SISTEMAS Y PROCEDIMIENTO PARA IDENTIFICAR RIESGO DE TRASPLANTE DE ÓRGANOS.

Sistemas y procedimiento para identificar riesgo de trasplante de órganos Campo de la invención La presente invención se refiere a los procedimientos de diagnóstico y predicción del rechazo de órganos trasplantados. En particular, la presente invención se refiere a la detección y predicción del rechazo del trasplante de riñón mediante la detección de quimiocinas (por ejemplo, CXCR3 y las quimiocinas CCL) en la orina. La presente invención se refiere además a procedimientos y composiciones para evaluar la eficacia de los agentes anti-rechazo. Antecedentes de la invención Anualmente se realizan alrededor de 12.000 trasplantes de riñón en los Estados Unidos. A pesar de la disponibilidad de potentes agentes inmunosupresores, el rechazo del injerto sigue siendo la principal complicación del trasplante renal. Por ejemplo, aproximadamente el 50% de todos los receptores de trasplante renal se cree que padecen al menos un episodio de rechazo del injerto. La probabilidad de la pérdida del riñón debido al rechazo es más alta durante el primer año posterior al trasplante (10-20%), pero una pequeña proporción (3,5%) de los riñones son rechazados cada año, incluso después del primer año. Las estadísticas indican que el rechazo del injerto a menudo no se detecta suficientemente temprano en el episodio de rechazo para permitir el inicio del tratamiento compensatorio a tiempo para evitar el rechazo de un órgano con agentes inmunosupresores en un momento en que el proceso de rechazo puede ser efectivamente detenido y/o evitarse por completo. El diagnóstico del rechazo agudo de aloinjertos clásicamente se basa en la presencia de uno o más síntomas. Por ejemplo, los síntomas del rechazo agudo de aloinjertos incluyen aumento de peso, reducción de la producción de orina, aumento de las concentraciones séricas de creatinina, hipertensión, fiebre y aumento del tamaño del injerto y la sensibilidad. Sin embargo, el uso de estos síntomas por sí solos para detectar el rechazo no es lo adecuado. En la actualidad, la mayoría de los episodios de rechazo del trasplante son detectados por la medición periódica de la función del riñón trasplantado, por ejemplo, por medio de pruebas bioquímicas, como los ensayos que miden las concentraciones séricas de creatina. En la actualidad, la biopsia renal sigue siendo la prueba más definitiva para diagnosticar específicamente el rechazo del aloinjerto renal. Sin embargo, este procedimiento tiene limitaciones importantes. Por ejemplo, ya que el procedimiento de la biopsia en sí tiene complicaciones, y dado que una parte del trasplante renal se elimina durante cada una biopsia, la biopsia del trasplante no se puede realizar en una rutina o incluso con frecuencia para controlar el rechazo del aloinjerto renal. Además, la naturaleza invasiva de una biopsia renal es a la vez incómoda e inconveniente para los pacientes. La interpretación exacta de la biopsia renal del trasplante exige también la experiencia de un patólogo con amplia experiencia en el análisis de una muestra de biopsia de la evidencia del rechazo del trasplante renal. Por lo tanto, las biopsias renales se reservan para aquellos pacientes que manifiestan otras pruebas clínicas y/o de laboratorio de rechazo del injerto renal, lo que limita su uso o uso potencial en la detección precoz del rechazo del injerto. Un procedimiento para la detección temprana y/o predicción del rechazo del injerto por lo tanto sería una importante herramienta clínica para mantener la viabilidad de un órgano trasplantado. Descripción de la invención La presente invención se refiere a los procedimientos de diagnóstico y predicción del rechazo de órganos trasplantados. En particular, la presente invención se refiere a la detección y predicción del rechazo del riñón trasplantado mediante la detección de las quimiocinas (por ejemplo, CXCR3 y las quimiocinas CCL) en la orina. La presente invención se refiere además a procedimientos y composiciones para evaluar la eficacia de los agentes antirechazo. En consecuencia, en algunas realizaciones, la presente invención proporciona un procedimiento de detección de marcadores de rechazo, que comprende proporcionar una muestra de orina de un sujeto, en donde dicho sujeto ha sido objeto de trasplante de órganos, los reactivos para la detección de un ligando CXCR3 o ligando del receptor CCR-5 (por ejemplo, las quimiocinas CCL), y detectar la presencia de dicho ligando en dicha muestra de orina utilizando dichos reactivos. En algunas realizaciones, el procedimiento proporciona además el paso de la predicción del riesgo de rechazo del trasplante en el sujeto basado en el resultado de la detección. En otras realizaciones, el procedimiento proporciona además la etapa de detección de riesgo de rechazo del trasplante en el sujeto basado en el resultado de la detección. La presente invención no se limita a la detección de marcadores de rechazo asociados al trasplante de un órgano en particular. De hecho, los procedimientos de la presente invención son aplicables a la 2 E03728889 21-11-2011   detección de marcadores de rechazo de los trasplantes de órganos (por ejemplo, trasplante de órgano de riñón). En algunas realizaciones, la detección de la presencia del ligando en la muestra de orina comprende detectar la cantidad de ligando en la muestra de orina. La presente invención no se limita a la detección de un ligando particular. Se contempla cualquier ligando adecuado, incluyendo pero no limitándose a, IP-10, MIG, I-TAC, MIP-1, MIP-3, y MIP-1. En algunas realizaciones, el ligando es un ligando de longitud completa. En otras realizaciones, el ligando es un fragmento del ligando de longitud completa. En algunas realizaciones, los reactivos comprenden los reactivos para la realización de un inmunoensayo. La presente invención no se limita a un inmunoensayo particular. Se contempla cualquier inmunoensayo adecuado, incluyendo pero no limitándose a, ELISA, radioinmunoensayo, inmunoensayo automatizado, ensayo de citometría de cuentas, y ensayo de inmunoprecipitación. En algunas realizaciones, el ELISA es un ensayo cuantitativo de ELISA. En algunas realizaciones, la presente invención comprende además la etapa de determinación de un tratamiento de acción basado en el riesgo de predicción de rechazo del trasplante de riñón. En algunas realizaciones, el curso de acción del tratamiento comprende la administración de la terapia anti-rechazo. En otras realizaciones, el curso de acción del tratamiento comprende la monitorización continua. En algunas realizaciones, la presente invención comprende además la etapa de determinar la presencia o ausencia de una infección concurrente en el sujeto. En algunas realizaciones, la determinación incluye la determinación de la temperatura corporal del sujeto. En otras realizaciones, la determinación incluye la detección de una infección bacteriana en el sujeto. En realizaciones adicionales, la determinación incluye la detección de una infección viral en el sujeto. La presente invención proporciona un procedimiento para diagnosticar el rechazo del trasplante en un sujeto, que comprende proporcionar una muestra de orina de un sujeto, en donde el sujeto ha sido objeto de trasplante de órganos, reactivos para la detección de un ligando CXCR3 o receptor del ligando CCR-5 (por ejemplo, quimiocinas CCL), y detectar la presencia del ligando en la muestra de orina utilizando los reactivos, el rechazo del trasplante y el diagnóstico en el sujeto en función del resultado de la detección. En algunas realizaciones, la detección de la presencia del ligando en la muestra de orina comprende detectar la cantidad de ligando en la muestra de orina. La presente invención no se limita a la detección de marcadores de rechazo asociados al trasplante de un órgano en particular. De hecho, los procedimientos de la presente invención son aplicables a la detección de marcadores de rechazo de los trasplantes de órganos (por ejemplo, trasplante del órgano del riñón). La presente invención no se limita a la detección de un ligando particular. Se contempla cualquier ligando adecuado, incluyendo pero no limitándose a, IP-10, MIG, I-TAC, MIP-1, MIP-3, y MIP-1. En algunas realizaciones, el ligando es un ligando de longitud completa. En otras realizaciones, el ligando es un fragmento del ligando de longitud completa. En algunas realizaciones, los reactivos comprenden los reactivos para la realización de un inmunoensayo. La presente invención no se limita a un inmunoensayo particular. Se contempla cualquier inmunoensayo adecuado, incluyendo pero no limitándose a, ELISA, radioinmunoensayo, inmunoensayo automatizado, y el ensayo de inmunoprecipitación. En algunas realizaciones, el ELISA es un ensayo ELISA cuantitativo. En algunas realizaciones, el procedimiento comprende además la etapa de determinación de un tratamiento... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento de detección de marcadores de rechazo, que comprende la detección de la presencia de un ligando CXCR3, en donde dicho ligando CXCR3 es IP-10, MIG o I-TAC en una muestra de orina de un sujeto, en el que el sujeto ha sido objeto de trasplante de órganos. 2. Procedimiento según la reivindicación 1, que comprende además la etapa de predicción o detección de riesgo de rechazo agudo de trasplante en dicho sujeto en base al resultado de dicha detección. 3. Procedimiento para diagnosticar el rechazo del trasplante en un sujeto, que comprende las etapas del procedimiento según la reivindicación 1 ó 2. 4. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicha detección de la presencia de dicho ligando CXCR3 en dicha muestra de orina comprende detectar la cantidad de dicho ligando CXCR3 en dicha muestra de orina. 5. Procedimiento según la reivindicación 3 ó 4, en el que el rechazo al trasplante comprende rechazo del riñón trasplantado. 6. Procedimiento según la reivindicación 2, que también comprende el paso de la determinación de un tratamiento de acción sobre la base de dicha predicción o diagnostico del riesgo de rechazo de trasplante renal. 7. Procedimiento para la detección de un compuesto terapéutico, que incluye la detección de la cantidad de un ligando CXCR3 en que dicho ligando CXCR3 es IP-10, MIG o I-TAC, en una muestra de orina de un sujeto, en donde el sujeto ha sido objeto de trasplante de órganos y en el que un compuesto de ensayo tal como un compuesto candidato terapéutico se ha administrado a dicho sujeto. 8. Procedimiento según la reivindicación 7, en el que dicho compuesto de ensayo es un medicamento anti-rechazo. 9. Procedimiento según la reivindicación 7 u 8, que comprende además la etapa de determinar la eficacia de dichos medicamentos contra el rechazo en base a dicha detección. 10. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que dicho sujeto es un animal no humano. 11. Procedimiento según la reivindicación 10, en el que dicho animal no humano es seleccionado del grupo que consiste de un primate no humano, un ratón y una rata. 12. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que dicho ligando CXCR3 es un ligando de longitud completa. 13. Procedimiento para determinar un tratamiento de acción, que comprende: a) detectar la cantidad de un ligando CXCR3 como se define en la reivindicación 1, en una muestra de orina de un sujeto, en donde el sujeto ha sido objeto de trasplante de órganos, y b) determinar un tratamiento de acción basado en dicha detección. 14. Procedimiento según la reivindicación 13, en el que dicho ligando CXCR3 es un polipéptido de longitud completa. 15. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 13 a 14, en el que dicho curso de acción del tratamiento comprende la administración de la terapia anti-rechazo. 16. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 13 a 15, en el que dicho curso de tratamiento de acción comprende la supervisión continua. 17. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 13, en el que el trasplante de órganos es el trasplante del órgano del riñón, o comprende un trasplante de riñón. 18. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, que comprende además la etapa de determinar la presencia o ausencia de una infección concurrente en dicho sujeto. 19. Procedimiento según la reivindicación 18, en el que la determinación comprende la determinación de la temperatura del cuerpo de dicho sujeto. 19 E03728889 21-11-2011   20. Procedimiento según la reivindicación 18 ó 19, en el que dicha determinación comprende la detección de una infección bacteriana o viral en dicho sujeto. 21. Utilización de un kit en un procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, comprendiendo dicho kit: a) reactivos específicos para la detección de la cantidad de un ligando CXCR3 como se define en la reivindicación 1, y b) instrucciones para el uso de dichos reactivos específicos para la detección de la presencia de dicho ligando CXCR3 en una muestra de orina. 22. Utilización según la reivindicación 21, en el que dichos reactivos comprenden los reactivos para la realización de un inmunoensayo. 23. Procedimiento o utilización según la reivindicación 22, donde dicho inmunoensayo es seleccionado del grupo que consiste de un ELISA, radioinmunoensayo, inmunoensayo automatizado, ensayo de citometría de cuentas, y el ensayo de inmunoprecipitación. 24. Procedimiento o utilización según la reivindicación 20 ó 23, en donde el ELISA es un ensayo ELISA cuantitativo. 25. Procedimiento según la reivindicación 20 ó 23, en el que dicho ensayo es un ensayo de clasificación de células activadas por fluorescencia. 26. Procedimiento según la reivindicación 25, en el que dicho ensayo de clasificación de células activadas por fluorescencia es un ensayo cuantitativo de clasificación de células activadas por la fluorescencia. 27. Utilización según la reivindicación 21, en el que dichos reactivos comprenden los reactivos para la realización de un ensayo de clasificación de células activadas por fluorescencia. 28. Utilización según la reivindicación 27, en el que el ensayo de clasificación de células activadas por fluorescencia es un ensayo cuantitativo de clasificación de células activadas por fluorescencia. 29. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 24, 27 ó 28, en el que dichas instrucciones comprenden instrucciones exigidas por la Administración de Alimentos y Fármacos para su uso en productos de diagnóstico in vitro. 30. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 24, ó 27 a 29, que comprende además los segundos reactivos para determinar la presencia o ausencia de una infección concurrente en dicho sujeto y segundas instrucciones para el uso de dichos reactivos para determinar la presencia o ausencia de dicha infección concurrente en dicho sujeto. 31. Utilización según la reivindicación 30, en el que dichas segundas instrucciones comprenden instrucciones para determinar la temperatura del cuerpo de dicho sujeto. 32. Utilización según las reivindicaciones 30 a 31, en el que los segundos reactivos comprenden los reactivos para la detección de una infección bacteriana o viral en dicho sujeto. 33. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, en el que dichas instrucciones comprenden, además, instrucciones de uso de dicho kit para el diagnóstico de rechazo de órganos trasplantados, o para predecir el riesgo de rechazo de trasplantes de órganos. 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