Un procedimiento para obtener un extracto rico en proantocianidinas partiendo de frutas o extractos ya previamente purificados de fruta rica en proantocianidinas,

en el que dicha fruta es el arándano rojo (Vaccinium macrocarpon), que comprende las siguientes etapas:

a) tratar la fruta triturada o un extracto ya previamente purificado rico en proantocianidinas con etanol acuoso, teniendo una concentración de etanol que oscila desde el 50 hasta el 80 % en volumen,

b) filtrar la mezcla procedente de la etapa (a),

c) concentrar la disolución filtrada procedente de la etapa (b) a vacío,

d) opcionalmente almacenar el producto concentrado procedente de la etapa (c), producto que opcionalmente se diluyó previamente con agua desmineralizada, durante un tiempo que oscila desde 5 hasta 24 horas,

e) diluir con agua desmineralizada el producto almacenado procedente de la etapa (c) o el producto almacenado concentrado procedente de (d) en caso de que esta dilución con agua no se llevara a cabo en la etapa (d),

f) filtrar la mezcla procedente de la etapa (e),

g) cargar la disolución en una resina polimérica reticulada alifática macrorreticular,

h) lavar con agua desmineralizada dicha resina,

i) eluir la resina polimérica reticulada alifática macrorreticular procedente de la etapa (h) con etanol acuoso teniendo un contenido en etanol de desde el 50 hasta el 80 % en volumen,

j) concentrar la disolución eluida procedente de la etapa anterior a vacío,

k) secar el producto concentrado procedente de la etapa (j) a vacío, o secar por pulverización, en el que dicha etapa (a) se lleva a cabo durante tiempos que oscilan desde 10 minutos hasta 2 horas.

Procedimiento de preparación de extractos ricos en proantocianidinas

5 Campo de la invención

La presente invención se refiere a extractos que contienen altas cantidades de proantocianidinas y al procedimiento de preparación relacionado que implica el uso como reactivos de partida de frutas, o extractos ya previamente purificados de fruta rica en proantocianidinas, siendo dicha fruta el arándano rojo (Vaccinium macrocarpon) .

Antecedentes tecnológicos

Las proantocianidinas, concretamente los taninos condensados, son ubicuos y se encuentran entre los derivados de fenol naturales más abundantes. Las proantocianidinas son mezcla de oligómeros y polímeros compuestos por unidades de repetición de flavan-3-ol unidas a través de enlaces C4-C8 o C4-C6. Las unidades de flavan-3-ol pueden estar también doblemente unidas mediante un doble enlace adicional entre C2-07 (tipo A) . Las dimensiones de las proantocianidinas se definen por el grado de polimerización (GP) .

Los flavan-3-oles más comunes contenidos en proantocianidinas son afzalequina, epiafzalequina, catequina, epicatequina, galocatequina, epigalocatequina. Las proantocianidinas que consisten exclusivamente en catequina y epicatequina son las denominadas procianidinas, mientras que aquéllas que contienen afzalequina y epiafzalequina o galocatequina y epigalocatequina son la propelargonidina y prodelfinidina. Las procianidinas son las más abundantes en la naturaleza.

Las actividades biológicas de las proantocianidinas de las que se ha informado en la bibliografía incluyen la actividad antitumoral, antiinflamatoria, antienvejecimiento, antioxidante, antialérgica, antibacteriana especialmente de las vías urinarias, promover el crecimiento capilar, etc. (Bart Schwitters/Jack Masquelier "21st centur y Biophylaxis substance OPC, Fragrance Journal , 50-135 (1997) ; Tomoya Takajashi y col., Journal of investigative dermatology 112 (310, 316 (1999) .

Se conocen muchos métodos para preparar extractos enriquecidos en proantocianidinas a partir de plantas o frutas de diverso origen tales como el arándano rojo (Vaccinium macrocarpon, ) , semillas de uva, hojas de té, cacahuetes, corteza de pino etc.

Algunos de estos procedimientos abarcan etapas de extracción llevadas a cabo con disolventes alcohólicos acuosos en presencia de ácidos minerales como por ejemplo el procedimiento en el documento CN1454896, o abarcan el uso de disolventes supercríticos como CO2 tal como se da a conocer en el documento CN174923, o requieren el uso de una membrana de ultrafiltración o implican filtración por ósmosis inversa tal como en el procedimiento dado a conocer en el documento JP63267774.

Otros procedimientos requieren una combinación de múltiples etapas de extracción, usando varios tipos de disolventes orgánicos o bien solos o combinados entre sí, asociados mediante al menos una etapa en la que una disolución que contiene los extractos se absorbe en una resina polimérica macrorreticular, el líquido absorbido se 45 eluye posteriormente, se concentra y se atomiza tal como se da a conocer en los procedimientos descritos en los documentos US6608102, US 6.440.471.

Según otros procedimientos es posible obtener extractos que contienen cantidades muy altas de proantocianidinas. Por ejemplo es posible obtener extractos con un contenido total en proantocianidinas que oscila desde el 80-90 % con proantocianidinas oligoméricas (OPC) en cantidades de desde el 23 hasta el 45 % con el procedimiento dado a conocer en el documento CA2539724 que implica el tratamiento de una planta como la corteza de pino o un extracto o jugo de la misma, con al menos dos tipos de resinas absorbentes que difieren en al menos una de las siguientes características, concretamente el tipo de material, radio de poro, área superficial específica y intervalo de distribución de peso molecular o es posible obtener extractos que tienen un contenido total 55 en proantocianidinas de desde el 67 hasta el 85 % y un contenido en OPC de desde el 12, 5 hasta el 51 %, comprendiendo el procedimiento dado a conocer en el documento EP1602653 someter un extracto o un jugo exprimido de una planta a una combinación de un tratamiento con una sal o un alcaloide y un tratamiento con una resina absorbente sintética.

A pesar de la gran abundancia de procedimientos de la técnica anterior que permiten obtener un extracto que tenga un alto título en proantocianidinas, los extractos comercialmente disponibles tienen un título en proantocianidinas que no supera el 7 %.

Por lo tanto, esto significa que los procedimientos de la técnica anterior para preparar un extracto que tenga 65 un alto título en proantocianidinas no son fácilmente realizables a escala industrial, por muchos motivos tales como por ejemplo el uso de disolventes de extracción tóxicos o una temperatura de extracción extrema (aproximadamente 100 º C) durante largos periodos de tiempo (aproximadamente 24 horas) , el uso de dispositivos a presión como en el caso de fluidos supercríticos, o el uso de membrana de ultrafiltración.

Se sentía por lo tanto la necesidad de tener un procedimiento para preparar extractos que tienen un alto título 5 en proantocianidinas que no padezca la desventaja de los procedimientos de la técnica anterior y que por lo tanto pudiera realizarse fácilmente a escala industrial.

Sumario de la invención

El solicitante ha descubierto un procedimiento fácilmente realizable a escala industrial que permite obtener un extracto que tenga un alto título en proantocianidinas.

Este procedimiento permite obtener un extracto rico en proantocianidinas partiendo de extractos ya previamente purificados de fruta o de frutas ricas en proantocianidinas siendo dicha fruta el arándano rojo 15 (Vaccinium macrocarpon) , y comprende las siguientes etapas:

a) tratar la fruta triturada que contiene altas cantidades en proantocianidinas o un extracto ya previamente purificado rico en proantocianidinas con etanol acuoso, teniendo una concentración de etanol que oscila desde el 50 hasta el 80 % en volumen, b) filtrar la mezcla procedente de la etapa (a) , c) concentrar la disolución filtrada procedente de la etapa (b) a vacío, d) opcionalmente almacenar el producto concentrado procedente de la etapa (c) , producto que opcionalmente se diluyó previamente con agua desmineralizada, durante un tiempo que oscila desde 5 hasta 24 horas, e) diluir con agua desmineralizada el producto almacenado procedente de la etapa (c) o el producto almacenado concentrado procedente de (d) en caso de que esta dilución con agua no se llevara a cabo en la etapa (d) , f) filtrar la mezcla procedente de la etapa (e) g) cargar la disolución en una resina polimérica reticulada alifática macrorreticular, h) lavar con agua dicha resina, i) eluir la resina polimérica reticulada alifática macrorreticular procedente de la etapa (h) con etanol acuoso teniendo un contenido en etanol de desde el 50 hasta el 80 % en volumen, j) concentrar la disolución eluida procedente de la etapa anterior a vacío, k) secar el producto concentrado procedente de la etapa (j) a vacío, o mediante secado por pulverización, en el que dicha etapa (a) se lleva a cabo durante tiempos que oscilan desde 10 minutos hasta 2 horas.

Este procedimiento permite obtener extractos que contiene más del 10 % de proantocianidinas, preferiblemente más del 15 %, incluso más preferiblemente más del 20 %, usando condiciones de extracción leves con etanol acuoso, y también sólo una absorción con una resina polimérica macrorreticular usando en la etapa de desorción disolventes no tóxicos como etanol acuoso.

Descripción de las figuras

La figura 1 notifica el cromatograma de HPLC, la figura 2: los tiempos de retención, el área, la concentración correspondiente expresada en mg/ml de cada pico, y finalmente la concentración total de la muestra analizada tal 45 como se prepara en el ejemplo 1.

Descripción detallada de la invención

Como fruta rica en proantocianidinas para el fin de la presente invención se pretende indicar el arándano rojo.

En el procedimiento según la presente invención se usa arándano rojo (Vaccinium macrocarpon) como material de partida.

En la etapa (a) el disolvente de extracción tiene preferiblemente un contenido etanólico de desde el 60 hasta 55 el 75 %, más preferiblemente el 70 % en volumen.

El tiempo de extracción está comprendido preferiblemente entre 10' y 2 horas, más preferiblemente es de 30'.

1. Un procedimiento para obtener un extracto rico en proantocianidinas partiendo de frutas o extractos ya previamente purificados de fruta rica en proantocianidinas, en el que dicha fruta es el arándano rojo (Vaccinium 5 macrocarpon) , que comprende las siguientes etapas:

a) tratar la fruta triturada o un extracto ya previamente purificado rico en proantocianidinas con etanol acuoso, teniendo una concentración de etanol que oscila desde el 50 hasta el 80 % en volumen, b) filtrar la mezcla procedente de la etapa (a) , c) concentrar la disolución filtrada procedente de la etapa (b) a vacío, d) opcionalmente almacenar el producto concentrado procedente de la etapa (c) , producto que opcionalmente se diluyó previamente con agua desmineralizada, durante un tiempo que oscila desde 5 hasta 24 horas, e) diluir con agua desmineralizada el producto almacenado procedente de la etapa (c) o el producto almacenado concentrado procedente de (d) en caso de que esta dilución con agua no se llevara a cabo en la etapa (d) , f) filtrar la mezcla procedente de la etapa (e) , g) cargar la disolución en una resina polimérica reticulada alifática macrorreticular, h) lavar con agua desmineralizada dicha resina, i) eluir la resina polimérica reticulada alifática macrorreticular procedente de la etapa (h) con etanol acuoso teniendo un contenido en etanol de desde el 50 hasta el 80 % en volumen, j) concentrar la disolución eluida procedente de la etapa anterior a vacío, k) secar el producto concentrado procedente de la etapa (j) a vacío, o secar por pulverización, en el que dicha etapa (a) se lleva a cabo durante tiempos que oscilan desde 10 minutos hasta 2 horas.

2. El procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicho etanol acuoso usado en la etapa (a) tiene un contenido etanólico de desde el 60 hasta el 75 % en volumen.

3. El procedimiento según la reivindicación 2, en el que dicho etanol acuoso tiene un contenido en etanol del 70 %

en volumen. 30

4. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que dicho tiempo es 30'.

5. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que la fruta triturada procedente del

tratamiento con etanol se prensa antes de llevar a cabo la etapa (b) . 35

6. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en el que los tiempos para el almacenamiento de la etapa (d) están comprendidos entre 8 h y 20 horas.

7. El procedimiento según la reivindicación 6, en el que dicho tiempo de almacenamiento es de 15 horas. 40

8. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que en la etapa (i) se usa un etanol acuoso teniendo un contenido en etanol de desde el 60 hasta el 75 % en volumen.

9. El procedimiento según la reivindicación 8, en el que dicho etanol acuoso tiene un contenido en etanol del 70 % 45 en volumen.