PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACION CUANTITATIVA DE POLINUCLEOTIDOS EN UNA MEZCLA.
Procedimiento para la determinación de unas cantidades o proporciones relativas de más de una secuencia de polinucleótidos individuales o sus subgrupos en una mezcla de polinucleótidos que utiliza una hibridación en solución facilitada por afinidad cuantitativa en combinación con el fraccionamiento basado en el tamaño o la masa para la obtención de la resolución,
caracterizado porque el procedimiento comprende las etapas siguientes: (a) proporcionar uno o más pool organizados con un número opcional predeterminado de sondas de polinucleótidos solubles, siendo complementaria cada sonda de una secuencia de polinucleótidos diana individual en una muestra, que está presente en un exceso molar comparado con las secuencias de polinucleótidos diana, y que presenta aproximadamente el mismo número de nucleótidos que hibridan, cuyas sondas se pueden distinguir proporcionando a dichas sondas una o más etiquetas que permiten la resolución, separación o sistemas de grabación sin interferir con la reacción de hibridación o de captura; (b) proporcionar a las secuencias de polinucleótidos diana aisladas de la muestra que comprende una muestra de secuencias de ribopolinucleótidos diana por lo menos una etiqueta de afinidad, y a continuación (c) realizar las etapas (i) y (ii) simultáneamente, o secuencialmente en el orden (i) y (ii), en el que las etapas (i) y (ii) comprenden (i) permitir que la reacción de hibridación tenga lugar entre el exceso molar de las sondas solubles de la etapa (a) y las secuencias de ribopolinucleótidos diana de la etapa (b) que conduce a la formación de unos híbridos solubles; (ii) recuperar los híbridos, que se han formado cuantitativamente en la etapa (i) mediante la captura de dichos híbridos en una herramienta que facilita la separación provista de un par de afinidad de la etiqueta de afinidad de las secuencias de polinucleótidos diana; (d) liberar cuantitativamente las sondas en una forma no modificada de los híbridos capturados a la herramienta que facilita la separación; (e) separar y registrar las cantidades o proporciones relativas de las sondas, que se han diferenciado cuya cantidad corresponde a la cantidad de secuencias de ribopolinucleótido en la mezcla de polinucleótidos en la muestra.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: VALTION TEKNILLINEN TUTKIMUSKESKUS.
Nacionalidad solicitante: Finlandia.
Dirección: VUORIMIEHENTIE 5,02150 ESPOO.
Inventor/es: SODERLUND, HANS, KATAJA,KARI, TAKKINEN,KRISTIINA, SATOKARI,REETTA.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 16 de Enero de 2008.
Clasificación PCT:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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