Ensayo de toxina botulínica con sensibilidad mejorada.
(01/07/2020) Un método para aumentar la sensibilidad de la detección basada en células de una toxina botulínica, que comprende:
(i) proporcionar una célula transfectada que produce un constructo que comprende;
(a) un primer extremo que comprende una porción que contiene un indicador, en donde la porción que contiene un indicador presenta una señal; y,
(b) un sitio de escisión que interactúa con la toxina botulínica de una manera que produce una escisión de la porción que contiene el indicador de un remanente del constructo;
(ii) exponer la célula transfectada a la toxina botulínica a una primera temperatura de exposición a la toxina;
iii) hacer la transición de la temperatura de la célula transfectada desde la primera temperatura de exposición a la toxina a una segunda temperatura de exposición a la toxina; en donde la primera…
Ensayo de transferencia de energía por resonancia con secuencia de escisión y espaciador.
(06/02/2019) Un constructo que tiene:
una etiqueta donante y una etiqueta aceptora colocadas para proporcionar un acoplamiento electrónico de manera que el donante pueda transferir energía al aceptor 5 mediante un mecanismo de acoplamiento dipolodipolo;
un enlazador dispuesto entre el donante y el aceptor, en donde el enlazador comprende
una secuencia del sitio de escisión seleccionada del grupo que consiste en una proteína SNARE, un motivo SNARE y una muteína SNARE, en donde la secuencia del sitio de escisión incluye un sitio de escisión, un primer espaciador colocado entre el donante y la secuencia del sitio de escisión, en donde el primer espaciador comprende una secuencia peptídica seleccionada del grupo que consiste en (GGGGS)n y (EAAAK)n, donde n es 1 a 3, y
un segundo espaciador colocado…
Ensayo enzimático con fluoróforos duplicados.
(16/10/2018) Un constructo reportero para caracterizar una actividad enzimática comprende: un dominio de anclaje a membrana que comprende un primer péptido que forma un complejo con una membrana de una célula; un dominio reportero que comprende una primera aparición de un segundo péptido que produce una primera señal a una primera longitud de onda y una segunda aparición del segundo péptido que produce una segunda señal a la primera longitud de onda, en donde el dominio reportero produce una señal agregada que es una suma de la primera señal y la segunda señal; una sitio de escisión que comprende un tercer péptido, el sitio de escisión interpuesto entre el dominio de anclaje a membrana y la primera aparición del segundo péptido,…
Células modificadas genéticamente para el ensayo de transferencia de energía por resonancia con el resto del sustrato de sinaptobrevina.
Secciones de la CIP Física Química y metalurgia Necesidades corrientes de la vida
(06/06/2018). Inventor/es: TUCKER,WARD, ZEYTIN,FÜSÛN N. Clasificación: G01N33/53, G01N33/573, C07H21/04, C12Q1/37, A61K38/48.
Una célula genéticamente modificada, que comprende:
un ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína híbrida que tiene una estructura de A-B-C-D,
en donde A comprende un dominio transmembrana que no es escindible por una proteasa BoNT, B comprende una primera proteína fluorescente, C comprende una secuencia de reconocimiento y escisión de proteasa BoNT, y D comprende una segunda proteína fluorescente; en donde el dominio transmembrana se inserta a través de una membrana lipídica de la célula de manera que B, C y D se ubican en el mismo lado de la membrana lipídica,
y
en donde el ácido nucleico comprende un elemento promotor adecuado para la expresión de la proteína híbrida en la célula genéticamente modificada.
PDF original: ES-2676277_T3.pdf
Métodos y compuestos para aumentar la sensibilidad de los ensayos de la botulina.
(16/05/2018) Un método para detectar la presencia de una toxina botulínica, que comprende:
proporcionar un ensayo con una célula que tiene (a) una molécula con sitio de escisión que interactúa con una porción de la toxina botulínica y (b) un reportero que proporciona una señal observable tras la escisión de la molécula en el sitio de escisión inducido por la toxina botulínica, caracterizado porque el reportero comprende una proteína fluorescente; e
incubar la célula en un medio de cultivo que contiene un compuesto de isoquinolinilo eficaz para aumentar la sensibilidad del ensayo en al menos 0,5 log con relación a una sensibilidad de la línea de base proporcionada por el ensayo que utiliza la incubación…
Ensayo de transferencia de energía de resonancia con un resto de sustrato de sinaptobrevina.
Secciones de la CIP Física Química y metalurgia
(30/03/2016). Ver ilustración. Inventor/es: TUCKER,WARD, ZEYTIN,FÜSÛN N. Clasificación: G01N33/53, G01N33/573, C07H21/04.
Procedimiento basado en células de medición de la actividad proteasa de una proteasa BoNT, que comprende:
proporcionar una célula transfectada que produce (I) una proteína híbrida que tiene una estructura de A-BC- D o (II) dos proteínas híbridas que tienen una estructura de A-C-B y A-C-D, respectivamente;
en la que A es un dominio transmembrana que no es escindible por la proteasa BoNT y que inserta a través de una membrana lipídica de forma tal que B, C y D se encuentran en el mismo lado de la membrana lipídica, B es una primera proteína fluorescente, C es una secuencia de reconocimiento y escisión de la proteasa BoNT y D es una segunda proteína fluorescente;
poner en contacto la célula transfectada con una proteasa BoNT en condiciones que permiten a la célula tomar la proteasa BoNT; y
medir la fluorescencia de al menos una de las primera y segunda proteínas fluorescentes en la célula transfectada.
PDF original: ES-2576747_T3.pdf
