Composición vacunal caracterizada porque comprende, a título de principio activo,

un producto inmunógeno estable que comprende unos heterocomplejos inmunógenos proteicos constituidos por asociaciones entre (i) unas moléculas de proteínas antigénicas desactivadas, respectivamente seleccionadas de entre el IFN , la IL-4 y el TNF , y (ii) unas moléculas proteicas portadoras en las que menos del 40 por ciento de las proteínas antigénicas desactivadas (i) están unidas con las moléculas proteicas portadoras (ii) mediante un enlace covalente

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a unas composiciones vacunales.

TÉCNICA ANTERIOR

Las citoquinas son unas proteínas producidas por numerosas células, tales como los linfocitos, monocitos, células 5 dendríticas, mastocitos, fibroblastos, que ejercen unos efectos autocrinos, paracrinos y endocrinos sobre numerosos tejidos. Las citoquinas influyen en la supervivencia, la proliferación, la diferenciación y la migración celular. Las citoquinas pueden ser agrupadas, bastante esquemáticamente según su actividad, y algunas son importantes en la inducción de la muerte celular, por un efecto directo o indirecto, a través de la generación de linfocitos citotóxicos o de células NK (IFN, TFN, IL-2, IL-15). Otras citoquinas participan en las respuestas alérgicas tales como IL-3, IL-4, IL-5, 10 IL-9 e IL-13. Algunas son esenciales en la regulación de la producción de los anticuerpos (IL-4, IL-5, IL-6, IL-9 e IL-10 e IL-13) mientras que otras ejercen una acción pro-inflamatoria (IL-1, TNF, IFN, quimioquinas). Otras citoquinas poseen también unas propiedades anti-inflamatorias (TGF-, IL-4, IL-10). Esta clasificación no refleja sin embargo la complejidad de las interacciones entre las citoquinas y sus dianas celulares, caracterizadas por una redundancia y un pleiotropismo importante, sin hablar de los efectos agonistas y antagonistas. Estas características del sistema 15 inmunitario y de las citoquinas en particular explican que cualquier interferencia con su funcionamiento, a través de por ejemplo un anticuerpo que bloquea una citoquina, tiene unos efectos importantes in vivo.

Hasta ahora, las estrategias de terapia vacunal tenían como diana principalmente dirigidas sobre el agresor antigénico, ya fuera un microorganismo, una célula o un alérgeno, pero no buscaban combatir la desregulación de las citoquinas. Sin embargo, debido al papel clave de las citoquinas, implicadas por ejemplo en los fenómenos de escape a las 20 defensas inmunitarias, o en los fenómenos de inflamación, su desactivación en unos pacientes con el fin de actuar sobre su actividad o su producción es un objetivo en la actualidad buscado habitualmente, particularmente cuando el organismo no dispone de antagonistas naturales susceptibles de equilibrar eficazmente estas citoquinas. Se conocen, por ejemplo, unos anticuerpos anticitoquina, pero estos últimos son de título poco elevado debido a que las células B que los producen están latentes. Además, estos anticuerpos naturales son de baja afinidad y no neutralizan la actividad 25 de la citoquina correspondiente.

En particular, el fenómeno de escape a las defensas inmunitarias celulares del hospedante por inducción de su parálisis in situ es una estrategia utilizada por numerosos cánceres y es necesario para su supervivencia. Inicialmente, la inmunosupresión sigue localizada a nivel del tumor, debido a que el individuo es todavía capaz de defenderse contras las demás agresiones tales como las infecciones. Sin embargo, en una etapa más tardía, esta 30 inmunosupresión puede extenderse, generalizarse, tal como lo demuestran la diseminación de metástasis y la gran vulnerabilidad de la persona que padece cáncer frente a las infecciones, fuera incluso de los efectos que se deben a la quimioterapia o radioterapia. En resumen, este escape al control del sistema inmunitario se debe a una parálisis del sistema inmunitario (inmunosupresión), que le impide funcionar normalmente. Esta inmunosupresión utiliza unos factores paralizantes, incluyendo unas citoquinas, producidos por las células cancerígenas o su entorno. La parálisis 35 local de las células del sistema inmunitario o inmunosupresión representa por lo tanto un arma importante de las células cancerígenas que les permite escapar al sistema inmunitario del hospedante.

El fenómeno de escape a las defensas inmunitarias celulares del hospedante por inducción de su parálisis in situ es una estrategia utilizada asimismo por el VIH. La inmunosupresión generalizada observada en el caso del SIDA se caracteriza en particular por una sobreproducción de IFN por las células que presentan el antígeno y particularmente 40 las células dendríticas de tipo 2 (DC2). Las actividades inmunosupresoras del IFN se deben a su capacidad para inducir la producción de la citoquina IL-10 por las células T reguladoras (denominadas anteriormente T supresoras).

Una primera estrategia de inhibición de la actividad biológica de las citoquinas consiste en inyectar una construcción inmunógena a un paciente. A título de ejemplo, con el fin de provocar el reconocimiento de un antígeno de interés, por ejemplo una citoquina, por las células B, se han realizado diversas construcciones inmunógenas en el estado de la 45 técnica. Una forma de estas construcciones inmunógenas consiste en un acoplamiento covalente del antígeno de interés sobre una molécula portadora, aportando la molécula portadora unas estructuras reconocidas por los linfocitos T auxiliares (células “T helper”), en asociación con unas moléculas de clase II del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH), y que activan los linfocitos T auxiliares que producen entonces diversas citoquinas, incluyendo la IL-2, citoquinas que activarán a su vez los clones de células B específicas del antígeno de interés. Las 50 células B específicas del antígeno de interés, una vez activadas, se multiplicarán y producirán unos anticuerpos específicos del antígeno de interés, siendo éste el objetivo buscado. En general, este tipo de construcciones inmunógenas consiste en unos productos de acoplamiento químico covalente entre el antígeno de interés y la molécula portadora, los cuales, después de una etapa de purificación y de eliminación de los productos no acoplados, son unos productos finales de estructura química bien definida. 55

Sin embargo, dichas construcciones inmunógenas adolecen de unos inconvenientes, entre los cuales se puede citar el plazo importante entre la inyección de dichas construcciones y la aparición de una respuesta inmune dirigida contra la citoquina diana. Además, a veces es imposible vacunar eficazmente a los pacientes con unas construcciones inmunógenas anticitoquinas, cuando dichas citoquinas alteran justamente la intensidad o la calidad de la respuesta

inmune. En efecto, en el marco por ejemplo del cáncer o del SIDA, en los que se observa una inmunosupresión de gran amplitud, la administración de una composición inmunógena debe intervenir, para ser eficaz, en una etapa precoz de la enfermedad, en particular antes de que la inmunosupresión sea demasiado importante.

Por lo tanto, existe una necesidad en el estado de la técnica de unos anticuerpos anti-citoquinas que permitan tratar a los pacientes que presentan una depresión del sistema inmunitario. Estos anticuerpos actúan directamente sobre las 5 citoquinas implicadas en la inmunosupresión o también en el proceso inflamatorio. Dicho tratamiento mediante unos anticuerpos anticitoquinas permite restablecer por lo menos temporalmente la respuesta inmunitaria y puede servir entonces previamente a la administración de composiciones inmunógenas.

En el estado de la técnica se conocen ya unos anticuerpos anti-citoquinas. Se puede citar a título de ejemplo la solicitud de patente EP 1 285 930 y la solicitud de patente US nº 6.509.015 correspondiente que describen unos 10 anticuerpos humanos, y en particular unos anticuerpos recombinantes humanos, que se unen de manera específica al TNF, una citoquina producida en numerosos tipos celulares, y conocida por su papel en las enfermedades autoinmunes, las infecciones o los rechazos de injerto.

Se puede citar asimismo la solicitud internacional WO 00/56772 que describe unos anticuerpos humanos, preferentemente recombinantes, que se unen específicamente a la IL-2 humana, y que neutralizan su actividad in vivo 15 e in vitro.

Se pueden citar asimismo las investigaciones de Zagury et al., que describen la obtención, en unos pacientes inmunodeficientes asintomáticos infectados por el virus VIH, de anticuerpos neutralizantes dirigidos contra el interferón , mediante la administración en estos pacientes de moléculas de interferón  desactivado (véase Zagury et al., 1999, Biorned & Pharmcother, Vol. 53: 90-92). 20

Por último, se puede citar la solicitud de patente US 2003/0099647 que describe unos agentes de unión al interferón  y en particular unos dominios de unión a unos anticuerpos y a unos antígenos que se unen selectivamente... [Seguir leyendo]

1. Composición vacunal caracterizada porque comprende, a título de principio activo, un producto inmunógeno estable que comprende unos heterocomplejos inmunógenos proteicos constituidos por asociaciones entre (i) unas moléculas de proteínas antigénicas desactivadas, respectivamente seleccionadas de entre el IFN, la IL-4 y el TNF, y (ii) unas moléculas proteicas portadoras en las que menos del 40 por ciento de las proteínas antigénicas desactivadas (i) están 5 unidas con las moléculas proteicas portadoras (ii) mediante un enlace covalente.

2. Composición vacunal según la reivindicación 1, caracterizada porque comprende además unos oligodesoxinucleótidos CpG a título de adjuvante.

3. Composición vacunal, caracterizada porque comprende, a título de principio activo, un producto inmunógeno estable que comprende unos heterocomplejos inmunógenos proteicos constituidos por asociaciones entre (i) unas moléculas 10 de proteínas antigénicas desactivadas, respectivamente seleccionadas de entre el IFN, la IL-4 y el TNF, y (ii) unas moléculas proteicas portadoras en las que menos del 40 por ciento de las proteínas antigénicas desactivadas (i) están unidas con las moléculas proteicas portadoras (ii) mediante un enlace covalente para la utilización como medicamento.