Proteínas receptoras de mamíferos; reactivos y métodos relacionados.

Un polipéptido aislado que comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% a la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº:

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2000/014867.

Solicitante: MERCK SHARP & DOHME CORP.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 126 EAST LINCOLN AVENUE RAHWAY, NJ 07065-0907 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: KASTELEIN, ROBERT, A., GORMAN,DANIEL M, TIMANS,JACQUELINE,C, DOWLING,LYNETTE,M, BAZAN,FERNANDO,J.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K38/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00).
  • A61K38/17 A61K […] › A61K 38/00 Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00). › que provienen de animales; que provienen de humanos.
  • A61K39/00 A61K […] › Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53).
  • A61K39/395 A61K […] › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario.
  • A61P35/00 A61 […] › A61P ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS O DE PREPARACIONES MEDICINALES.Agentes antineoplásicos.
  • A61P37/02 A61P […] › A61P 37/00 Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos o alérgicos. › Inmunomoduladores.
  • A61P7/00 A61P […] › Medicamentos para el tratamiento de trastornos de la sangre o del fluido extracelular.
  • C07K14/715 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › para citoquinas; para linfoquinas; para interferones.
  • C07K16/28 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra receptores, antígenos celulares de superficie o determinantes celulares de superficie.
  • C07K19/00 C07K […] › Péptidos híbridos (Inmoglobulinas híbridas compuestas solamente de inmoglobulinas C07K 16/46).
  • C12N1/15 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N1/19 C12N 1/00 […] › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N1/21 C12N 1/00 […] › modificados por la introducción de material genético extraño.
  • C12N15/09 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N15/12 C12N 15/00 […] › Genes que codifican proteínas animales.
  • C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/15 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › preparaciones medicinales.
  • G01N33/50 G01N 33/00 […] › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
  • G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.
  • G01N33/58 G01N 33/00 […] › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).

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Fragmento de la descripción:

Proteínas receptoras de mamíferos; reactivos y métodos relacionados

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a composiciones y métodos para influir en la fisiología de mamíferos, que incluyen la función del sistema inmune. En particular, proporciona métodos para regular el desarrollo y/o el sistema inmune. También se describen usos de diagnóstico y terapéuticos de estos materiales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La tecnología de ADN recombinante se refiere en general a técnicas para integrar información genética de una fuente donadora en vectores para procesamiento posterior, tal como mediante la introducción en un hospedador, por lo que la información genética transferida se copia y/o expresa en el ambiente nuevo. Comúnmente, la información genética existe en forma de ADN complementario (ADNc) obtenido a partir de ARN mensajero (ARNm) que codifica un producto de proteína deseado. El vehículo frecuentemente es un plásmido que tiene la capacidad de incorporar ADNc para replicación posterior en un hospedador y, en algunos casos, para controlar realmente la expresión del ADNc y dirigir de ese modo la síntesis directa del producto codificado en el hospedador. Véase, por ejemplo, Sambrook, et al. (1989) Molecular Cloning: A Laborator y Manual, (2ª ed.) vols. 1-3, CSH Press, NY.

Durante algún tiempo, se ha sabido que la respuesta inmune de mamíferos se basa en una serie de interacciones celulares complejas, denominadas la "red inmune". Investigaciones recientes han proporcionado nuevas perspectivas en el funcionamiento interno de esta red. Aunque sigue siendo claro que gran parte de la respuesta inmune, de hecho, tiene que ver con las interacciones en forma de red de los linfocitos, macrófagos, granulocitos y otras células, ahora los inmunólogos generalmente sostienen la opinión de que las proteínas solubles, conocidas como linfoquinas, citoquinas o monoquinas, juegan papeles críticos en el control de estas interacciones celulares. Por tanto, hay un interés considerable en el aislamiento, caracterización y mecanismos de acción de factores moduladores de células, cuya comprensión conducirá a avances importantes en el diagnóstico y terapia de muchas anormalidades médicas, por ejemplo, trastornos del sistema inmune.

Las linfoquinas al parecer son mediadoras de actividades celulares en una diversidad de formas. Véase,

por ejemplo, Paul (ed. 1996) Fundamental Inmunology 3ª ed., Raven Press, Nueva York y Thomson (ed. 1994) The Cytokine Handbook 2ª ed., Academic Press, San Diego. Se ha demostrado que apoyan la proliferación, crecimiento y/o diferenciación de células madre hematopoyéticas pluripotenciales en un gran número de progenitores que comprenden linajes celulares diversos que constituyen un sistema inmune complejo. Las interacciones apropiadas y equilibradas entre los componentes celulares son necesarias para una respuesta inmune sana. Los linajes celulares diferentes con frecuencia responden de una manera diferente cuando se administran linfoquinas junto con otros agentes.

Linajes celulares especialmente importantes para la respuesta inmune incluyen dos clases de linfocitos: células B, que pueden producir y secretar inmunoglobulinas (proteínas con la capacidad de reconocer y

unirse a material extraño para lograr su remoción) y células T de diversos subconjuntos que secretan linfoquinas e inducen o suprimen a las células B y diversas células diferentes (incluyendo otras células T) constituyendo la red inmune. Estos linfocitos interaccionan con muchos otros tipos de células.

La incapacidad general para mantener células del sistema inmune in vitro ha obstaculizado la investigación para entender mejor y tratar diversos trastornos inmunes. Los inmunólogos han observado que el cultivo de muchas de estas células se puede conseguir mediante el uso de sobrenadantes de células T y otras células; que contienen diversos factores de crecimiento, que incluyen muchas de las linfoquinas.

Existen diversos factores de crecimiento y reguladores que modulan el desarrollo morfogenético. Estos incluyen, por ejemplo, los ligandos de Toll, que dan señales uniéndose a receptores que comparten elementos estructurales y mecanísticos característicos de los receptores IL-1. Véase, por ejemplo, Lemaitre, et al. (1996) Cell 86: 973-983 y Belvin y Anderson (1996) Ann. Rev. Cell & Devel. Biol. 12: 393

416. También se conocen otros receptores para citoquinas. Con frecuencia, existen al menos dos subunidades críticas en el receptor funcional. Véase, por ejemplo, Gonda y D'Andrea (1997) Blood 89: 355-369; Presky, et al. (1996) Proc. Nat'l Acad. Sci. EE.UU. 93: 14002-14007; Drachman y Kaushansky (1995) Curr, Opin. Hematol. 2: 22-28; Theze (1994) Eur. Cytokine Netw. 5: 353-368 y Lemmon y Schlessinger (1994) Trends Biochem. Sci. 19: 459-463. El documento WO 99/20755 describe una secuencia GP130 murina (mGP130) .

A partir de lo anterior, es evidente que el descubrimiento y desarrollo de nuevas proteínas solubles y sus receptores, incluyendo aquellas que son similares a linfoquinas, deben contribuir a nuevas terapias para una amplia gama de afecciones degenerativas o anormales que implican directa o indirectamente el desarrollo, diferenciación o función, por ejemplo, del sistema inmune y/o células hematopoyéticas. En particular, el descubrimiento y entendimiento de receptores nuevos de moléculas similares a linfoquina que mejoran o potencian las actividades beneficiosas de otras linfoquinas serán altamente provechosos. La presente invención proporciona receptores nuevos para ligandos que muestran similitud a composiciones similares a citoquina y compuestos relacionados y métodos para su uso.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se dirige a receptores nuevos relacionados con receptores de citoquina, por ejemplo, estructuras moleculares similares a receptor de citoquina de primates, denominadas Subunidades de Receptor de Citoquina ADNX (DCRS) y sus actividades biológicas. En particular,

proporciona descripción de una subunidad, denominada DCRS2. Incluye ácidos nucleicos que codifican los polipéptidos y métodos para su producción y uso. Los ácidos nucleicos de la invención se caracterizan, en parte, por su homología a secuencias de ADN complementario (ADNc) clonadas descritas en este documento.

La presente invención proporciona un polipéptido aislado que comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% a la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de la SEC ID Nº: 2. En la medida en que las mismas estén abarcadas por las reivindicaciones adjuntas, se proporcionan las siguientes realizaciones, concretamente una composición de material seleccionado entre: un polipéptido DCRS2 sustancialmente puro o recombinante que comprende al menos tres 25 segmentos no solapados distintos de al menos cuatro aminoácidos idénticos a segmentos de SEC ID Nº: 2; un polipéptido DCRS2 sustancialmente puro o recombinante que comprende al menos dos segmentos no solapados distintos de al menos cinco aminoácidos idénticos a segmentos de SEC ID Nº: 2; una secuencia natural DCRS2 que comprende SEC ID Nº: 2 madura o un polipéptido de fusión que comprende secuencia DCRS2. En determinada realización, la invención comprende dicho polipéptido DCRS2 antigénico sustancialmente puro o aislado, donde los segmentos no solapados distintos de identidad: incluyen uno de al menos ocho aminoácidos; incluyen uno de al menos cuatro aminoácidos y un segundo de al menos cinco aminoácidos; incluyen al menos tres segmentos de al menos cuatro, cinco y seis aminoácidos o incluyen uno de al menos doce aminoácidos. Otras realizaciones incluyen aquellas donde: el polipéptido DCRS2: comprende una secuencia madura de la Tabla 1; es una forma no 35 glicosilada de DCRS2; es de un primate, tal como un ser humano; comprende al menos 17 aminoácidos de SEC ID Nº: 2; presenta al menos cuatro segmentos no solapados de al menos siete aminoácidos de SEC ID Nº: 2; es una variante alélica natural de DCRS2; tiene una longitud de al menos aproximadamente 30 aminoácidos; presenta al menos dos epítopos no solapados que son específicos para un DCRS2 de primate; es glicosilado; tiene un peso molecular de al menos 30 kD con glicosilación natural; es un polipéptido sintético; está unido a un sustrato sólido; está conjugado a otra resto químico; es una sustitución cinco veces o menos de la secuencia natural o es una variante de deleción o inserción de una secuencia natural. Otras realizaciones incluyen una composición que comprende: un DCRS2 sustancialmente puro y otro miembro de la familia de Receptor de Interferón; un polipéptido DCRS2 estéril; el polipéptido DCRS2 y un vehículo, donde el... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1.Un polipéptido aislado que comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% a la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº: 2.

2.El polipéptido de la reivindicación 1 en el que el polipéptido comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 90% a la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº:

2.

3.El polipéptido de la reivindicación 2 en el que el polipéptido comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 98% a la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº:

2.

4.El polipéptido de la reivindicación 3 en el que el polipéptido comprende la secuencia de residuos 1-361 de SEC ID Nº: 2.

5.El polipéptido de la reivindicación 1 en el que el polipéptido comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 70% a la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 2.

6.El polipéptido de la reivindicación 5 en el que el polipéptido comprende una homología de secuencia de aminoácidos de al menos el 90% a la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 2.

7.El polipéptido de la reivindicación 6 en el que el polipéptido comprende la secuencia de SEC ID Nº: 2.

8.Una formulación farmacéutica que comprende: a) el polipéptido de la reivindicación 1 y b) un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

9.Una composición de materia que comprende una proteína de fusión que comprende el polipéptido de la reivindicación 1 y una etiqueta de detección o purificación.

10.Un ácido nucleico aislado o recombinante que codifica el péptido de la reivindicación 1.

11.El ácido nucleico de la reivindicación 10 que comprende la secuencia de residuo.

7. 1152 de SEC ID Nº: 1.

12.Un vector de expresión que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 10.

13.Una célula que comprende el vector de expresión de la reivindicación 12.

14.La célula de la reivindicación 13, donde dicha célula es: a) una célula bacteriana; b) una célula de levadura; c) una célula de insecto o d) una célula de mamífero.

15.El ácido nucleico de la reivindicación 10 que comprende un marcador detectable.

16.Un ácido nucleico que hibrida en condiciones de lavado de 30 minutos a 45ºC y sal 500 mM a la porción codificante de SEC ID Nº: 1.

17.El ácido nucleico de la reivindicación 16, en el que dichas condiciones de lavado son 30 minutos a 55ºC y sal 150 mM.

18.Un ácido nucleico que comprende una identidad de secuencia de nucleótidos de al menos el 71% con la parte codificante (residuos 1-1152) de SEC ID Nº: 1.

19.El ácido nucleico de la reivindicación 18 que comprende una identidad de secuencia de al menos el 80% con parte codificante (residuos 1-1152) de SEC ID Nº: 1.

20.El ácido nucleico de la reivindicación 19 que comprende una identidad de secuencia de al menos el 95% con parte codificante (residuos 1-1152) de SEC ID Nº: 1.

21.El ácido nucleico de la reivindicación 20 que comprende la parte codificante (residuos 1-1152) de SEC ID Nº: 1.

22.Un compuesto de unión que comprende un sitio de unión a antígeno de un anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº: 2.

23.Un compuesto de unión que comprende un sitio de unión a antígeno de un anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido que consiste en la secuencia de aminoácidos madura (residuos 1-361) de SEC ID Nº: 2.

24.El compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23 que comprende un fragmento de anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en un fragmento Fv, un fragmento Fab y un fragmento Fab2.

25.El compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23 en el que el compuesto de unión está marcado de forma detectable.

26.Una formulación farmacéutica que comprende: a) el compuesto de unión de la reivindicación 22 o la reivindicación 23 y b) un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, en el que el compuesto de unión es un anticuerpo que tiene actividad agonista o antagonista.

27.Un método in vitro para producir un complejo antígeno:anticuerpo, que comprende: a) poner en contacto el polipéptido de la reivindicación 1 con el compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23 y b) permitir que se forme dicho complejo.

28.Un complejo que comprende: a) el polipéptido de la reivindicación 1 y b) el compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23.

29.El compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23, en el que el anticuerpo es un anticuerpo quimérico.

30.El compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

31.El compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humano.

32.Uso del compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23 en la preparación de un medicamento, en el que el compuesto de unión es un anticuerpo que tiene actividad agonista o antagonista.

33.Una composición que comprende el compuesto de unión de la reivindicación 22 o reivindicación 23 para uso como un medicamento, en la que el compuesto de unión es un anticuerpo que tiene actividad agonista o antagonista.


 

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