Ensayos homogéneos con fase de disolución.

Un método de ensayo para un analito en una muestra, comprendiendo el método de ensayo:

formar una mezcla de reacción en una solución acuosa, en cualquier orden o de forma simultánea añadiendo

muestra,

un compañero de unión específica marcado con quimioluminiscente,

un compañero de unión específica marcado con activador, en donde la marca de activador efectúa la activación de la marca quimioluminiscente, y

un inhibidor selectivo de señal,

en donde todos los componentes son solubles en solución acuosa,

en donde el compañero de unión específica marcado con quimioluminiscente y el compañero de unión específica marcado con activador se unen a analito presente en la muestra para formar un complejo de unión;

añadiendo a la mezcla de reacción una solución activadora, en donde la solución activadora libera una señal quimioluminiscente detectable correlacionada con la cantidad de compañero de unión específica marcado con quimioluminiscente unido a analito y de compañero de unión específica marcado con activador unido a analito en la mezcla de reacción,

en donde el inhibidor selectivo de señal se selecciona del grupo que consiste en **Fórmula**

en donde:

el compañero de unión específica marcado con quimioluminiscente comprende un compuesto con marca quimioluminiscente conectado directa o indirectamente a un miembro de par de unión específica, en donde la marca quimioluminiscente se selecciona de compuestos de acridano cetenoditioacetal, ésteres de acridano, tioésteres de acridano, acridano sulfonamidas, y derivados de acridano enol de fórmula VIII: **Fórmula**

en donde R1 se selecciona de grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo y aralquilo de 1-20 átomos de carbono, cualquiera de los cuales puede ser sustituido con grupos 1-3 seleccionados de grupos carbonilo, grupos carboxilo, grupos tri(C1-C8 alquil)silil, un grupo SO3-, un grupo OSO3-2, grupos glicosil, un grupo PO3-, un grupo OPO3-2, átomos de halógeno, un grupo hidroxilo, un grupo tiol, grupos amino, grupos de amonio cuaternario o grupos de fosfonio cuaternario, en donde X se selecciona de grupos alquilo, arilo, aralquilo C1-C8, teniendo los grupos alquilo o arilo carboxilo de 1-20 átomos de carbono, grupos tri(C1-C8 alquil)silil, un grupo SO3-, grupos glicosil y grupos fosforil de la fórmula PO(OR')(OR") en donde R' y R" se seleccionan independientemente de los grupos alquilo, cianoalquilo, arilo y aralquilo C1-C8, grupos trialquilsilil, cationes de metales alcalinos, cationes alcalino-térreos, cationes de amonio y trialquilfosfonio, en donde Z se selecciona de átomos de O y S, en donde R6 se selecciona de grupos alquilo, fenilo, benzilo, alcoxialquilo y carboxialquilo C1-C4 sustituidos o no sustituidos, en donde R7-14 son cada hidrógeno o se seleccionan 1 o 2 sustituyentes de alquilo, alcoxi, hidroxi y halógeno y el resto de R7-14 son hidrógeno o en donde cada uno de R7-14 es hidrógeno y R1 es un sustituyente de marcado o en donde uno de R7-14 es un sustituyente de marcado y los otros de R7-14 son hidrógeno. en donde el compañero de unión específica marcado con activador comprende un compuesto con marca de activador conectado directa o indirectamente a un miembro de un par de unión específica en donde la marca de activador se selecciona de sales metálicas de transición, complejos metálicos de transición y enzimas, en donde la marca de activador tiene actividad peroxidasa, y en donde la solución activadora comprende un compuesto de peróxido.