UN SOPORTE SOLIDO A BASE DE 0,5 GR DE CELULOSA, EN 5 ML DE AGUA DESTILADA, LLEVADA A PH 10,5-11 CON HIDROXIDO SODICO Y A LA QUE AÑADE CIANOGENO SOLIDO Y SE AMIDA CON 5 ML DE HEXAMETILENDIAMINA. ESTA CELULOSA AMIDADA SE LE PUEDE AÑADIR UNA SOLUCION DE SPDP (N-SUCCINIMIDIL-3)(2-PIRIDILTIO) PROPIONATO) O TIOLACTONA DE N-ACETILHOMOCISTEINA O ACETATO DE P-AMINOFENIL-MERCURIO SEGUN LA MODIFICACION DEL NUCLEOTIDO, QUE DA LUGAR A LAS TRES VARIANTES DE LA FIGURA.

UN PROCEDIMIENTO QUIMIOLUMINISCENTE PARA USO EN UN PROCEDIMIENTO DE DETECCION DE ANALITOS.

Secciones de la CIP Física Química y metalurgia

(16/03/1988). Inventor/es: DATTAGUPTA, NANIBHUSHAN, CLEMENS, ANTON H. Clasificación: G01N33/58, C12Q1/68, G01N33/53, C12Q1/28, G01N33/52, C12Q1/66.

UN PROCEDIMIENTO QUIMIOLUMINISCENTE QUE CONSISTE EN PONER EN CONTACTO UN PRECURSOR QUIMIOLUMINISCENTE, UN OXIDANTE, UN ENZIMA Y UN COMPUESTO NITROGENADO SELECCIONADO ENTRE EL GRUPO FORMADO POR AMONIACO Y UNA AMINA ORGANICA SOLUBLE EN AGUA. LA REACCION DE ESTE PROCEDIMIENTO PUEDE UTILIZARSE PARA DETECTAR HIBRIDOS DE ACIDOS NUCLEICOS, ANTICUERPOS, ANTIGENOS Y ENZIMAS PEROXIDASAS Y PARA PRODUCIR LUZ. OTRO PROCEDIMIENTO QUIMIOLUMINISCENTE CONSISTE EN PONER EN CONTACTO UN PRECURSOR QUIMIOLUMINISCENTE, UN OXIDANTE, UN ENZIMA, UN INCREMENTADOR DE LA QUIMIOLUMINISCENCIA Y UN COMPUESTO NITROGENADO SELECCIONADO ENTRE EL GRUPO FORMADO POR AMONIACO Y AMINAS ORGANICAS SOLUBLES EN AGUA. LA REACCION DE ESTE PROCEDIMIENTO PUEDE UTILIZARSE EN LA DETECCION DE HIBRIDOS DE ACIDOS NUCLEICOS, ANTICUERPOS ANTIGENOS Y ENZIMAS PEROXIDASAS Y EN LA PRODUCCION DE LUZ.

UN METODO DE PREPARACION DE UNA SONDA MARCADA DE ACIDO NUCLEICO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/12/1987). Clasificación: C12Q1/68.

METODO PARA LA PREPARACION DE UNA SONDA MARCADA DE ACIDO NUCLEICO. CONSISTE EN PONER EN CONTACTO LA SONDA CON UN COMPUESTO QUIMICAMENTE FUNCIONALIZADO QUE SE UNE AL ACIDO NUCLEICO, PREFERIBLEMENTE UN COMPUESTO INTERCALADOR; EN SOMETER LA SONDA Y EL CITADO COMPUESTO DE UNION AL ACIDO NUCLEICO A IRRADIACION FOTOQUIMICA PARA EFECTUAR UNA REACCION COVALENTE; Y EN SOMETER EL PRODUCTO DE REACCION A UNA REACCION ADICIONAL, PARA UNIR UN MARCADOR A TRAVES DE UN COMPUESTO ESPACIADOR AL RADICAL QUIMICAMENTE FUNCIONALIZADO. LA SONDA MARCADA DE ACIDO NUCLEICO COMPRENDE UN COMPONENTE ACIDO NUCLEICO, UN LIGANDO QUE SE UNE AL ACIDO NUCLEICO FOTOQUIMICAMENTE ENLAZADO AL COMPONENTE ACIDO NUCLEICO, UN MARCADOR, Y UN ESPACIADOR QUE ENLAZA EL LIGANDO CON EL MARCADOR.

UN METODO DE PREPARACION DE UN OLIGONUCLEOTIDO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/05/1987). Clasificación: C07H19/06.

METODO DE PREPARACION DE UN OLIGONUCLEOTIDO. CONSISTE EN HIBRIDAR: A) UN FRAGMENTO MAS CORTO DEL OLIGONUCLEOTIDO DESEADO CON B) UN FRAGMENTO DEL ACIDO NUCLEICO MAS LARGO QUE A) Y COMPLEMENTARIO DEL OLIGONUCLEOTIDO DESEADO; LLEVANDO UNO DE LOS FRAGMENTOS A) Y B) UN RADICAL ORGANICO QUE DIFERENCIA SUS PROPIEDADES FISICAS DE LAS DEL OTRO FRAGMENTO B) O A); PONER EN CONTACTO EL MATERIAL HIBRIDADO CON UNA ENCIMA Y TRIFOSFATOS DE NUCLEOSIDOS CON LO QUE EL FRAGMENTO MAS CORTO CRECE EN UNA DIRECCION HASTA QUE ES CO-TERMINAL CON EL FRAGMENTO DE ACIDO NUCLEICO COMPLEMENTARIO; DESNATURALIZAR EL MATERIAL HIBRIDADO; Y SEPARAR EL FRAGMENTO A) ELONGADO DEL FRAGMENTO B). TIENE APLICACION EN LA PREPARACION DE SONDAS OLIGONUCLEOTIDICAS.

UN METODO DE INMUNOENSAYO PARA DETERMINAR HBALC EN UNA MUESTRA DE SANGRE.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/05/1987). Clasificación: C12P21/00.

METODO DE INMUNOENSAYO PARA DETERMINAR HBALC EN UNA MUESTRA DE SANGRE. CONSISTE EN PONER EN CONTACTO LA MUESTRA DE SANGRE CON UN REACTIVO ANTICUERPO CAPAZ DE UNIRSE AL HBALC Y DETERMINAR LA UNION DE DICHO REACTIVO ANTICUERPO AL HBALC EN LA MUESTRA DE SANGRE, DONDE EL REACTIVO ANTICUERPO ES UN ANTICUERPO MONOCLONAL, O UN FRAGMENTO DEL MISMO QUE COMPRENDE UN SITIO DE COMBINACION DEL ANTICUERPO, QUE SE UNE ESPECIFICAMENTE A LA SECUENCIA PEPTIDICA N-TERMINAL GLUCOSIDICA DE LA SUBUNIDAD BETA DE LA HEMOGLOBINA HUMANA O A UN PEPTIDO GLUCOSILADO DE FORMULA GLYCO-(NH)VAL-HIS-AA-. TIENE UTILIDAD PARA LA DETERMINACION DE PROTEINAS DE IMPORTANCIA ANALITICA.

UN METODO DE DETECCION DE LA PRESENCIA DE UNA SECUENCIA POLINUCLEOTIDICA PARTICULAR EN UNA MUESTRA A ENSAYAR.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/04/1987). Clasificación: C12Q1/68.

METODO PARA LA DETECCION DE LA PRESENCIA DE UNA SECUENCIA POLINUCLEOTIDICA PARTICULAR EN UNA MUESTRA A ENSAYAR. CONSISTE EN PONER EN CONTACTO LA MUESTRA A ENSAYAR CON UNA PRIMERA SONDA DE ACIDO NUCLEICO DE SEPARACION Y UNA SEGUNDA SONDA DE ACIDO NUCLEICO DE DETECCION, DONDE LAS CITADAS SONDAS CONTIENEN CADA UNA DE ELLAS POR LOS MENOS UNA SECUENCIA DE BASES MONOCATENARIA, QUE SON HIBRIDABLES CON FRAGMENTOS MUTUAMENTE EXCLUYENTES DE LA SECUENCIA A DETECTAR; EN PONER EN CONTACTO LA SOLUCION RESULTANTE CON UNA FORMA INMOVILIZADA DEL COPARTICIPE DE REACCION PARA FORMAR UNA UNION ESTABLE; Y EN SEPARAR LA FRACCION INMOVILIZADA RESULTANTE DEL RESTO DE LA SOLUCION.

UN PROCEDIMIENTO PARA LA PRODUCCION DE UN ACIDO NUCLEICO O UN OLIGONUCLEOTIDO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/12/1986). Clasificación: C12Q1/68.

PREPARACION DE UNA SONDA QUE CONTIENE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO. SE OBTIENE ACOPLANDO ENZIMATICAMENTE UN NUCLEOTIDO A UN EXTREMO PREDETERMINADO DEL ACIDO NUCLEICO Y ACOPLANDO DESPUES UN SOPORTE SOLIDO, COMO CELULOSA, A TRAVES DEL NUCLEOTIDO. DE ESTA FORMA LA RIBOSA DEL NUCLEOTIDO SE PUEDE OXIDAR CON PERYODATO SODICO, FORMANDO GRUPOS ALDEHIDO, QUE REACCIONAN CON UN GRUPO AMINO PRIMARIO INTRODUCIDO EN LA CELULOSA, FORMANDO UNA BASE DE SCHIFF; ESTA BASE SE REDUCE A GRUPO AMINO SECUNDARIO SATURADO POR REACCION CON BOROHIDRURO. EL ACOPLAMIENTO NO INTERFIERE CON LA CAPACIDAD DE HIBRIDACION DEL ACIDO NUCLEICO E IMPLICA PREFERIBLEMENTE UN SOLO ENLACE COVALENTE POR ACIDO NUCLEICO CON EL SOPORTE SOLIDO. ESTE SOPORTE PUEDE SER NYLON, POLIMEROS ACRILICOS, SOPHADEX, SEPHAROSE Y SIMILARES, Y PREFERENTEMENTE CELULOSA Y SUS ESTERES. LA SONDA ES ADECUADA PARA ANALISIS PRECISOS DE GENES DE HIBRIDACION.

UN METODO DE FABRICACION DE UNA SONDA DE DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/07/1986). Clasificación: C12Q1/68.

METODO DE FABRICACION DE UNA SONDA DE DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS. CONSISTENTE EN CONECTAR, POR MEDIO DE UNA REACCION ENZIMATICA O QUIMICA: A) UN FRAGMENTO MONOCATENARIO HIBRIDABLE DE UN ACIDO NUCLEICO QUE ES COMPLEMENTARIO A LA SECUENCIA DEL ACIDO NUCLEICO A DETECTAR Y B) UN FRAGMENTO MONOCATENARIO O BICATENARIO, DE ACIDO NUCLEICO NO HIBRIDABLE, CUYO FRAGMENTO DE ACIDO NUCLEICO NO HIBRIDABLE COMPRENDE SITIO DE RECONOCIMIENTO PARA UNA PROTEINA DETERMINADA O ESTA MARCADO CON UN TRAZADOR DETECTABLE. LA PROTEINA ES SELECCIONADA ENTRE EL GRUPO FORMADO POR REPRESOR DE LACTOSA, REPRESOR DE GALACTOSA, REPRESOR LAMBDA, PROTEINA ACTIVANTE DEL GEN CATABOLITICO Y PROTEINA CRO. SE USA CON FINES ANALITICOS Y DE DIAGNOSTICO, PARA DETECTAR SECUENCIAS DE POLINUCLEOTIDOS ESPECIFICOS.

UN METODO DE PRODUCCION DE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/05/1986). Clasificación: C07H21/00.

METODO DE PRODUCCION DE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO. COMPRENDE: A) PONER EN CONTACTO UN ACIDO NUCLEICO CON UN LIGANDO DE UNION DE ACIDO NUCLEICO QUE SE UNE A UN SUBSTRATO SOLIDO A TRAVES DE UN RADICAL DIVALENTE; B) DEJAR QUE REACCIONEN EL LIGANDO Y EL ACIDO NUCLEICO PARA FORMAR UN COMPLEJO; Y C) SOMETER ESTE COMPLEJO A IRRADIACION FOTOQUIMICA PARA QUE TENGA LUGAR UNA REACCION COVALENTE ENTRE EL LIGANDO Y EL ACIDO NUCLEICO. LAS REACCIONES SE REALIZAN A TEMPERATURA AMBIENTE, CON DISOLVENTES ORGANICOS INERTES COMO ETER, TETRACLORURO DE CARBONO Y OTROS. EL LIGANDO DE UNION DE ACIDO NUCLEICO ES UN COMPUESTO INTERCALADOR COMO COLORANTES DE ACRIDINA, FENANTRIDINAS Y OTROS; EL SUBSTRATO ES CELULOSA O UN ESTER DE CELULOSA; Y EL RADICAL DIVALENTE DERIVA DEL BROMURO DE CIANOGENO O DE ETER DIGLICIDILICO DE 1,4-BUTANODIOL. SE UTILIZA PARA ENSAYOS DE HIBRIDACION PARA LA DETERMINACION DE SECUENCIAS ESPECIFICAS DE POLINUCLEOTIDOS.

UN METODO PARA LA PREPARACION DE UNA PROTEINA QUE ESTA COVALENTEMENTE ACOPLADA A UN EXTREMO DE UN ACIDO NUCLEICO.

(16/04/1986) METODO PARA LA PREPARACION DE UNA PROTEINA QUE ESTA COVALENTEMENTE ACOPLADA A UN EXTREMO DE UN ACIDO NUCLEICO. COMPRENDE: A) MODIFICAR UN EXTREMO DE UN ACIDO NUCLEICO CON UNA TRANSFERASA TERMINAL, PARA FORMAR UN EXTREMO RIBONUCLEOTIDO; B) OXIDAR AL EXTREMO RIBONUCLEOTIDO CON PERYODATO, PARA PRODUCIR GRUPOS ALDEHIDOS TERMINALES; C) FIJAR UN TRAZADOR AL ACIDO NUCLEOTIDO MODIFICADO; D) HACER REACCIONAR A LOS GRUPOS ALDEHIDOS TERMINALES DEL EXTREMO RIBONUCLEOTIDO PERTENECIENTE A UN ACIDO NUCLEICO MODIFICADO POR TRAZADOR CON UN GRUPO AMINO DE LA PROTEINA SEGUN FORMACION DE BASE DE SCHIFF; Y E) HIDROGENAR AL PRODUCTO DE D), PARA FORMAR UN ENLACE AMINOMETILICO ENTRE LA PROTEINA Y ACIDO NUCLEICO. EL ACIDO NUCLEICO ES MONOCATENARIO O BICATENARIO COMO ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO…

UN METODO DE FABRICACION DE UNA SONDA DE ACIDO NUCLEICO MARCADO.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/10/1985). Clasificación: C07H21/00.

METODO PARA LA PRODUCCION DE SONDAS DE ACIDO NUCLEICO MARCADO.COMPRENDE LA REACCION PARA FORMAR UN COMPLEJO DE UN ACIDO NUCLEICO QUE SE ENCUENTRA EN FORMA MONOCATENARIA CASI POR COMPLETO Y CONSTITUIDO POR UN COMPUESTO INTERCALADOR COLORANTE; Y SOMETER EL COMPLEJO A IRRADIACION FOTOQUIMICA PARA EFECTUAR LA REACCION COVALENTE. EL COMPONENTE DE UNION TIENE UN MARCADOR, QUE ES UN LIGANDO ESPECIFICAMENTE COMBINABLE, O EL MARCADOR SE UNE AL COMPONENTE DE UNION DESPUES DE LA REACCION FOTOQUIMICA.ESTAS SONDAS TIENEN APLICACIONES EN LA DETECCION EN ENSAYOS DE HIBRIDACION PARA LA DETERMINACION DE SECUENCIAS ESPECIFICAS DE POLINUCLEOTIDOS.

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