CIP 2015 : C07K 1/18 : Cromatografía de intercambio iónico.

CIP2015CC07C07KC07K 1/00C07K 1/18[3] › Cromatografía de intercambio iónico.

Notas[t] desde C01 hasta C14: QUIMICA

C SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.

C07 QUIMICA ORGANICA.

C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00).

C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos.

C07K 1/18 · · · Cromatografía de intercambio iónico.

CIP2015: Invenciones publicadas en esta sección.

Eliminación de impurezas de cultivos celulares residuales.

(29/07/2020). Solicitante/s: NOVARTIS AG. Inventor/es: NORMAN,CARNLEY, SUDA,ERIC, DOWLESS,KAYLA, ASTIGARRAGA,RUIZ, BASTEK,PATRICK, YANNONE,VAISHALI.

Un método para eliminar la Proteína Nuclear (NP) de la Gripe de una preparación que comprende proteínas del virus de la gripe de interés que incluyen hemaglutinina (HA), el método comprendiendo los pasos de: a. dividir una preparación del virus de la gripe derivada de cultivos celulares o huevos, b. añadir ácido caprílico a la preparación del virus en donde el ácido caprílico está presente a una concentración de 25 mM-500 mM, de tal manera que no se produzca una precipitación sustancial de proteínas o ADN, y c. procesar la preparación del virus a través de una matriz de intercambio iónico, en donde la membrana es Sartobind Q, o en donde la resina es Fractogel TMAE, por lo que la proteína nuclear se une a la matriz de intercambio iónico.

PDF original: ES-2817928_T3.pdf

Purificación de proteínas.

(29/07/2020) Un proceso para la purificación de una proteína de interés a partir de una mezcla que comprende las etapas de a) en un ciclo de cromatografía operativo, cargar un primer volumen de una mezcla que contiene la proteína de interés desde un primer recipiente a una matriz cromatográfica operada de tal manera que la proteína se une a la matriz cromatográfica hasta que se alcanza de un 40 % a un 100 % de la capacidad de unión estática de la matriz cromatográfica; b) recoger el flujo continuo que contiene la proteína de interés no unida en un segundo recipiente, y c) en un ciclo de cromatografía operativo adicional, volver a cargar el flujo continuo del segundo recipiente y cargar un segundo volumen de la proteína de interés desde el primer recipiente a la misma matriz cromatográfica, hacerla funcionar de manera que la proteína de interés se una a…

Membranas para cromatografía formadas por reacciones de polimerización clic de tiol-eno o tiol-ino.

(10/06/2020). Solicitante/s: Merck Millipore Ltd. Inventor/es: RAGHEB,AMRO, SKARJA,GARY.

Un material compuesto, que comprende: un miembro de soporte, que comprende una pluralidad de poros que se extienden a través del miembro de soporte; y un gel reticulado macroporoso, en donde el gel reticulado comprende un polímero derivado de un primer monómero y un primer reticulador; en donde el gel reticulado macroporoso se encuentra en los poros del miembro de soporte; el gel reticulado macroporoso tiene macroporos que son más pequeños que los poros del miembro de soporte; el primer monómero comprende dos grupos funcionales tiol; y el primer reticulador comprende (i) al menos tres dobles enlaces carbono-carbono, (ii) al menos dos triples enlaces carbono-carbono, o (iii) al menos un triple enlace carbono-carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono.

PDF original: ES-2811137_T3.pdf

Eliminación de agregados de proteína de preparaciones biofarmacéuticas en un modo de flujo continuo.

(27/05/2020). Solicitante/s: MERCK PATENT GMBH. Inventor/es: Kozlov,Mikhail, UMANA,JOAQUIN, CATALDO,WILLIAM, POTTY,AJISH, GALIPEAU,KEVIN, HAMZIK,JAMES, PEECK,LARS.

Un método de cromatografía de flujo continuo para separar una proteína monomérica de interés de agregados de proteína en una muestra, comprendiendo el método poner en contacto la muestra con un soporte sólido que comprende un polímero fijado al mismo, en donde el polímero comprende ácido 2-acrilamido-2- metilpropanosulfónico y N,N-dimetilacrilamida, en donde los grupos N,N-dimetilacrilamida están presentes en una cantidad mayor que el ácido 2-acrilamido-2-metilpropanosulfónico, separando se esta manera la proteína monomérica de interés de los agregados de proteína.

PDF original: ES-2812648_T3.pdf

Método de separación de proteína monomérica de agregados de proteínas con una membrana porosa que comprende un copolímero de acrilamida de bencilo y acrilamida.

(27/05/2020). Ver ilustración. Solicitante/s: EMD Millipore Corporation. Inventor/es: Kozlov,Mikhail, CATALDO,WILLIAM, CARON,JEFFREY.

Un método de separación de una proteína monomérica de interés de los agregados de proteínas en una muestra, comprendiendo el método poner en contacto la muestra con una membrana porosa que comprende un copolímero de acrilamida de bencilo y acrilamida, en donde la membrana se une selectivamente a los agregados de proteínas, separando, de ese modo, la proteína monomérica de interés de los agregados de proteínas.

PDF original: ES-2810232_T3.pdf

Proceso para la purificación de daptomicina.

(06/05/2020). Solicitante/s: Cubist Pharmaceuticals LLC. Inventor/es: KELLEHER,THOMAS J, LAI,JAN-JI, DECOURCEY,JOSEPH P, ZENONI, MAURIZIO, TAGLIANI, AURO R.

Un método para purificar daptomicina que comprende: a) someter a la daptomicina a condiciones en las que una solución micelar de daptomicina se forma alterando el pH; y b) separar las micelas de daptomicina en la solución micelar de daptomicina de los contaminantes de bajo peso molecular mediante una técnica de separación por tamaño.

PDF original: ES-2799702_T3.pdf

Método de purificación de conjugados basados en IL-15/IL-15Ralfa.

(06/05/2020) Método para preparar una composición que comprende conjugados monoméricos a partir de una muestra, comprendiendo dicho conjugado: a) un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de interleucina 15, y b) un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos del dominio sushi de IL-15Rα; en el que dicho conjugado tiene una secuencia de aminoácidos que consiste en SEQ ID NO: 16 o SEQ ID NO: 17, en el que dicho método comprende el uso de cromatografía de intercambio aniónico (AEX) realizada a un pH igual a o mayor de 7,0, seguido por una cromatografía de interacción hidrófoba (HIC) en dicha muestra llevada a cabo en una disolución de tampón…

Un procedimiento de cromatografía de reparto débil.

(06/05/2020). Solicitante/s: WYETH LLC. Inventor/es: SUN, SHUJUN, BROWN, PAUL, KELLEY, BRIAN, D., GODAVARTI,RANGANATHAN, COFFMAN,JON, ISKRA,TIM, VUNNUM,SURESH, YU,TIANNING, BOOTH,JAMES EDWARD, SWITZER,MARY BETH.

Un procedimiento de recuperación de un producto purificado de un fluido de carga que incluye una o más impurezas, que comprende las etapas de: hacer pasar el fluido de carga a través de un medio en condiciones de operación que hacen que el medio se una al menos a entre 1 y 70 mg de producto por ml de medio y se definen mediante un coeficiente de reparto de 0,3 a 20; y recuperar el producto purificado en el efluente de columna durante el ciclo de carga y cualquier lavado esencialmente isocrático.

PDF original: ES-2797480_T3.pdf

Lipopéptidos de alta pureza, micelas de lipopéptidos y procesos para preparar los mismos.

(06/05/2020). Solicitante/s: Cubist Pharmaceuticals LLC. Inventor/es: ZENONI, MAURIZIO, TAGLIANI, AURO R., KELLEHER,THOMAS J, LAI,JAN-JI, DECOURCEY,JOSEPH P.

Un método para purificar daptomicina a partir de moléculas o agregados de alto peso molecular, en donde la daptomicina se proporciona en forma micelar, dicho método comprendiendo: a. someter la daptomicina micelar a condiciones en las que la daptomicina está en forma monomérica alterando el pH; y b. separar las moléculas de daptomicina monomérica de moléculas o agregados de alto peso molecular mediante una técnica de separación por tamaño.

PDF original: ES-2799706_T3.pdf

Procedimiento escalable industrialmente para recuperar proteínas transportadoras recombinantes biológicamente activas.

(18/03/2020) Procedimiento para la preparación de proteínas transportadoras seleccionadas de toxoide tetánico (TT), toxoide diftérico (DT), material de reacción cruzada 197 (CRM197), proteína D de Haemophilus influenzae, proteína de la membrana exterior de Neisseria, toxina pertúsica (PT), pertactina (PRN) y hemaglutinina filamentosa (FHA), que comprende las etapas de: a) transformación de Escherichia coli con el gen deseado que codifica para la proteína transportadora usando un vector plasmídico, b) cultivo de la Escherichia coli transformada en medio de cultivo adecuado en condiciones adecuadas, c) aislamiento y purificación de cuerpos de inclusión, d) desnaturalización y solubilización…

Sistema de tampón para purificación de proteína.

(26/02/2020). Solicitante/s: GLAXOSMITHKLINE LLC. Inventor/es: GOKLEN,KENT,E, SUDA,ERIC J, UBIERA,ANTONIO RAUL.

Un sistema de cromatografía que comprende: (i) un sistema de tampón de múltiples componentes libre de cloruro de sodio para la purificación de una proteína recombinante; y (ii) una serie de unidades de cromatografía, en el que las unidades de cromatografía comprenden cromatografía de afinidad y una o más unidades de cromatografía adicionales elegidas entre: cromatografía de intercambio aniónico, cromatografía de intercambio catiónico y cromatografía de modo mixto, en el que las unidades de cromatografía son operadas en modo de flujo pasante o modo de eluato unido en el que los componentes del sistema de tampón de múltiples componentes libre de cloruro de sodio comprenden: (a) un ácido orgánico; (b) un metal alcalino o una sal de amonio de la base conjugada del ácido orgánico de (a); y (c) una base orgánica; y en el que el sistema de tampón de múltiples componentes libre de cloruro de sodio es usada en la serie de unidades de cromatografía.

PDF original: ES-2784628_T3.pdf

Método para purificar proteínas PEGiladas.

(26/02/2020). Solicitante/s: NOVO NORDISK HEALTH CARE AG. Inventor/es: BOGSNES, ARE, WIENDAHL,MATTHIAS KARL DIETRICH, SEJERSGAARD,LARS.

Un método para purificar una proteína PEGilada que comprende cromatografía de intercambio aniónico con un tampón de elución, caracterizado porque dicha cromatografía comprende una etapa de eliminación de impurezas antes de la elución en donde dicha etapa de eliminación de impurezas comprende lavar dicha columna de intercambio aniónico con un tampón ácido a un pH de entre 3,9 y 4,5, en donde la proteína PEGilada se selecciona del grupo que consiste en Factor II (FII), Factor VII (FVII), Factor IX (FIX), Factor X (FX), proteína S y proteína C.

PDF original: ES-2792473_T3.pdf

Método de purificación para proteínas de unión a cationes divalentes sobre resina de intercambio aniónico.

(26/02/2020) Método para la purificación de una proteína de unión a cationes divalentes que comprende las etapas de: a) cargar un material de resina de intercambio aniónico con la proteína de unión a cationes divalentes en un tampón de carga en ausencia de cationes divalentes, y opcionalmente lavar el material de resina de intercambio aniónico cargado con un tampón de lavado en ausencia de cationes divalentes; y b) eluir la proteína de unión a cationes divalentes con un eluyente que comprende al menos un catión divalente para formar un eluido que contiene la proteína de unión a cationes divalentes; en el que el eluyente en la etapa (b) tiene un pH mayor que el pH del tampón de lavado en la etapa (a), o, en caso de no llevarse a cabo la etapa de lavado, del tampón…

Procedimiento de purificación de inmunoglobulina.

(19/02/2020) Un procedimiento de purificación de una inmunoglobulina, que comprende las etapas de: (a) disolver una pasta de fracción II de proteína plasmática que contiene inmunoglobulina, seguido de filtración para obtener una solución de fracción II; (b) dializar y/o concentrar la solución de fracción II obtenida, someter la solución dializada y/o concentrada a cromatografía de intercambio aniónico, y recuperar una fracción no unida a una columna de la cromatografía de intercambio aniónico; (c) tratar la fracción recuperada con un solvente y/o un detergente para inactivar virus, seguido de someter la fracción a cromatografía de intercambio catiónico para eliminar el solvente y/o el detergente,…

Nuevo método de purificación eficiente de albumina sérica humana.

(12/02/2020) Un método para la purificación de la albúmina humana recombinante, comprendiendo el método las etapas de: a. separar la pluralidad de células del caldo de fermentación o el cultivo mediante centrifugación ; b. microfiltrar el sobrenadante libre de células obtenido ; c. concentrar el sobrenadante microfiltrado y diafiltrarlo contra agua ; d. cargar la muestra diafiltrada en una columna de intercambio catiónico para purificación en modo de unión y elución ; e. separar la albúmina monomérica de los agregados y productos de degradación mediante cromatografía de interacción hidrofóbica mediante la adición de cisteína 5-30mM y caprilato…

Purificación de inmunoglobulina con el uso de etapas de limpieza previa.

(12/02/2020) El procedimiento de purificación de una inmunoglobulina de una muestra que comprende la inmunoglobulina y al menos una impureza, el procedimiento comprende las siguientes etapas en el siguiente orden: (a) exponer la muestra a cromatografía de intercambio iónico y obtener la inmunoglobulina, que no está unida a la resina de cromatografía de intercambio iónico, en el flujo continuo; (b) exponer el flujo continuo obtenido en la etapa (a) ya sea a la cromatografía de afinidad de proteína A, en el que la inmunoglobulina es unida a la resina de cromatografía de afinidad de proteína A, y obtener la inmunoglobulina en el eluato eluyendo la proteína a partir de la resina de cromatografía de afinidad de proteína A, o a la cromatografía de modo mixto, en el que la inmunoglobulina es unida a la…

Método para purificar antitrombina.

(25/12/2019). Solicitante/s: Kyowa Kirin Co., Ltd. Inventor/es: SUZAWA,TOSHIYUKI, SUGIHARA,TSUTOMU, ISODA,TOMOKO, TANIGUCHI,YUYA, NOMURA,HIDETAKA.

Método para purificar antitrombina, que comprende las etapas de: (a) adsorber la antitrombina sobre el portador de intercambio aniónico, (b) lavar con un amortiguador que contiene glicina para lavar y eliminar impurezas, y (c) eluir la antitrombina adsorbida sobre el portador de intercambio aniónico aumentando la concentración de sal o la conductividad del amortiguador o variando el pH del amortiguador, en el que la antitrombina mantiene una relación de unión de ácido siálico de 70% o más, en el que la relación de unión de ácido siálico representa una relación del número medido de ácidos siálicos unidos al número máximo teórico de ácidos siálicos unidos en la proteína.

PDF original: ES-2774284_T3.pdf

Métodos para producir una preparación de IgG derivadas de plasma humano enriquecida en IgG naturales relacionadas con enfermedad cerebral.

(04/12/2019) Método para preparar una preparación de inmunoglobulina enriquecida en inmunoglobulinas relacionadas con enfermedad cerebral, comprendiendo el método las etapas de: (A) proporcionar una composición de inmunoglobulinas derivadas de plasma que comprende inmunoglobulinas IgG, incluyendo las inmunoglobulinas IgG una inmunoglobulina anti-beta-amiloide, una inmunoglobulina anti-RAGE, una inmunoglobulina anti-α-sinucleína, u otra inmunoglobulina específica para una proteína relacionada con enfermedad cerebral; (B) unir las inmunoglobulinas IgG a un material de intercambio catiónico; (C) eluir la mayoría de las inmunoglobulinas IgG unidas del material de intercambio catiónico, en una primera etapa de elución…

Procedimiento de purificación de inmunoglobulina.

(13/11/2019) Un procedimiento de purificación de una inmunoglobulina, que comprende las etapas de: (a) disolver la fracción I + II + III o fracción II + III de proteína plasmática que contiene inmunoglobulina, seguido de la realización de una reacción de precipitación añadiendo ácido caprílico; (b) eliminar un precipitado producido a partir de (a), seguido por la filtración de un sobrenadante que comprende inmunoglobulina, concentrar un filtrado, someter un concentrado a cromatografía de intercambio aniónico y recuperar una fracción no unida a la columna de la cromatografía de intercambio aniónico; (c) tratar la fracción recuperada con un disolvente/detergente…

DsbA y DsbC ultrapurificadas y procedimientos de preparación y uso de las mismas.

(16/10/2019) Un procedimiento para purificar un polipéptido de disulfuro oxidorreductasa A (DsbA) de un lisado celular que comprende el polipéptido de DsbA, comprendiendo el procedimiento a) añadir polietilenimina (PEI) a una concentración final de un 0,01 % a 1,0 %, preferentemente un 0,1 %, a un lisado celular que comprende el polipéptido de DsbA, b) clarificar el lisado celular mediante centrifugación, c) aplicar el lisado celular clarificado que comprende el polipéptido de DsbA a un material de cromatografía de intercambio aniónico, d) eluir el polipéptido de DsbA del material de cromatografía de intercambio…

Purificación de galactocerebrósido beta-galactosidasa humana recombinante (galchr).

(25/09/2019) Un proceso para purificar Galactocerebrósido ß-Galactosidasa humana recombinante (GALChr) a partir de un cultivo celular, en el que una fracción de dicho cultivo celular que comprende GALChr se somete a cromatografía en resinas, comprendiendo el proceso a) Una etapa de captura en la que dicha GALChr se purifica en una primera resina cromatográfica multimodal que se une a través de interacciones al menos hidrófobas y electrostáticas y que comprende ligandos electrostáticos, seguida opcionalmente de inactivación de virus y/o purificación mediante separación iónica; b) Una etapa intermedia en la que dicha GALChr se purifica en una segunda resina cromatográfica multimodal que comprende un ligando aniónico e hidrófobo, seguida opcionalmente de inactivación de virus y/o purificación mediante separación iónica; c) Una etapa…

Inmunoglobulina reducida en agentes trombogénicos y preparación de la misma.

(18/09/2019). Solicitante/s: OMRIX BIOPHARMACEUTICALS LTD.. Inventor/es: NUR, ISRAEL, BAR, LILIANA, MEIDLER,ROBERTO, BELYAEV,OLEG, MINTZ,RONI.

Un método para eliminar el activador de precalicreína y un agente trombogénico seleccionado de Factor XI y/o Factor XIa de una solución que contiene inmunoglobulina, el método comprendiendo los pasos de: (a) eliminar el Factor XI y/o el Factor XIa poniendo en contacto la solución que contiene inmunoglobulina a un pH en el intervalo de más de 3,8 a igual o menos de 5,3 con un soporte que comprende grupos cargados negativamente inmovilizados para permitir la unión del Factor XI y/o Factor XIa; y recoger una fracción no unida que comprende IgG; y (b) eliminar el activador de precalicreína poniendo en contacto la solución que contiene inmunoglobulina a un pH en el intervalo de 7 a 8,2 con un soporte que comprende grupos cargados positivamente inmovilizados para permitir la unión del activador de la precalicreína; y recoger una fracción no unida que comprende IgG; en donde el método emplea el paso (a) seguido del paso (b) o el paso (b) seguido del paso (a).

PDF original: ES-2756798_T3.pdf

Proceso para la purificación de proteínas que contienen fragmentos Fc.

(14/08/2019). Solicitante/s: ARES TRADING S.A.. Inventor/es: EON-DUVAL,ALEX, LAMPROYE,ALAIN.

Método para reducir la concentración de restos Fc libres en un líquido que comprende una proteína que contiene Fc, comprendiendo el método someter a dicho líquido a cromatografía de intercambio catiónico en una resina de intercambio catiónico a un pH de al menos una unidad por debajo del punto isoeléctrico (pI) de dicha proteína que contiene Fc y lavar la resina de intercambio catiónico con un tampón con una conductividad de 8,2 a 8,6 mS/cm y un pH de 5,5 a 7,5.

PDF original: ES-2755386_T3.pdf

Métodos para eliminar un contaminante usando cromatografía de membrana de intercambio iónico de desplazamiento de proteínas indígenas.

(31/07/2019). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Inventor/es: TULLY,TIMOTHY, BROWN,ARICK, BILL,JEROME JR, DOWD,CHRISTOPHER.

Un método para purificar un anticuerpo monoclonal de una composición que comprende el anticuerpo monoclonal y al menos un contaminante, método que comprende las etapas secuenciales de: a. pasar la composición a través de una membrana de intercambio catiónico, en donde el anticuerpo monoclonal y la membrana tienen carga opuesta, a condiciones de funcionamiento que comprenden un tampón que tenga un pH de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 unidades de pH por debajo del pI del anticuerpo monoclonal y una conductividad de ≤ aproximadamente 40 mS/cm, lo que causa que la membrana se una al anticuerpo monoclonal y al por lo menos un contaminante, y b. recuperar el anticuerpo monoclonal purificado del efluente.

PDF original: ES-2749190_T3.pdf

Activación de factor X.

(31/07/2019). Ver ilustración. Solicitante/s: Baxalta Incorporated. Inventor/es: HASSLACHER, MEINHARD, FIEDLER, CHRISTIAN, DOCKAL,MICHAEL, HORLING,FRANZISKA, GATTERNIG,THOMAS, BOHM,EMST.

Método para activar el factor de coagulación X (FX) que comprende; a) poner en contacto una disolución acuosa que comprende FX con un material de intercambio aniónico en condiciones de unión durante un periodo de contacto de al menos horas; y b) eluir el FX activado (FXa) del material de intercambio aniónico con un tampón de elución, opcionalmente en el que el FX en la disolución acuosa es un FX aislado de plasma de mamífero o sobrenadante de células de cultivo tisular.

PDF original: ES-2752177_T3.pdf

Método simple para eliminación simultánea de múltiples impurezas a partir de sobrenadantes de cultivo a niveles ultrabajos.

(24/07/2019). Solicitante/s: Serum Institute of India Private Limited. Inventor/es: LEES, ANDREW, JOSHI,JAYANT.

Un proceso de purificación que comprende: poner en contacto una mezcla que contiene una sustancia diana y uno o más contaminantes, en el que al menos uno del único o más contaminantes es una endotoxina, con una matriz de cromatografía de intercambio iónico de manera tal que la sustancia diana se une con la matriz de cromatografía; lavar la sustancia diana de unión con al menos un regulador de lavado que contiene un primer regulador de lavado que comprende una combinación de un disolvente orgánico, un detergente y un componente de sal; proceder con la desorción de la sustancia diana de unión de la matriz de cromatografía con un eluyente; y recolectar la sustancia diana desorbida en el que el eluido que contiene la sustancia diana desorbida contiene no más que 3 EU/mg de endotoxina; en el que el disolvente orgánico comprende isopropanol al 2-30%, el componente de sal comprende NaCl 10-2000 mM y el detergente comprende Triton X-100 al 0,01-1%.

PDF original: ES-2743156_T3.pdf

Procedimiento de purificación de un anticuerpo monoclonal.

(19/07/2019) Procedimiento de purificación de un anticuerpo monoclonal o de una proteína de fusión entre el fragmento Fc de un anticuerpo y un segundo polipéptido, que comprende: a) una etapa de cromatografía de afinidad sobre una resina que tiene por matriz un gel de polímero de metacrilato reticulado, sobre el cual se injerta la proteína A, b) una etapa de inactivación viral, c) una etapa de cromatografía intercambiadora de cationes sobre una resina que tiene por matriz un gel de agarosa reticulado, sobre el cual se injertan unos grupos sulfonato (-SO3-) por medio de brazos espaciadores a base de dextrano, d) una etapa de cromatografía intercambiadora de aniones sobre una membrana hidrófila de polietersulfona…

Métodos de preparación para una generación novedosa de productos de KLH biológicamente seguros usados para el tratamiento contra el cáncer, para el desarrollo de vacunas terapéuticas conjugadas y como agentes de exposición.

(24/06/2019). Solicitante/s: BIOSYN ARZNEIMITTEL GMBH. Inventor/es: STIEFEL, THOMAS, KOTTWITZ,ORTWIN, MUDDUKRISHNA,SHAMMANA N.

Método de aislamiento y/o purificación de hemocianina o inmunocianina que comprende las etapas de: a) proporcionar una formulación de hemocianina, en el que la formulación de hemocianina es un suero de hemolinfa derivado de un molusco marino; b) reducir la conductividad de la formulación proporcionada en a) hasta un valor de entre 30 mS/cm y 10 mS/cm añadiendo un tampón de dilución; c) añadir la formulación diluida de hemocianina obtenida en la etapa b) a una columna de cromatografía de intercambio aniónico; d) lavar la columna con un tampón para purificar la hemocianina, preferiblemente para eliminar sales, y otras proteínas; y e) eluir la hemocianina o inmunocianina de la columna añadiendo un segundo tampón.

PDF original: ES-2717683_T3.pdf

Elucidación de la optimización de entrada en cromatografía de intercambio iónico.

(26/03/2019). Solicitante/s: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG. Inventor/es: MCDONALD,DANIEL, PATAPOFF,THOMAS, WANG,YAJUN.

Un procedimiento para identificar una condición de separación por cromatografía de intercambio iónico óptima para analizar una pluralidad de composiciones, en el que cada composición comprende un polipéptido y uno o más contaminantes, comprendiendo el procedimiento a) representar una curva de carga neta frente al pH en una temperatura seleccionada basada en la composición de aminoácidos de los polipéptidos de dos o más de las composiciones, y b) determinar el punto de inflexión de la curva de carga neta frente al pH en o cerca de pH neutro determinando la segunda derivada de las representaciones de la etapa a); en el que la condición de separación por cromatografía de intercambio iónico óptima es un pH en aproximadamente un punto de inflexión común para el/los polipéptido(s) de una o más de las composiciones.

PDF original: ES-2705700_T3.pdf

Procedimiento para la regeneración de una columna de cromatografía.

(13/03/2019). Solicitante/s: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG. Inventor/es: BURG, JOSEF, REICHERT,Klaus, SCHROTH,Axel, SCHURIG,Hartmut, WESSNER,Axel.

Procedimiento para la regeneración de una columna de cromatografía de intercambio catiónico fuerte después de la elución de compuestos de interés que comprende las siguientes etapas en este orden: - eluir polipéptidos adsorbidos de la columna con una solución tamponada acuosa que comprende cloruro de sodio a una concentración de al menos 500 mM, - limpiar la columna con agua purificada, - aplicar una solución de hidróxido de sodio 0,5 M a la columna, - limpiar la columna con agua purificada, - aplicar una solución que comprende dihidrogenofosfato de sodio 0,5 M y ácido fosfórico 1 M a la columna, - limpiar la columna con agua purificada, - aplicar una solución de hidróxido de sodio 0,5 M a la columna durante al menos 4 horas, y - regenerar la columna de cromatografía de intercambio catiónico limpiando la columna con agua purificada.

PDF original: ES-2704013_T3.pdf

Purificación de proteínas mediante cromatografía de intercambio aniónico.

(20/02/2019) Procedimiento para la purificación de una proteína de unión a cationes divalentes que comprende las etapas de: (a) cargar un primer material de resina de intercambio aniónico con la proteína de unión a cationes divalentes en un tampón de carga en ausencia de cationes divalentes o a una baja concentración de los mismos, en el que la baja concentración se refiere a una concentración de 1000 mM como máximo; y opcionalmente lavar el material de resina de intercambio aniónico cargado con un tampón de lavado en ausencia de cationes divalentes; (b) eluir la proteína de unión a cationes divalentes con un eluyente que comprende un contraanión para formar un eluato que contiene la proteína de unión a cationes divalentes; (c) complementar el eluato obtenido en la etapa (b) con al menos un catión divalente y aumentar el pH; (d)…

Un método de purificación de anticuerpos.

(19/11/2018) Un método para la preparación de una población de anticuerpos en el que más del 65 % de la población son anticuerpos activos, que comprende: (a) cargar una muestra que comprende una mezcla de anticuerpos en una columna de intercambio catiónico preequilibrada, después, lavar opcionalmente la columna con un tampón de lavado y eluir los anticuerpos unidos a la columna con un tampón de elución, retirando de este modo las proteínas de la célula hospedadora (PCH) y las isoformas de anticuerpos de la muestra, en el que la muestra de la etapa (a) tiene una conductividad de 5 a 7 mS/cm; (b) cargar una muestra preparada mediante la mezcla de sal con el eluato de la etapa (a) en una columna de interacción hidrófoba (CIH) y eluir…

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