Procedimiento para el examen de los tumores sólidos.

Procedimiento in vitro para analizar los tumores sólidos, que comprende la medición,

en una muestra, de la cantidad de anticuerpo contra el antígeno del tumor de Wilms 1 y utilizar el valor de la medición como un marcador clínico para el análisis.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E09150609.

Solicitante: INTERNATIONAL INSTITUTE OF CANCER IMMUNOLOGY, INC..

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 13-9, Enoki-cho Suita -shi Osaka 564-0053 JAPON.

Inventor/es: SUGIYAMA, HARUO.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N33/574 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para el cáncer.

PDF original: ES-2389328_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Procedimiento para el examen de los tumores sólidos.

Campo técnico

La presente invención se refiere a un procedimiento de examen para una enfermedad relacionada con WT1 y, más particularmente, a un procedimiento para analizar la presencia de dicha enfermedad y evaluar la progresión, el curso de la curación y el pronóstico de la enfermedad.

Antecedentes de la técnica

El gen WT1 constituye un factor de transcripción de dedos de zinc, aislado como un gen asociado etiológicamente con el tumor de Wilm y su producto génico (la proteína WT1) , presenta una estructura que comprende un dominio de represión, un dominio de activación un dedo de zinc.

Los presentes inventores informaron anteriormente de que el nivel de expresión del gen WT1 es alto en la leucemia aguda, que este nivel de expresión está relacionado inversamente con el pronóstico de la enfermedad, y que el MRD (enfermedad residual mínima) de la leucemia aguda, puede detectarse midiendo dicho nivel de expresión [Blood, Vol. 84, nº 9, pág 3071 (1994) ]. Además, los inventores descubrieron que midiendo el nivel de expresión del gen WT1, pueden detectarse varios tipos de cáncer sólido y de tejidos atípicos (WO97/39354) .

La determinación de dicho nivel de expresión del gen WT1, que comprende la medición del producto de transcripción o de traducción del gen WT1, posee un gran significado clínico en la búsqueda de la presencia de una enfermedad relacionada con el WT1.

Exposición de la invención

El objetivo de la presente invención consiste en proporcionar un nuevo procedimiento para el examen de una enfermedad relacionada con WT1, particularmente de un procedimiento efectivo para diagnosticar la enfermedad y evaluar la eficacia de una terapia y el pronóstico de esta enfermedad.

Durante su continua investigación para cumplir con el objetivo anteriormente mencionado, los inventores descubrieron que las cantidades del anticuerpo anti-WT1 detectadas en el suero o de otras muestras de ensayo de los pacientes con la enfermedad relacionada con el WT1, disminuyen con la curación de la enfermedad, de forma que la cantidad del anticuerpo anti-WT1 puede constituir un nuevo marcador clínico de la enfermedad relacionada con WT1, y que midiendo dicha cantidad, puede detectarse la presencia de una enfermedad relacionada con WT1, así como pueden controlarse y evaluar con una alta seguridad la progresión, curso de la curación y pronóstico de la enfermedad.

La presente invención se ha desarrollado basándose en los hallazgos anteriores.

La invención proporciona un procedimiento para analizar una enfermedad relacionada con WT1, que comprende la medición de la cantidad de anticuerpo contra WT1 en una muestra y utilizando el valor de la medición como un marcador clínico o índice para el análisis.

La presente invención proporciona:

[1] Un procedimiento in vivo de análisis de tumores sólidos, que comprende medir la cantidad de anticuerpo contra el antígeno del tumor de Wilms 1 en una muestra y que utiliza el valor de medición como un marcador clínico para el análisis.

[2] El procedimiento según [1], en el que el procedimiento está destinado a analizar la presencia o ausencia de tumores sólidos.

[3] El procedimiento según [1], en el que el procedimiento está destinado a evaluar la progresión, curso de curación, o pronóstico de los tumores sólidos.

[4] El procedimiento según [1], en el que la determinación de la cantidad de anticuerpo anti-tumor de Wilms 1 es realizada mediante inmunorreación que utiliza un antígeno de tumor de Wilms 1.

[5] El procedimiento según [2], en el que el antígeno de tumor de Wilms 1 es una proteína de tumor de Wilms 1 que contiene un dominio de represión y un dominio de activación pero que no contiene dedos de cinc.

[6] El procedimiento según [1], en el que el anticuerpo anti-tumor de Wilms 1 es un anticuerpo IgG o un anticuerpo IgM.

[7] El procedimiento según [3], en el que el curso temporal de la cantidad de anticuerpo anti-tumor de Wilms 1 es utilizado como un marcador clínico.

[8] El procedimiento según [3], en el que la proporción cuantitativa de anticuerpo IgI anti-tumor de Wilms 1 frente al anticuerpo IgM anti-tumor de Wilms 1 es utilizada como un marcador clínico.

En particular, la presente exposición proporciona las maneras siguientes de analizar la enfermedad relacionada con WT1:

1. Procedimiento que comprende la detección de la presencia de una enfermedad relacionada con WT1.

2. Procedimiento para evaluar la progresión, curso de la curación, y pronóstico de una enfermedad relacionada con WT1.

3. Procedimiento para controlar la progresión de un síndrome demielodisplásico a leucemia.

4. Procedimiento para dilucidar una remisión completa de la leucemia.

5. Procedimiento que comprende el ensayo de un anticuerpo anti-WT1 mediante una inmunorreacción utilizando un antígeno WT1.

6. Procedimiento tal como se ha definido anteriormente, en el que el antígeno WT1 es una proteína WT1 que contiene un dominio de represión y un dominio de activación, pero que carece de un dedo de zinc.

7. Procedimiento tal como se ha definido anteriormente, en el que el anticuerpo anti-WT1 es un anticuerpo IgG o un anticuerpo IgM.

8. Procedimiento que comprende la utilización a lo largo del tiempo de la cantidad del anticuerpo anti-WT1 como un marcador clínico.

9. Procedimiento que comprende la utilización de la proporción cuantitativa del anticuerpo IgG y del anticuerpo IgM contra WT1, como un marcador clínico.

La representación de los aminoácidos, péptidos, secuencias nucleótidas, ácidos nucleicos, etc., mediante las abreviaturas en la presente memoria, está de acuerdo invariablemente con las normas del IUPAC-IUB, "The Guidelines for Drafting Specifications and Equivalents referring to Nucleotide Sequences or Amino Acid Sequences" (editado por la Oficina Japonesa de Patentes) y las convenciones que predominan en este campo particular de la técnica.

El procedimiento para analizar la enfermedad relacionada con WT1, según la invención, se lleva a cabo midiendo la cantidad de anticuerpo anti-WT1 en una muestra.

La muestra que se menciona anteriormente no está limitada, siempre que comprenda un anticuerpo anti-WT1. La muestra puede ser una derivada de un paciente que padezca una enfermedad relacionada con WT1, o un paciente del que se sospecha padece la enfermedad, y una muestra derivada de un paciente que recibió tratamiento por la enfermedad relacionada con WT1. La muestra puede estar constituida por un fluido corporal en el que se encuentran generalmente anticuerpos, tal como la sangre, orina o similares.

Haciendo referencia al análisis con respecto a la presencia de la enfermedad relacionada con el WT1, según los procedimientos descritos en la presente memoria pueden ejemplificarse diversas enfermedades relacionadas con WT1, tales como dicha leucemia aguda y otros tipos de leucemia.

El anticuerpo anti-WT1 que va a ensayarse según la invención, es un anticuerpo para el producto de expresión (proteína WT1) del gen WT1 [Cell, 60, 509, (1990) ; Nature, 343, 774 (1990) ]. Comprende todos los anticuerpos relevantes que se detecten en un individuo. El anticuerpo como tal incluye varias inmunoglobulinas tales como el anticuerpo IgG, el anticuerpo IgA y el anticuerpo IgM.

El ensayo del anticuerpo anti-WT1 según la invención, puede llevarse a cabo mediante diversas procedimientos rutinarios que se utilizan en la técnica de la determinación de anticuerpos, tales como un procedimiento de inmunoensayo que utiliza un antígeno WT1, entre otros. Un ejemplo específico del procedimiento del inmunoensayo es una técnica sándwich en fase sólida.

La técnica sándwich en fase sólida puede llevarse a cabo típicamente de la siguiente forma: Un antígeno (antígeno WT1) que puede realizar una reacción específica antígeno-anticuerpo, con el anticuerpo objetivo contra WT1 (anticuerpo anti-WT1) , se inmoviliza en primer lugar, añadiéndose entonces una muestra. Entonces, tiene lugar una reacción antígeno-anticuerpo, entre... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Procedimiento in vitro para analizar los tumores sólidos, que comprende la medición, en una muestra, de la cantidad de anticuerpo contra el antígeno del tumor de Wilms 1 y utilizar el valor de la medición como un marcador clínico para el análisis.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento está destinado a analizar la presencia o ausencia de tumores sólidos.

3. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento está destinado a evaluar la progresión, curso de la curación, o pronóstico del MDS y/o de los tumores sólidos.

4. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la determinación de la cantidad del anticuerpo anti-tumor de 10 Wilms 1, se lleva a cabo mediante una inmunorreacción que utiliza un antígeno del tumor de Wilms 1.

5. Procedimiento según la reivindicación 2, en el que el antígeno del tumor de Wilms 1 es una proteína del tumor de Wilms 1 que contiene un dominio de represión y un dominio de activación pero que no contiene un dedo de zinc.

6. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo anti-tumor de Wilms 1 es un anticuerpo IgG o un anticuerpo IgM.

7. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que el curso temporal de la cantidad del anticuerpo anti-tumor de Wilms 1, se utiliza como un marcador clínico.

8. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que la proporción cuantitativa del IgG anticuerpo anti-tumor de Wilms 1, con respecto al anticuerpo IgM anti-tumor de Wilms 1, se utiliza como marcador clínico.


 

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