UN METODO PARA PREPARAR LA CADENA A PURIFICADA DE UNA LECTINA TOXICA.

METODO PARA PREPARAR LA CADENA A PURIFICADA DE UNA LECTINA TOXICA.

COMPRENDE: A) HOMOGENEIZAR UNA PLANTA QUE CONTIENE LA LECTINA TOXICA COMPLETA CON SUS CADENAS (A) Y (B) EN PRESENCIA DE (D); B) CENTRIFUGAR EL HOMOGENEIZADO DE (A) PARA PRODUCIR UNA MASA SOBRENADANTE Y UNA CAPA LIPIDICA GRASA; C) TRATAR LA MASA SOBRENADANTE CON SULFATO AMONICO AL 60% CON AGITACION Y REFRIGERACION PARA FORMAR UN PRECIPITADO; D) DIALIZAR EL PRECIPITADO DISUELTO EN UNA CANTIDAD MINIMA DE (D); E) PURIFICAR LA LECTINA TOXICA COMPLETA DIALIZADA; F) FILTRARLA LECTINA TOXICA COMPLETA PURIFICADA PARA OBTENER LA CADENA A DE LA LECTINA IMPURIFICADA POR LA CADENA B; G) SEPARAR DE LA CADENA A DE LA LECTINA TOXICA DISOCIADA LAS IMPUREZAS CONSTITUIDAS POR LA CADENA B DE LA LECTINA TOXICA; H) MEZCLAR LA CADENA A DE LA LECTINA TOXICA CON UN VOLUMEN IGUAL DE GLICEROL FRIO AL 100%; I) AÑADIR MERCAPTOETANOLAMINA HASTA UNA CONCENTRACION DE 10C5 M EN LA MEZCLA DE (H); Y J) CONSERVAR EN UN REFRIGERADOR LA CADENA A PURIFICADA DE LA LECTINA TOXICA A C20JC.