Procedimientos de preparación de derivados cíclicos que son moduladores de la actividad de receptores de quimiocinas.

Un compuesto de fórmula (II):**Fórmula**

en la que

W se selecciona de H,

I y Br;

Pg, en cada aparición, se selecciona independientemente de un grupo protector de amina, seleccionado delgrupo que consiste en:

2,7-di-t-butil-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantil)]metiloxicarbonilo;

2-trimetilsililetiloxicarbonilo;

2-feniletiloxicarbonilo;

1,1-dimetil-2,2-dibromoetiloxicarbonilo;

1-metil-1-(4-bifenilil)etiloxicarbonilo;

benciloxicarbonilo;

p-nitrobenciloxicarbonilo;

2-(p-toluenosulfonil)etiloxicarbonilo;

m-cloro-p-aciloxibenciloxicarbonilo;

5-benzoisoxazolilmetiloxicarbonilo;

p-(dihidroxiboril)benciloxicarbonilo;

m-nitrofeniloxicarbonilo;

o-nitrobenciloxicarbonilo;

3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo;

3,4-dimetoxi-6-nitrobenciloxicarbonilo;

N'-p-toluenosulfonilaminocarbonilo;

t-amiloxicarbonilo;

p-deciloxibenciloxicarbonilo;

diisopropilmetiloxicarbonilo;

2,2-dimetoxicarbonilviniloxicarbonilo;

di(2-piridil)metiloxicarbonilo;

2-furanilmetiloxicarbonilo y

tert-butiloxicarbonilo.

Procedimientos de preparación de derivados cíclicos que son moduladores de la actividad de receptores de quimiocinas

Campo de la invención

La presente invención se refiere, en general, a intermediarios descritos mediante la fórmula II, usados en la síntesis de moduladores de la actividad de receptores de quimiocinas, descritos mediante la fórmula I, cuyos moduladores son útiles como agentes para el tratamiento y la prevención de enfermedades inflamatorias, enfermedades alérgicas y autoinmunitarias y, en particular, asma, artritis reumatoide, aterosclerosis y esclerosis múltiple.

Antecedentes de la invención

Las quimiocinas son citocinas quimiotácticas de peso molecular 6-15 kDa que son liberadas por una amplia variedad de células para atraer y activar, entre otros tipos de células, macrófagos, linfocitos T y B, eosinófilos, basófilos y neutrófilos (revisado en: Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445 y Rollins, Blood 1997, 90, 909928) . Hay dos clases principales de quimiocinas, CXC y CC, dependiendo de si las dos primeras cisteínas en la secuencia de aminoácidos están separadas por un único aminoácido (CXC) o son adyacentes (CC) . Las quimiocinas CXC, tales como interleucina-8 (IL-8) , proteína 2 activadora de neutrófilos (NAP-2) y proteína de actividad estimuladora del crecimiento de melanoma (MGSA) son quimiotácticas principalmente para neutrófilos y linfocitos T, mientras que las quimiocinas CC, tales como RANTES, MIP-1α, MIP-1β, las proteínas quimiotácticas de monocito (MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4 y MCP-5) y las eotaxinas (-1 y -2) son quimiotácticas para, entre otros tipos de células, macrófagos, linfocitos T, eosinófilos, células dendríticas y basófilos. También existen las quimiocinas linfotactina-1, linfotactina-2 (ambas quimiocinas C) y fractalcina (una quimiocina CX3C) que no se encuentra en ninguna de las subfamilias principales de quimiocinas.

Las quimiocinas se unen a receptores de superficie de células específicas que pertenecen a la familia de las proteínas de siete dominios transmembrana acopladas a la proteína G (revisado en: Horuk, Trends Pharm. Sci. 1994, 15, 159-165) que se denominan “receptores de quimiocinas”. Con la unión de sus ligandos relacionados, los receptores de quimiocinas transducen una señal intracelular mediante las proteínas G trímeras asociadas, produciéndose, entre otras respuestas, un rápido aumento en la concentración de calcio intracelular, cambios en la forma de la célula, aumento de la expresión de moléculas de adhesión celular, desgranulación y promoción de la migración de células. Hay al menos diez receptores de quimiocinas humanos que se unen o responden a quimiocinas CC con el siguiente patrón característico (revisado en Zlotnik y Oshie Immunity 2000, 12, 121) : CCR-1 (o “CKR-1” o “CC-CKR-1”) [MIP-1α, MCP-3, MCP-4, RANTES] (Ben-Barruch y col., Cell 1993, 72, 415-425, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445) ; CCR-2A y CCR-2B (o “CKR-2A”/”CKR-2B” o “CC-CKR-2A”/”CC-CKR-2B”) [MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, MCP-5] (Charo y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1994, 91, 2752-2756, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445) ; CCR-3 (o “CKR-3” o “CC-CKR-3”) [eotaxina-1, eotaxina-2, RANTES, MCP-3, MCP-4] (Combadiere y col., J. Biol. Chem. 1995, 270, 16491-16494, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436445) ; CCR-4 (o “CKR-4” o “CC-CKR-4”) [TARC, MDC] (Power y col., J. Biol. Chem. 1995, 270, 19495-19500, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445) ; CCR-5 (o “CKR-5” o “CC-CKR-5”) [MIP-1α, RANTES, MIP-1β] (Sanson y col., Biochemistr y 1996, 35, 3362-3367) ; CCR-6 (o “CKR-6” o “CC-CKR-6”) [LARC] (Baba y col., J. Biol. Chem. 1997, 272, 14893-14898) ; CCR-7 (o “CKR-7” o “CC-CKR-7”) [ELC] (Yoshie y col. J. Leukoc. Biol. 1997, 62, 634-644) ; CCR-8 (o “CKR-8” o “CC-CKR-8”) [I-309] (Napolitano y col. J. Immunol. 1996, 157, 2759-2763) ; CCR-10 (o “CKR-10” o “CC-CKR-10”) [MCP-1, MCP-3] (Bonini y col., DNA and Cell Biol. 1997, 16, 1249-1256) ; y CCR-11 [MCP-1, MCP-2 y MCP-4] (Schweickert y col., J. Biol. Chem. 2000, 275, 90550) .

Además de los receptores de quimiocinas de mamíferos, se ha mostrado que los citomegalovirus, los herpesvirus y los poxvirus de mamíferos expresan en células infectadas proteínas con las propiedades de unión de receptores de quimiocinas (revisado en: Wells y Schwartz, Curr. Opin. Biotech. 1997, 8, 741-748) . Las quimiocinas CC humanas, tales como RANTES y MCP-3, pueden producir la rápida movilización del calcio mediante estos receptores viralmente codificados. La expresión de receptores puede ser permisiva para la infección permitiendo la subversión de la supervisión y la respuesta normal del sistema inmunitario a la infección. Adicionalmente, los receptores de quimiocinas humanos, tales como CXCR4, CCR2, CCR3, CCR5 y CCR8, pueden actuar de correceptores para la infección de células de mamíferos por microbios como con, por ejemplo, los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) .

Las quimiocinas y sus receptores relacionados participan como importantes mediadores de trastornos y enfermedades inflamatorios, infecciosos e inmunoreguladores que incluyen asma y enfermedades alérgicas, además de patologías autoinmunitarias tales como artritis reumatoide y aterosclerosis (revisado en: P. H. Carter, Current Opinion in Chemical Biology 2002, 6, 510; Trivedi y col., Ann. Reports Med. Chem. 2000, 35, 191; Saunders y Tarby, Drug Disc. Today 1999, 4, 80; Premack y Schall, Nature Medicine 1996, 2, 1174) . Por ejemplo, la quimiocina quimioatrayente-1 de monocitos (MCP-1) y su receptor el receptor 2 de quimiocinas CC (CCR-2) desempeñan una función fundamental en la atracción de leucocitos a sitios de inflamación y posteriormente en la activación de estas células. Cuando la quimiocina MCP-1 se une a CCR-2, induce un rápido aumento en la

concentración de calcio intracelular, aumento de la expresión de moléculas de adhesión celular, desgranulación celular y la promoción de la migración de leucocitos. La demonstración de la importancia de la interacción MCP1/CCR-2 se ha proporcionado por experimentos con ratones genéticamente modificados. Los ratones MCP-1 -/- tenían números normales de leucocitos y macrófagos, pero no pudieron reclutar monocitos a sitios de inflamación después de varios tipos diferentes de exposición inmunitaria (Bao Lu y col., J. Exp. Med. 1998, 187, 601) . Asimismo, los ratones de CCR-2 -/ no pudieron reclutar monocitos ni producir interferón-γ cuando se expusieron a diversos agentes exógenos; además, los leucocitos de ratones que carecen de CCR-2 no migraron en respuesta a MCP-1 (Landin Boring y col., J. Clin. Invest. 1997, 100, 2552) , demostrándose así la especificidad de la interacción MCP-1/CCR-2. Otros dos grupos han informado independientemente de resultados equivalentes con diferentes cepas de ratones CCR-2 -/- (William A. Kuziel y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 12053, y Takao Kurihara y col., J. Exp. Med. 1997, 186, 1757) . La viabilidad y la salud generalmente normal de los animales MCP-1 -/- y CCR-2 -/- es notable porque la interrupción de la interacción MCP-1/CCR-2 no induce crisis fisiológica. Considerados juntos, estos datos llevan a la conclusión de que las moléculas que bloquean las acciones de MCP-1 serían útiles en el tratamiento de varios trastornos inflamatorios y autoinmunitarios. Esta hipótesis se ha validado ahora en varios modelos de enfermedad en animales diferentes, como se describe más adelante.

Se sabe que la MCP-1 está regulada por incremento en pacientes con artritis reumatoide (Alisa Koch y col., J. Clin. Invest. 1992, 90, 772 - 779) . Además, varios estudios han demostrado el posible valor terapéutico del antagonismo de la interacción MCP-1/CCR2 en el tratamiento de artritis reumatoide. Recientemente se mostró que una vacuna de ADN que codificaba MCP-1 mejoraba la poliartritis crónica inducida por adyuvantes en ratas (Sawsan Youssef y col., J. Clin. Invest. 2000, 106, 361) . Asimismo, los síntomas de enfermedades inflamatorias podrían controlarse mediante la administración directa de anticuerpos para MCP-1 a ratas con artritis inducida por colágeno (Hiroomi Ogata y col., J. Patol. 1997, 182, 106) , o artritis inducida por la pared de células estreptocócicas (Ralph C. Schimmer y col., J. Immunol. 1998, 160, 1466) . Quizás más significativo, se mostró que un antagonista de péptido de MCP-1, MCP-1 (9-76)... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula (II) :

en la que 5 W se selecciona de H, I y Br;

Pg, en cada aparición, se selecciona independientemente de un grupo protector de amina, seleccionado del grupo que consiste en: 2, 7-di-t-butil-[9- (10, 10-dioxo-10, 10, 10, 10-tetrahidrotioxantil) ]metiloxicarbonilo; 2-trimetilsililetiloxicarbonilo;

2-feniletiloxicarbonilo; 1, 1-dimetil-2, 2-dibromoetiloxicarbonilo; 1-metil-1- (4-bifenilil) etiloxicarbonilo; benciloxicarbonilo; p-nitrobenciloxicarbonilo;

2- (p-toluenosulfonil) etiloxicarbonilo; m-cloro-p-aciloxibenciloxicarbonilo; 5-benzoisoxazolilmetiloxicarbonilo; p- (dihidroxiboril) benciloxicarbonilo; m-nitrofeniloxicarbonilo;

o-nitrobenciloxicarbonilo; 3, 5-dimetoxibenciloxicarbonilo; 3, 4-dimetoxi-6-nitrobenciloxicarbonilo; N'-p-toluenosulfonilaminocarbonilo; t-amiloxicarbonilo;

p-deciloxibenciloxicarbonilo; diisopropilmetiloxicarbonilo; 2, 2-dimetoxicarbonilviniloxicarbonilo; di (2-piridil) metiloxicarbonilo; 2-furanilmetiloxicarbonilo y

tert-butiloxicarbonilo.

2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que W se selecciona de H, I y Br; y Pg, en cada aparición, se selecciona independientemente de benciloxicarbonilo (Cbz) y terc-butiloxicarbonilo

(Boc) .