Secreción de insulina glargina funcional directamente en el medio de cultivo mediante la sobreexpresión intracelularmente de Kex2p.
Un procedimiento de producción de una insulina glargina funcional de dos cadenas completamente plegada,
comprendiendo dicho procedimiento las etapas de:
i) introducir un ácido nucleico que codifica un pro-péptido de glargina y un ácido nucleico que codifica una proteasa en Pichia pastoris, obteniendo de esta manera una célula huésped de Pichia pastoris recombinante; en donde la proteasa es la kexina endoproteasa (Kex2p) codificada por la SEQ ID NO: 2, y en donde la secuencia codificante de la proteasa está bajo el control de un promotor constitutivo o un promotor inducible;
ii) co-expresar dicho pro-péptido y la proteasa en la célula huésped de Pichia pastoris recombinante; y
iii) obtener una insulina glargina completamente funcional, sin un procesamiento adicional para dar lugar a la insulina glargina funcionalmente activa como un análogo de insulina.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2012/052853.
Solicitante: BIOCON LIMITED.
Inventor/es: SASTRY,KEDARNATH NANJUND, SREENIVAS,SUMA, GOVINDAPPA,NAGARAJ, KANOJIA,KOMAL N, BASAVARAJU,YOGESH.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K14/62 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Insulinas.
- C12N15/81 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › para levaduras.
- C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
PDF original: ES-2665853_T3.pdf
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