(16/03/2016) Un método para purificar una proteína a partir de una solución que comprende: (a) una primera etapa cromatográfica que comprende: - pasar dicha solución por una primera columna cromatográfica, siendo dicha primera columna cromatográfica una columna cromatográfica de afinidad que es una columna con proteína A; - eluir un eluyente proteico crudo de la primera columna cromatográfica utilizando un primer tampón de elución; (b) una segunda etapa cromatográfica que comprende: - pasar el eluyente proteico crudo obtenido al final de la etapa (a) por una segunda columna cromatográfica, siendo dicha segunda columna cromatográfica una columna cromatográfica con una resina multimodal; - eluir un eluido proteico de la segunda columna cromatográfica…

(02/03/2016) Un proceso de cromatografía de intercambio de cationes para purificación de un péptido a partir de una mixtura que comprende dicho péptido e impurezas peptídicas afines constituidas por una forma truncada, forma extendida, forma desamidada, forma plegada incorrectamente, una forma con glicosilación no deseada, forma que carece de ácido σ-carboxi-glutámico, y mixturas de ellas con tal que las mismas se eluyan antes del péptido, teniendo dichas impurezas afines una carga neta local o global diferente comparadas con dicho péptido, y comprendiendo dicho proceso los pasos de: a) elución de dichas impurezas…

(16/12/2015) Un método para aislar osteopontina a partir de una alimentación procedente de leche, método que comprende las operaciones de: a) obtener una alimentación procedente de leche que comprende osteopontina, alimentación procedente de leche que tiene un pH en el intervalo de 3,6-6,5 a 25 °C y una conductancia específica en el intervalo de 0,4-1,0 S/m (4-10 mS/cm) a 25 °C, y en donde dicha alimentación procedente de leche comprende además - caseinomacropéptido en una cantidad de al menos 1% (peso/peso) con respecto a la cantidad total de proteína de la alimentación procedente de leche, b) someter dicha alimentación procedente de leche a cromatografía de intercambio aniónico, que incluye poner la alimentación procedente de leche en contacto con un medio de intercambio aniónico, c) opcionalmente, lavar…

(27/11/2015) Procedimiento para la preparación de plasminógeno, comprendiendo el procedimiento: (a) expresar un plasminógeno recombinante utilizando un sistema de expresión recombinante en condiciones de expresión suficientes para producir un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante; (b) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante con un tampón de solubilización en condiciones de solubilización suficientes para obtener un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado; (c) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado con una solución de replegamiento en condiciones de replegamiento para…

(25/11/2015) Un método para purificar FSH biotecnológica humana o una variante de FSH biotecnológica, que comprende las etapas de someter a un líquido que contiene dicha FSH o la variante de FSH a: • una cromatografía de intercambio aniónico, • una cromatografía de interacción hidrófoba, y • una cromatografía de afinidad de los colorantes, que puede realizarse en cualquier orden, en donde el método no comprende una cromatografía de intercambio aniónico débil ni una cromatografía de fase inversa.

(01/07/2015) Un método para la purificación, a partir de una mezcla de origen, de al menos un complejo de proteínas de choque térmico formado por una proteína de choque térmico complejada con un fragmento de péptido, comprendiendo dicho método las etapas de: (i) proporcionar una mezcla de origen que comprende al menos un complejo de proteínas de choque térmico diana; (ii) determinar el punto isoeléctrico (pI) de dicho al menos un complejo de proteínas de choque térmico diana que se va a purificar de la mezcla de origen; (iii) preparar un lisado de células aclarado a partir de la mezcla de origen que comprende dicho al menos un complejo de proteínas de choque térmico diana; (iv)…

(24/06/2015) Procedimiento para purificar el inhibidor de proteinasa a-1 a partir de una solución acuosa que contiene inhibidor de proteinasa alfa-1, que comprende las etapas de: (a) eliminar una parte de proteínas contaminantes de la solución acuosa para obtener una solución purificada que contiene inhibidor de proteinasa alfa-1, en el que dicha etapa de eliminación comprende las etapas de: (i) precipitar dicha parte de proteínas contaminantes de dicha solución acuosa mediante la adición de un polietilenglicol con un PM entre aproximadamente 3.000 y aproximadamente 4.000 a dicha solución acuosa a una concentración entre el 3% y el 15% en peso por volumen, y ajustar el pH de dicha solución acuosa de aproximadamente 5,0 a aproximadamente 6,0; y (ii) separar dicha parte precipitada de proteínas contaminantes de dicha solución acuosa, obteniendo de…

(24/06/2015) Un método para purificar una proteína diana a partir de una mezcla que contiene una proteína de una célula hospedadora, que comprende someter dicha mezcla a: (a) una primera etapa de purificación de no afinidad, y (b) una segunda etapa de purificación de no afinidad, seguido de (c) filtración de flujo tangencial de alto rendimiento (FTTAR), y (d) aislar dicha proteína hasta una pureza que contiene menos de 100 partes por millón (ppm) de dicha proteína de la célula hospedadora, en el que dicha primera etapa de purificación de no afinidad es la cromatografía de intercambio catiónico y dicha segunda etapa de purificación de no afinidad es cromatografía de intercambio aniónico y en donde el…

(24/06/2015) Un proceso de purificación de FV que comienza a partir de plasma humano o una fracción intermedia enriquecida en FV, en el que la proteína está intacta; dicho proceso comprende dos etapas de cromatografía sobre intercambiadores aniónicos débiles, en el que la primera etapa se lleva a cabo en modo de "no unión", para separar el FV de otros factores de coagulación mientras que la segunda etapa es en modo "captura" de FV; en el que ambos intercambiadores aniónicos débiles de las dos etapas de cromatografía pertenecen a la categoría de intercambiadores débiles que se caracterizan por el grupo funcional dietilaminoetilo (DEAE); en el que las dos etapas de cromatografía están separadas por al menos una etapa de inactivación vírica que se lleva a cabo por un tratamiento disolvente-detergente y en el que tras la segunda etapa de cromatografía, la solución que contiene…

(29/04/2015) Procedimiento para purificar daptomicina que comprende las etapas siguientes a) cargar una solución que comprende daptomicina purificada parcialmente sobre una columna de cromatografía de intercambio aniónico; b) cargar la solución de la etapa a) sobre una columna de cromatografía de fase inversa; c) cargar opcionalmente la solución de la etapa b) sobre otra columna de cromatografía de fase inversa por lo menos una vez; en el que el tampón de elución de a) es una solución de sal monovalente y el tampón de elución de b) es alcohol acuoso.

(21/01/2015) Un método para producir un polipéptido de sialiltransferasa, que comprende las etapas de: a) expresar un polipéptido de sialiltransferasa en células CHO; recoger el medio de cultivo celular que contiene el polipéptido de sialiltransferasa expresado; y b) purificar el polipéptido de sialiltransferasa del medio de cultivo celular sometiendo el medio de cultivo celular a (i) dos etapas de cromatografía de afinidad o una etapa de cromatografía de afinidad y una etapa de cromatografía de modo mixto, (ii) una etapa de cromatografía de intercambio aniónico, y (iii) una etapa de cromatografía de intercambio catiónico, en el que la sialiltransferasa es ST6GalNAcI.

(31/12/2014) Un método para purificar un anticuerpo de una composición que comprende el anticuerpo y al menos un contaminante, comprendiendo dicho método las etapas secuenciales de: (a) cargar la composición en un material de intercambio catiónico en donde la composición está a un primer pH de 4,0 a 6,0; (b) lavar el material de intercambio catiónico con un primer tampón de lavado, en donde el pH del primer tampón de lavado es de 6,8 a 9,0; (c) lavar el material de intercambio catiónico con un segundo tampón de lavado de un pH de 5,0 a 6,0; y (d) eluir el anticuerpo del material de intercambio catiónico con un tampón de elución a una conductividad que es al menos 2 mS/cm mayor que la del segundo tampón de lavado.

(05/11/2014) Producto de inmunoglobulina G (IgG) líquido derivado de plasma en bruto o de una fracción de proteína plasmática en bruto, que tiene las siguientes características: a) una pureza de más del 95%, b) un contenido de monómeros y dímeros de IgG de al menos el 95% y, c) un contenido de IgA de menos de 6 mg de IgA/l en el que la concentración de IgG es del 1-20% en peso.

(22/10/2014) Un método para purificar un polipéptido de una composición que comprende el polipéptido y al menos un contaminante, método que comprende las etapas secuenciales de: a. pasar la composición a través de una membrana de intercambio iónico, en donde el polipéptido y la membrana tienen carga opuesta, en condiciones de funcionamiento que comprenden un tampón que tiene un pH lo suficientemente distinto del pI del polipéptido como para potenciar la carga del polipéptido y una fuerza iónica baja eficaz para prevenir el apantallamiento de las cargas por los iones del tampón, lo que causa que la membrana se una al polipéptido y al por…

(15/10/2014) Un método para purificar un polipéptido a partir de una composición que comprende el polipéptido y contaminantes, en el que el polipéptido es un anticuerpo que se une a HER2 y en el que los contaminantes comprenden una variedad desamidada del anticuerpo, y en donde el método comprende las etapas secuenciales de: (a) cargar la composición sobre una resina de intercambio catiónico con un tampón de equilibrado que tiene una primera concentración de sal; (b) lavar la resina de intercambio catiónico con un tampón de lavado hasta que se mide una concentración predeterminada de proteína en el flujo a través, en donde la concentración de sal del tampón de lavado aumenta desde una segunda concentración de sal inicial que es mayor que la concentración de sal…

(08/10/2014) Un método exento de tensioactivo de producción de un producto de lactoferrina exento de endotoxina mediante la eliminación de la endotoxina unida a una proteína en una composición líquida de lactoferrina, comprendiendo el método las etapas de: a) hacer pasar la composición líquida de lactoferrina que comprende una proteína con endotoxina unida a través de un sistema de intercambio catiónico usando distribución fractal para unir la proteína con la endotoxina unida a la resina de intercambio catiónico; b) eluir la endotoxina de la proteína unida usando una solución salina 0,25-0,35 molar en ausencia de tensioactivo añadido; y c)…

(25/06/2014) Método para obtener una inmunoglobulina en forma monomérica, en el que el método comprende la etapa siguiente: aplicar una solución acuosa tamponada que comprende una inmunoglobulina en forma monomérica y en forma agregada y/o fragmentos de inmunoglobulina a un material cromatográfico de intercambio aniónico, en el que la solución acuosa tamponada presenta un valor de pH de entre pH 8,0 y pH 8,5, y en el que la inmunoglobulina empobrecida en agregados de inmunoglobulina y fragmentos de inmunoglobulina se recupera del eluido del material de cromatografía de intercambio aniónico y de esta manera se obtiene una inmunoglobulina en forma monomérica

(04/06/2014) Un método para aislar proteínas de una disolución que contiene las proteínas, método que incluye: a. poner en contacto la disolución que contiene las proteínas con partículas poliméricas reticuladas funcionalizadas con un copolímero sensible a la temperatura, en donde el copolímero sensible a la temperatura incluye una proporción de grupos químicos ionizables y dicho contacto ocurre a una temperatura entre 30ºC y 80ºC para facilitar la retención de las proteínas por las partículas poliméricas reticuladas; b. reemplazar la disolución que contiene la proteína por una disolución de aclarado; c. reemplazar la disolución de aclarado por una disolución de liberación eficaz para liberar las proteínas de las partículas poliméricas reticuladas…

(21/05/2014) Concentrado de factor de von Willebrand de uso terapéutico que se puede obtener por aplicación de un procedimiento a partir de una fracción biológica de plasma que contiene factor de von Willebrand, que comprende una separación por cromatografía de intercambio de aniones en un soporte de polímero vinílico, de tipo base débil, y que comprende las etapas de a) carga de dicho soporte cromatográfico, previamente equilibrado con un tampón adecuado, con una fracción biológica que contiene factor de von Willebrand, a un caudal predeterminado, lo que permite la retención del factor de von Willebrand b) lavado de dicho soporte cromatográfico con un tampón ácido a un caudal superior al de la etapa a) hasta eliminar las proteínas y los contaminantes no retenidos; c) enjuague…

(08/01/2014) Un método para la obtención de una inmunoglobulina en forma monomérica a partir de una solución quecomprende la inmunoglobulina en forma monomérica y en forma agregada, que se caracteriza porque dicho métodocomprende el siguiente paso: a) aplicar una solución acuosa, tamponada que comprende dicha inmunoglobulina en forma monomérica y enforma agregada a un material de membrana de intercambio catiónico bajo condiciones en donde al menos el 90% de dicha inmunoglobulina en forma monomérica no se une a dicho material de membrana de intercambio decationes, y recuperar dicha inmunoglobulina en forma monomérica a partir de dicha solución acuosa, tamponada después de contactar con dicho material de membrana de intercambio catiónico, por…

(25/12/2013) Procedimiento de preparación de un concentrado de factor de von Willebrand de pureza muy elevada a partir deuna fracción biológica que contiene factor de von Willebrand, caracterizado porque comprende una separaciónmediante cromatografía de intercambio de aniones usando un soporte de polímero vinílico, de tipo base débil,incluyendo dicha separación las etapas de a) - carga del soporte cromatográfico con la fracción que contiene elfactor de von Willebrand, previamente equilibrado con un tampón adecuado, a un caudal predeterminado, lo quepermite la retención del factor de von Willebrand; b) - lavado del soporte con un tampón ácido con un caudal superior al de la etapa a) hasta eliminar las proteínasy los contaminantes no retenidos; c) - enjuague y equilibrado del soporte cromatográfico con el tampón y el caudal de la etapa a); y d) - elución del…

(02/12/2013) Procedimiento para asilar y purificar factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) a partir de unmicroorganismo que produce G-CSF que consiste en las siguientes etapas; a) lisar el microorganismo ajustando la densidad y la temperatura de una suspensión de pasta celular yseparar material insoluble que comprende G-CSF, b) aislar el cuerpo de inclusión (IB) que comprende G-CSF en presencia de agente tensioactivo iónico c) solubilizar el G-CSF presente en el material insoluble, usando un agente caotrópico altamenteconcentrado y un agente desnaturalizante que es tris(2-carboxietil)fosfina HCl (TCEP) d) oxidar el G-CSF en presencia de cistina/cisteína siendo la razón molar de 1:10, e) replegar el G-CSF en condiciones de temperatura…

(05/09/2013) Un procedimiento para purificar inmunoglobulina G (IgG) a partir de una fracción proteica plasmática crudaque contiene inmunoglobulina, en donde el procedimiento comprende las etapas de: (a) preparar una suspensión acuosa de la fracción proteica plasmática cruda que contiene inmunoglobulina,de modo que la concentración de IgG en la suspensión acuosa sea de al menos aproximadamente 4 g/l, elpH de la suspensión que contiene inmunoglobulina está dentro del intervalo de 5,1 a 5,7 y la suspensiónque contiene inmunoglobulina se filtra adicionalmente mediante filtración en profundidad; (b) añadir un agente precipitante de proteína, sustancialmente no desnaturalizante, hidrosoluble a dichasuspensión filtrada de la etapa (a) en…

(23/08/2013) Un procedimiento libre de proteínas de origen animal (APF) de producción de una toxina purificada de Clostridiumbotulinum A, B o F que comprende las etapas de: (a) producir un cultivo de fermentación de Clostridium botulinum utilizando un medio de cultivo libre de proteínasde origen animal, comprendiendo el medio soja hidrolizada; (b) obtener una muestra del cultivo de fermentación de Clostridium botulinum; (c) poner en contacto una resina de columna de interacción hidrófoba con la muestra de cultivo para permitir lacaptura de una toxina botulínica por la columna de interacción hidrófoba; (d) eluir la toxina botulínica de la columna de interacción hidrófoba; (e) cargar una resina de columna de intercambio iónico con el eluyente de la columna de interacción hidrófoba;…

(07/08/2013) Procedimiento para la purificación de un polipéptido de una composición que comprende el polipéptido y un contaminante, comprendiendo dicho procedimiento las siguientes etapas llevadas a cabo de manera secuencial: a)unión del polipéptido a un material de intercambio iónico utilizando un tampón de carga, en donde el tampón de carga está a una primera conductividad y pH; b) lavado del material de intercambio iónico con un tampón intermedio a una segunda conductividad y/o pH para que eluya el contaminante del material de intercambio iónico; c) lavado del material de intercambio iónico con un tampón de lavado que está a una tercera conductividad y/o pH, en donde el cambio de conductividad y/o pH del tampón intermedio al tampón de lavado está en dirección opuesta al cambio en la conductividad y/o…

(30/07/2013) Método para purificar un polipéptido de furina o un polipéptido de furina truncada a partir de una soluciónproteínica, que comprende los siguientes pasos: a) unir dicho polipéptido de furina o polipéptido de furina truncada a una resina mixta de intercambiocatiónico/interacción hidrófoba con potencial para unirse al polipéptido de furina o polipéptido defurina truncada a pH 6,0, y b) recuperar el polipéptido de furina o polipéptido de furina truncada de la resina por elución.

(07/06/2012) La invención se refiere a un procedimiento para obtener un complejo del factor VIII/vWF, que se caracteriza en que el complejo del factor VIII/vWF de una solución de proteínas se une con un intercambiador de cationes y el complejo de factor VIII/vWF que contiene especialmente multímeros de vWF de alto peso molecular se obtiene mediante levigación gradual. La invención también se refiere a un complejo de factor VIII/vWF que puede obtenerse mediante cromatografía de intercambio de cationes.

(01/06/2012) Procedimiento para obtener una composición de IgG mediante tratamiento térmico. La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento de obtención de una composición de IgG a partir de una solución de IgG parcialmente purificada de plasma humano, en el que aplicando un tratamiento térmico intermedio y sin utilizar reactivos para la precipitación de agregados/polímeros y/o proteínas de alto peso molecular, se obtiene una eliminación prácticamente total de los polímeros de IgG generados durante el proceso. Además, dicho procedimiento presenta una elevada productividad, menores costes de producción y un fácil manejo, en comparación con los procedimientos de la técnica anterior. Por otra parte, con la utilización de dicho procedimiento se proporciona estabilidad al producto final en líquido.

(02/05/2012) El método para la purificación de una eritropoyetina monopegilada que comprende los pasos de proporcionar unasolución que comprende eritropoyetina monopegilada, polipegilada y no pegilada, en el que se realizan dos pasos decromatografía de intercambio de cationes consecutivos, y la recuperación de la eritropoyetina monopegiladapurificada en el segundo paso de cromatografía de intercambio de cationes, que se caracteriza porque se utiliza elmismo tipo de material de intercambio de cationes en ambos pasos de cromatografía de intercambio de cationes yporque los dos pasos de cromatografía de intercambio de cationes consecutivos se realizan utilizando diferentesmétodos de elución, y en el que los dos pasos…