Composición farmacéutica que comprende una región Fc de inmunoglobulina como portador.

Composición farmacéutica que comprende un fragmento Fc de inmunoglobulina como portador,

en la quedicho fragmento Fc de inmunoglobulina está unido covalentemente a un fármaco que es un polipéptidofisiológicamente activo a través de un enlazador no peptídico, en la que el polipéptido fisiológicamenteactivo es la hormona del crecimiento humana (hGH), en la que la unión entre el fragmento Fc deinmunoglobulina y el fármaco no es una fusión mediante recombinación genética, y en la que el enlazadorno peptídico se selecciona del grupo que consiste en poli(etilenglicol), poli(propilenglicol), copolímeros deetilenglicol y propilenglicol, polioles polioxietilados, polialcoholes vinílicos, polisacáridos, dextranos, poliviniléteres, polímeros biodegradables, polímeros lipídicos, quitinas y ácidos hialurónicos.

Composición farmacéutica que comprende una región Fc de inmunoglobulina como portador

Campo técnico

La presente invención se refiere a un uso novedoso de un fragmento Fc de inmunoglobulina. Más particularmente, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un fragmento Fc de inmunoglobulina como portador, y a un método para mejorar la duración in vivo de la acción de un fármaco unido a un fragmento Fc de inmunoglobulina.

Técnica anterior

En el pasado, un gran número de farmacólogos y químicos se han esforzado por alterar y/o modificar químicamente la actividad in vivo de moléculas fisiológicamente activas que existen de manera natural. Estos esfuerzos se centraron principalmente en aumentar o prolongar cierta actividad in vivo, reducir la toxicidad, eliminar o reducir los efectos secundarios o modificar actividades fisiológicas específicas de las sustancias fisiológicamente activas. Cuando se modifica químicamente una sustancia fisiológicamente activa, en muchos casos pierde parte o la mayoría de sus actividades fisiológicas. Sin embargo, en algunos casos, la modificación puede dar como resultado un aumento o cambio de la actividad fisiológica. Con respecto a esto, muchos estudios se han centrado en la modificación química que puede lograr una actividad fisiológica deseada, y la mayoría de tales estudios han implicado unir covalentemente una sustancia fisiológicamente activa (fármaco) a un portador fisiológicamente aceptable.

Por ejemplo, la publicación de patente internacional n.º WO 01/93911 emplea un polímero que tiene una pluralidad de restos ácidos como portador de fármaco. La publicación de patente internacional n.º WO 03/00778 da a conocer copolímeros de bloque anfífilos que contienen grupos aniónicos que, cuando se usan como portador de fármaco para un fármaco catiónico, mejoran la estabilidad del fármaco. La patente europea n.º 0 681 481 describe un método para mejorar las propiedades de fármacos básicos usando ciclodextrina y ácidos como portadores. Por otro lado, los fármacos hidrófobos tienen baja estabilidad in vivo principalmente debido a su baja solubilidad acuosa. Para mejorar la baja solubilidad acuosa de los fármacos hidrófobos, la publicación de patente internacional n.º WO 04/064731 emplea un lípido como portador. Sin embargo, hasta la fecha, no hay ningún informe sobre el uso de un fragmento Fc de inmunoglobulina como portador de fármaco.

Normalmente, dado que los polipéptidos se desnaturalizan de manera relativamente fácil debido a su baja estabilidad, se degradan mediante enzimas proteolíticas en la sangre y se eliminan fácilmente a través del riñón o del hígado, los medicamentos proteicos, que incluyen polipéptidos como componentes farmacéuticamente eficaces, necesitan administrarse con frecuencia a pacientes para mantener títulos y concentraciones de nivel en sangre deseados. Sin embargo, esta administración frecuente de medicamentos proteicos, especialmente mediante inyección, provoca dolor a los pacientes. Para solucionar estos problemas, se han hecho muchos esfuerzos para mejorar la estabilidad en suero de fármacos proteicos y mantener los fármacos en la sangre a altos niveles durante un periodo de tiempo prolongado, y por tanto maximizar la eficacia farmacéutica de los fármacos. Por tanto, las composiciones farmacéuticas con actividad sostenida necesitan aumentar la estabilidad de fármacos proteicos y mantener los títulos a niveles suficientemente altos sin provocar respuestas inmunitarias en pacientes.

Para estabilizar proteínas y prevenir la degradación enzimática y el aclaramiento por los riñones, convencionalmente se usó un polímero que tenía una alta solubilidad, tal como polietilenglicol (denominado simplemente “PEG” a continuación en el presente documento) , para modificar químicamente la superficie de un fármaco proteico. Mediante unión a regiones específicas o diversas de una proteína diana, PEG estabiliza la proteína y previene la hidrólisis, sin provocar efectos secundarios graves (Sada et al., J. Fermentation Bioengineering 71: 137-139, 1991) . Sin embargo, a pesar de esta capacidad para potenciar la estabilidad de proteína, este acoplamiento de PEG tiene problemas tales como reducir enormemente el número de títulos de proteínas fisiológicamente “activas”. Además el rendimiento disminuye con el aumento del peso molecular de PEG debido a la reactividad reducida con las proteínas.

Recientemente, se han sugerido conjugados de polímero-fármaco proteico. Por ejemplo, tal como se describe en la patente estadounidense n.º 5.738.846, puede prepararse un conjugado uniendo un fármaco proteico idéntico a ambos extremos de PEG para mejorar la actividad del fármaco proteico. Además, tal como se describe en la publicación de patente internacional n.º WO 92/16221, pueden unirse dos fármacos proteicos diferentes a ambos extremos de PEG para proporcionar un conjugado que tiene dos actividades diferentes. Sin embargo, métodos anteriores no fueron muy satisfactorios en mantener la actividad de fármacos proteicos.

Por otro lado, Kinstler et al. notificaron que una proteína de fusión preparada acoplando factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) a albúmina humana mostró una estabilidad mejorada (Kinstler et al., Pharmaceutical Research 12 (12) : 1883-1888, 1995) . En esta publicación, sin embargo, dado que el fármaco modificado, que tiene una estructura de G-CSF-PEG-albúmina, sólo mostró un aumento de aproximadamente cuatro veces en el tiempo de residencia en el organismo y un aumento ligero en la semivida sérica en comparación con la administración individual de G-CSF nativo, no se ha industrializado como formulación de acción prolongada eficaz

para fármacos proteicos.

Un método alternativo para mejorar la estabilidad in vivo de proteínas fisiológicamente activas es uniendo un gen de proteína fisiológicamente activa a un gen que codifica para una proteína que tiene una alta estabilidad en suero mediante tecnología de recombinación genética y cultivando las células transfectadas con el gen recombinante para producir una proteína de fusión. Por ejemplo, puede prepararse una proteína de fusión conjugando albúmina, una proteína que se sabe que es la más eficaz en potenciar la estabilidad de proteína, o su fragmento a una proteína fisiológicamente activa de interés mediante recombinación genética (publicaciones de patente internacional n.os WO 93/15199 y WO 93/15200, publicación de patente europea n.º 413.622) . Una proteína de fusión de interferón-alfa y albúmina, desarrollada por Human Genome Science Company y comercializada con el nombre comercial “AlbuferonTM”, aumentó la semivida desde 5 horas hasta 93 horas en monos, pero se sabía que era problemática porque redujo la actividad in vivo hasta menos del 5% de interferón-alfa no modificado (Osborn et al., J. Phar. Exp. Ther. 303 (2) : 540-548, 2002) .

Se aplicaron tecnologías de ADN recombinante para fusionar un fármaco proteico a un fragmento Fc de inmunoglobulina. Por ejemplo, se expresaron previamente interferón (publicación de patente coreana abierta a consulta por el público n.º 2003-9464) y receptor de interleucina 4, receptor de interleucina 7 o receptor de eritropoyetina (EPO) (registro de patente coreana n.º 249572) en mamíferos en una forma fusionada a un fragmento Fc de inmunoglobulina. La publicación de patente internacional n.º WO 01/03737 describe una proteína de fusión que comprende una citocina o factor de crecimiento unido a un fragmento Fc de inmunoglobulina mediante enlace peptídico. Además, la patente estadounidense n.º 5.116.964 da a conocer proteínas fusionadas al extremo amino o carboxilo terminal de un fragmento Fc de inmunoglobulina mediante recombinación genética. La patente estadounidense n.º 5.349.053 da a conocer una proteína de fusión que comprende IL-2 fusionada a un fragmento Fc de inmunoglobulina mediante enlace peptídico. Otros ejemplos de proteínas de fusión de Fc preparadas mediante recombinación genética incluyen una proteína de fusión de interferón beta o su derivado y un fragmento Fc de inmunoglobulina (publicación de patente internacional n.º WO 00/23472) , y una proteína de fusión de receptor de IL5 y un fragmento Fc de inmunoglobulina (patente estadounidense n.º 5.712.121) , una proteína de fusión de interferón alfa y el fragmento Fc de inmunoglobulina G4 (patente estadounidense n.º 5.723.125) , y una proteína de fusión de proteína CD4 y el fragmento Fc de inmunoglobulina G2 (patente estadounidense n.º 6.451.313) .

También se conocen técnicas que implican la modificación de residuos de aminoácido de un fragmento... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica que comprende un fragmento Fc de inmunoglobulina como portador, en la que dicho fragmento Fc de inmunoglobulina está unido covalentemente a un fármaco que es un polipéptido fisiológicamente activo a través de un enlazador no peptídico, en la que el polipéptido fisiológicamente activo es la hormona del crecimiento humana (hGH) , en la que la unión entre el fragmento Fc de inmunoglobulina y el fármaco no es una fusión mediante recombinación genética, y en la que el enlazador no peptídico se selecciona del grupo que consiste en poli (etilenglicol) , poli (propilenglicol) , copolímeros de etilenglicol y propilenglicol, polioles polioxietilados, polialcoholes vinílicos, polisacáridos, dextranos, polivinil éteres, polímeros biodegradables, polímeros lipídicos, quitinas y ácidos hialurónicos.

2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina está aglicosilado.

3. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina está compuesto por de uno a cuatro dominios seleccionados del grupo que consiste en dominios CH1, CH2, CH3 y CH4.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 3, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina incluye además una región de bisagra.

5. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina se selecciona del grupo que consiste en fragmentos Fc de IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, y combinaciones e híbridos de los mismos.

6. Composición farmacéutica según la reivindicación 5, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina se selecciona del grupo que consiste en fragmentos Fc de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, y combinaciones e híbridos de los mismos.

7. Composición farmacéutica según la reivindicación 6, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina es un fragmento Fc de IgG4.

8. Composición farmacéutica según la reivindicación 7, en la que el fragmento Fc de inmunoglobulina es un fragmento Fc de IgG4 aglicosilado humano.

9. Método para mejorar la duración in vivo de la acción de un fármaco, que se caracteriza por el uso in vitro de un fragmento Fc de inmunoglobulina como portador en una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.