Composiciones y métodos para la biosíntesis de vainillina o beta-D-glucósido de vainillina.

Un método para producir vainillina y/o beta-D-glucósido de vainillina que comprende

(A) proporcionar un hospedante recombinante capaz de producir vainillina,

en donde dicho hospedante recombinante es un microorganismo, planta o célula de planta y alberga un ácido nucleico heterólogo que codifica un polipéptido de la enzima multifuncional Arom (AROM) mutante, cuyo polipéptido de AROM mutante tiene una secuencia de aminoácidos que comparte al menos 80 por ciento de identidad de secuencia con la SEQ ID NO: 4, determinado a lo largo de la longitud entera de la SEQ ID NO: 4, presenta actividad de 3-deshidroquinato deshidratasa, actividad de 3-deshidroquinato sintasa, actividad de 3-fosfoshikimato 1-carboxiviniltransferasa, actividad de shikimato quinasa, menor actividad de shikimato 3-deshidrogenasa (NADP+), y comprende una o más de las siguientes mutaciones:

(a) un aminoácido distinto de valina en una posición que se alinea con la posición 1349 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(b) un aminoácido distinto de treonina en una posición que se alinea con la posición 1366 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(c) un aminoácido distinto de lisina en una posición que se alinea con la posición 1370 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(d) un aminoácido distinto de isoleucina en una posición que se alinea con la posición 1387 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(e) un aminoácido distinto de treonina en una posición que se alinea con la posición 1392 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(f) un aminoácido distinto de alanina en una posición que se alinea con la posición 1441 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(g) un aminoácido distinto de arginina en una posición que se alinea con la posición 1458 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(h) un aminoácido distinto de prolina en una posición que se alinea con la posición 1500 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4;

(i) un aminoácido distinto de alanina en una posición que se alinea con la posición 1533 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4; y

(j) un aminoácido distinto de triptófano en una posición que se alinea con la posición 1571 de la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 4; o

tiene un aminoácido como se expone en la SEQ ID NO: 2;

(B) cultivar dicho hospedante recombinante durante un tiempo suficiente para que dicho hospedante recombinante produzca vainillina y/o glucósido de vainillina; y

(C) aislar la vainillina y/o glucósido de vainillina de dicho hospedante recombinante o del líquido sobrenadante del cultivo, produciendo así vainillina y/o beta-D-glucósido de vainillina.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/049842.

Solicitante: INTERNATIONAL FLAVORS & FRAGRANCES INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 521 WEST 57TH STREET NEW YORK, NY 10019 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: SHERIDAN,JOSEPH M, HEAL,JONATHAN R, HAMILTON,WILLIAM D.O, HANSEN,JOERGEN, HANSEN,ESBEN HALKJAER, HONEY,POLUR.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N1/20 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
  • C12N9/04 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre grupos CHOH como dadores, p. ej. glucosa oxidasa de glucosa, deshidrogenasa láctica (1.1).
  • C12P1/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 1/00 Preparación de compuestos o de composiciones, no prevista en los grupos C12P 3/00 - C12P 39/00, utilizando microorganismos o enzimas; Procedimientos generales de preparación de compuestos o composiciones que utilizan microorganismos o enzimas. › utilizando bacterias.
  • C12P7/22 C12P […] › C12P 7/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen oxígeno. › aromáticos.

PDF original: ES-2719304_T3.pdf

 

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